Лабораторная диагностика хламидиоза


Заболевания, передающиеся половым путем, не только неприятные, но еще и довольно опасные. Одно из самых распространенное из них — хламидиоз. Он может протекать бессимптомно, но при этом нанести большой вред всему организму. Как не пропустить появление совершенно незаметных признаков инфекции и что делать, чтобы избавиться от деликатной проблемы раз и навсегда?

Хламидиоз: что это и когда назначают анализы на выявление инфекции

Инфекционное заболевание, вызываемое бактериями хламидиями (Chlamydia trachomatis) в медицине известно как хламидиоз. Это одно из самых часто встречающихся заболеваний, которые передаются половым путем (ЗППП). Отметим, что Chlamidia trachomatis имеет некоторые свойства, присущие вирусам, поэтому хламидиоз порой трудно диагностировать и лечить.

Когда хламидии попадают в организм человека, они начинают активно размножаться в слизистой и уже через 10 часов внедряются в клетки и разрушают их.

В организме женщины бактерии сначала поражают клетки матки, затем труб и яичников. Если вовремя не начать лечение, болезнь «перекинется» на органы брюшной полости.


У мужчин хламидии в первую очередь поражают мочеполовую систему — сначала уретру и мочеточники, затем предстательную железу, семенные пузырьки. Далее сценарий развития болезни тот же, что у женщин.

Следует знать, что хламидиоз передается не только половым путем, но и через внешнюю среду, однако такой способ инфицирования крайне редок. Зато ребенок, прошедший через зараженные родовые пути матери, заболевает в более чем половине случаев, также высок риск внутриутробного заражения. Поэтому при планировании беременности врач обязательно назначает анализ на хламидиоз.

Чаще всего на первом этапе хламидиоз протекает бессимптомно. Лишь спустя годы (латентный период может длиться до нескольких лет) возникают первые признаки инфекции — небольшое повышение температуры, интоксикация или слабость. Через десять дней эти симптомы могут исчезнуть и далее появляться редко и в слабовыраженной форме. Бывает так, что хламидиоз дает о себе знать так же, как и многие другие ЗППП: неприятными или даже болезненными ощущениями при мочеиспускании, зудом половых органов. Возможны так называемые стекловидные выделения (у женщин). Если не выявить хламидиоз и не начать его лечить, он вызовет другие заболевания мочеполовой системы, которые легко диагностировать по ярко выраженным симптомам: нетипичные выделения, резкая боль при мочеиспускании, постоянные боли в области половых органов, зуд и жжение.


Если человек обнаружил у себя какой-либо из вышеперечисленных симптомов, необходимо сдать анализ на хламидии. Существует несколько типов анализов, которые отличаются стоимостью и точностью результатов. Диагностировать хламидиоз можно с помощью анализа крови, мочи, слюны, конъюнктивной жидкости, мазка или соскоба из влагалища и шейки матки — у женщин или соскоба из уретры и эякулята — у мужчин. Биоматериал можно исследовать различными методами.

Какие анализы сдать для определения хламидиоза

Самый дешевый, быстрый (10–15 минут), но при этом и ненадежный метод выявления инфекции (точность 20–25%) — так называемый экспресс-тест (метод иммунохроматографии). Для его проведения требуется специальная тест-система, которая позволяет визуально оценивать результаты. Приобрести ее можно в аптеке. Метод редко назначается врачом, обычно его выбирает сам пациент, желающий по собственной инициативе выяснить факт инфицирования.

Цитоскопические методы обнаружения хламидий, являясь качественными, назначаются при острой фазе болезни, в случае хронической формы хламидиоза они неэффективны. Анализ заключается в помещении в ацетон или метанол биоматериала (у мужчин это соскоб из уретры, секрет простаты, у женщин — соскобы из влагалища, шейки матки, уретры), хламидия под воздействием реагентов меняет окраску и легко выявляется под микроскопом. Точность метода в части выявления хламидийной инфекции очень невысока — 10–15%. Часто проводится бесплатно в рамках ОМС в виду дешевизны.


Иммуноморфологические методы анализа соскоба с уретры или цервикального канала (прямая и непрямая иммунофлюоресценция) представляют собой обнаружение антигенов хламидий. Показания к назначению: острая или хроническая фаза хламидиоза, бесплодие непонятного происхождения, беременность с ОАА (отягощенный акушерский анамнез — наличие осложнений в предыдущей беременности). Точность анализа невелика — 50%.

Методы иммуноферментного анализа крови применяют для того, чтобы определить фазу заболевания, оценить эффективность проводимой терапии, установить хламидийное происхождение поражений негенитальных органов. Точность исследования — 60%. Показателен лишь через 5–20 дней после инфицирования, когда начнется выработка специфичных антител к хламидии.

Наиболее чувствительным в диагностики хламидиоза на сегодня признан метод полимеразной цепной реакции (ПЦР). В ходе исследования выявляется ДНК хламидий, что позволяет со 100%-ной уверенностью судить о наличии или отсутствии инфекции. Для анализа требуется соскоб из уретры или цервикального канала (для женщин), секрет предстательной железы и эякулят (для мужчин), осадок мочи, соскоб с конъюнктивы глаз, кровь, слюна. Результаты готовы уже через один-три дня.


Врач (венеролог, уролог, гинеколог) также может назначить микробиологическое исследование, или так называемый посев на хламидии. Особенность анализа в том, что он позволяет не только диагностировать хламидиоз с высокой точностью (до 90%), но и выявить наиболее эффективный антибиотик для лечения инфекции. Так как в ряду перечисленных этот метод наиболее дорогостоящий и трудоемкий (исследование требует не менее 7 дней), его назначают в случае яркой симптоматики хламидиоза или иных факторов, позволяющих врачу оценить риск заражения как высокий, а также для подбора оптимальной терапии.

Для того чтобы результаты были точны и диагноз однозначен, к сдаче биоматериала для анализа нужно подготовиться.

Как сдавать биоматериал на выявление Chlamydia trachomatis

Если вы сдаете на анализ кровь (из вены), то важно это делать натощак, иначе результат может быть искажен. Для большей точности стоит ограничить употребление жирной и жареной пищи за двое суток до пробы, алкоголь лучше исключить вообще. Также в день анализа лучше не курить.

При сдаче мочи требуется отказаться от половых контактов. Лучше собирать первую утреннюю мочу (через пару секунд после начала мочеиспускания).

Если же предполагается взятие на анализ мазка или соскоба, то за два дня до процедуры нужно воздерживаться от половых контактов. За два часа до анализа врачи рекомендуют не ходить в туалет. Женщинам лучше сдавать биоматериал в первый же день после окончания менструации. У женщин берут мазок или соскоб из шейки матки, влагалища и уретры, у мужчин — из мочеиспускательного канала. Иногда на анализ может быть взята семенная жидкость.


Редко для определения хламидиоза врачи назначают анализ синовиальной жидкости — материала в полости сустава, выделяемого синовиальной оболочкой. Чтобы взять эту пробу, делают пункцию локтевых, коленных или иных суставов. Единственная мера подготовки — стерильность сустава.

Расшифровка результатов

Однозначно расшифровать результаты сможет только врач (микробиолог, уролог, гинеколог, венеролог). Однако саму методику интерпретации не помешает знать и пациенту.

Как мы уже отмечали наиболее специфичными, точными и часто назначаемыми анализами на сегодня являются методы ИФА и ПЦР. О расшифровке их результатов мы и поговорим далее.

В случае ИФА определяется концентрация антител к хламидии:

  • сначала — IgM (появляются через 5 дней после инфицирования, пик концентрации достигается к 10-му дню);
  • после — IgA (обнаруживаются через 10 дней после инфицирования);
  • далее — IgG (появляются через 15–20 дней после заражения).

Результаты измерений приводятся в титрах, показывающих количество антител к порции материала. Например, титр IgG при хроническом течение болезни будет равен 1:100–1:6400, после проведения терапии показатель должен снизиться до 1:50. В бланке исследования пациент, скорее всего, не увидит эти цифры, обнаружив лишь одну из трех формулировок — «отрицательно», «положительно», «сомнительно». В последнем случае через 10–14 дней потребуется сдать биоматериал на повторный анализ.


Метод ПЦР относится к качественным. Результат выражается в терминах — «обнаружено» или «не обнаружено». Вероятность получения сомнительного результата приближается к нулю.

Если вы заметили какие-либо признаки дискомфорта во время мочеиспускания или полового акта, незамедлительно посетите врача. В случае постановки диагноза «хламидиоз» стоит немедленно приступить к лечению. Чем более вы оттягиваете момент начала терапии, тем сложнее будет избавиться от инфекции и тем выше будет вероятность осложнений.

Лабораторная диагностика хламидиоза

Источник: www.kp.ru

Поскольку хламидиозы распространены глобально, а их клинические проявления очень разнообраз­ны, особое значение в диагностике этих заболеваний имеют лабораторные методы. В зависимости от формы болезни материалом для исследования служат: соскобы с конъюнктивы, экссудат из бубонов, смывы из носоглотки, уретры, материал, взятый тампоном со слизистой оболочки дыхательных, мочеполовых путей, мокрота, кровь (во время лихорадки), а также секционный материал (кусочки печени, селезенки, легких и других тканей).

Бактериологическая диагностика состоит из предварительного микроскопического исследова­ния материала, выделения возбудителя и его идентификации.


едварительное исследование заключа­ется в бактериоскопии с целью обнаружения хламидий в инфицированных клетках либо с помощью прямой или непрямой иммунофлуоресценции, либо с использованием фазово-контрастной оптики, либо с применением окраски по Романовскому-Гимзе. Для выделения возбудителя исследуемым материалом заражают культуры клеток (лучше всего L-929, McCoy, HeLa) или куриные эмбрионы. Для подавления роста бактерий исследуемый материал обрабатывают гентамицином, стрептомицином и канамицином. Зараженные культуры клеток инкубируют при 35-36 °С в течение 6 дней, а затем микроскопируют с помощью фазового контраста, иммунофлуоресценции, ставят пробу на гликоген и определяют принадлежность к роду Chlamydia с помощью РСК с групповым антигеном. РСК считает­ся положительной в разведении 1:8. При заражении куриных эмбрионов исследуют желточные мешки эмбрионов, погибших в течение 4-10 дней. При отсутствии бактериального загрязнения микроскопируют препараты, окрашенные по Романовскому—Гимзе, и определяют в суспензии из желточного мешка наличие группового антигена в РСК. В случае выделения C.trachomatis производят определение серотипа. Для этой цели сыворотку морской свинки, от которой выделен данный штамм, испытывают с прототипными антигенами известных 15 серотипов с помощью метода непрямой иммунофлуоресценции.

Для обнаружения хламидий применяют также биологический метод — исследуемым материа­лом заражают белых мышей и морских свинок, так как некоторые штаммы C.psittaci патогенны для мышей, но не для свинок, и наоборот, некоторые штаммы C.trachomatis (серотипы А, В и С) не размножаются в организме мышей, но патогенны для свинок.


Новорожденные мыши погибают при внутримозговом их заражении через 5-10 дней от геморраги­ческого менингита, при интраназальном — через 5-10 дней от пневмонии. У мышей и свинок при внутрибрюшинном заражении увеличиваются печень, селезенка, а в брюшной полости образуется фибринозный экссудат. При микроскопическом исследовании у животных, зараженных разными спо­собами, обнаруживаются микроколонии хламидий в мононуклеарных клетках ликвора (при внутримоз­говом), легких (при интраназальном), селезенке, печени и в перитонеальном экссудате (при внутри-брюшинном заражении). В связи с тем, что С.pneumoniae плохо размножаются в культурах клеток и куриных эмбрионах, для их обнаружения и идентификации используют моноклональные антитела к видоспецифическому антигену в реакциях иммунофлуоресценции.

Для серологической диагностикипситтакоза (орнитоза) и венерического лимфогранулематоза применяют РСК и непрямую иммунофлуоресценцию. Комплементсвязывающие антитела появляются через 4-8 дней в небольшом количестве, затем титр их возрастает. Поэтому РСК лучше ставить с парными сыворотками. В связи с наличием у хламидий родового антигена специфичность и чувстви­тельность серологических реакций может быть повышена на основе использования моноклональных антител и выявленных с их помощью наиболее специфических для каждого вида (и серотипа) антигенов-диагностикумов.


Для диагностики хламидиозов могут быть использованы и внутрикожные аллергические пробы,но степень их специфичности зависит от степени специфичности аллергенов, так как могут быть перекрестные реакции за счет общих групповых антигенов.

Патогенные микоплазмы

Микоплазмы — уникальная группа мелких плеоморфных широко распространенных в природе грамотрицательных микроорганизмов, отличающихся от остальных бактерий полным отсутствием клеточ­ной стенки. Впервые с этой группой мельчайших бактерий столкнулся Л. Пастер, изучая плевропневмо­нию крупного рогатого скота. Его возбудитель имеет настолько малые размеры, что он не виден под микроскопом, к тому же он не растет на обычных питательных средах, поэтому Л. Пастеру не удалось его выделить. Лишь в 1898г. Е. Нокар и Э. Ру, используя сложную питательную среду, смогли получить культуру возбудителя плевропневмонии, а в 1931г. У. Эльфорд с помощью бактериальных фильтров определил размеры этого микроорганизма — 125-150нм.

У микоплазм нет клеточной стенки. Они не способны синтезировать предшественников пептидогликана (мураминовую и диаминопимелиновую кислоты) и окружены лишь тонкой трехслойной мембраной толщиной 7,5-10 нм.


этому их выделили в особый отдел Tenericutes, класс Mollicutes («нежная кожа»), порядок Mycoplasmatales. Последний включает ряд семейств, в том числе Mycoplasmataceae. К этому семейству относятся патогенные микоплазмы (вызывают заболевания у людей, зверей и птиц), условно-патогенные (очень часто бессимптомными носителями их являются культуры клеток) и микоплазмы-сапрофиты. Микоплазмы — наиболее мелкие и просто организован­ные прокариоты, способные к автономному размножению, а минимальные элементарные тельца, например Acholeplasma laldlawli, по размерам сопоставимы с минимальной исходной клеткой-прогенотой.

Размер генома у микоплазм — самый маленький для прокариот, например, у членов семейства Mycoplasmataceae он составляет 0,45 МД. В связи с этим микоплазмы имеют целый ряд особенностей: очень малые размеры (100-450нм), благодаря чему многие микоплазмы могут проходить (фильтроваться) через бактериальные фильтры; наличие минимальных количеств органелл (цитоплазматическая мембрана, нуклеоид, рибосомы); отсутствие многих биосинтетических процессов, имею­щихся у других бактерий; малые размеры колоний, образующихся на плотных средах (0,1-0,6мм); нечувствительность к бета-лактамным антибиотикам и другим агентам, угнетающим синтез клеточ­ной стенки (из-за ее отсутствия); плеоморфизм, высокая осмотическая чувствительность. Морфология их различна — шаровидные, вакуолизированные, нитевидные (нередко ветвящиеся), гранулярные (элементарные тельца) структуры. Обычно неподвижные, но некоторые виды обладают скользящей подвижностью. Размножаются путем бинарного поперечного деления шаровидных и нитевидных (фрагментация) клеток, почкования и высвобождения множества элементарных телец, образующихся в нитях. Большинство видов микоплазм для роста нуждаются в стеролах и включают их непосредственно в свою трехслойную мембрану, которая состоит главным образом из липидов и белков. Поэтому микоплазмы являются паразитами мембран эукариотных клеток и способны длительное время персистировать на мембранах различных клеток человека, млекопитающих, птиц, рыб, моллюсков, насекомых и растений.

Микоплазмы размножаются на бесклеточных питательных средах, но для своего роста большин­ство из них нуждается в холестерине, который является уникальным компонентом их мембраны (даже у микоплазм, не требующих для своего роста стеролов), в жирных кислотах и нативном белке. Для выделения культур могут быть использованы жидкие и плотные питательные среды. Рост в жидких средах сопровождается едва видимым помутнением, на плотных средах с дрожже­вым экстрактом и лошадиной сывороткой формирование колоний происходит следующим образом. В связи с их малыми размерами и отсутствием ригидной клеточной стенки микоплаз­мы способны проникать с поверхности агара и размножаться внутри его — в промежутках между нитями агара. При нанесении капли материала, содержащего микоплазмы, она проникает через имеющуюся на поверхности агара водную пленку и адсорбируется агаром, образуя небольшое уплот­нение между его нитями. В результате размножения микоплазм, приблизительно через 18 ч, внутри сплетенных нитей агара формируется маленькая сферическая колония под поверхностью агара; она растет, и через 24-48 ч инкубации достигает поверхностной водной пленки, в результа­те чего образуются две зоны роста — мутный гранулярный центр, врастающий в среду, и плоская ажурная полупросвечивающая периферическая зона (вид «глазуньи»). Колонии мелкие, диаметром от 0,1 до 0,6мм, но могут быть и меньшего (0,01мм) и большего (4,0мм) диаметра. На кровяном агаре очень часто вокруг колоний наблюдаются зоны гемолиза, обусловленного действием образую­щейся Н2О2. Колонии некоторых видов микоплазм способны адсорбировать на своей поверхности эритроциты, эпителиальные клетки различных животных, клетки культур тканей, сперматозоиды человека и некоторых животных. Адсорбция лучше происходит при 37 °С, менее интенсивно — при 22 °С и специфически угнетается антисыворотками. Температурный оптимум для роста микоплазм 36-37 °С (диапазон 22-41 °С), оптимальная рН 7,0 или слегка кислая, или слегка щелочная. Большинство видов — факультативные анаэробы, хотя лучше растут в аэробных условиях, некото­рые виды — аэробы; немногие — лучше растут в анаэробных условиях. Микоплазмы неподвижны, но отдельные виды обладают скользящей активностью; являются хемоорганотрофами, в качестве главного источника энергии используют либо глюкозу либо аргинин, редко — оба вещества, иногда — ни то, ни другое. Они способны ферментировать галактозу, маннозу, гликоген, крахмал с образо­ванием кислоты без газа; протеолитическими свойствами не обладают, лишь некоторые виды разжи­жают желатин и гидролизуют казеин. Антигенная специфичность микоплазм определяется антигена­ми цитоплазматической мембраны, в частности, содержащимися в ней белками и гликопротеидами. Микоплазмы обладают родо-, видо- и типоспецифическими антигенами. Кроме того, они могут иметь антигены, общие с антигенами мембран клеток-хозяев или включают их в результате длительной персистенции на мембранах этих клеток, что может стать причиной антигенной мимикрии и привес­ти к развитию аутоиммунной патологии.

Резистентность. Из-за отсутствия клеточной стенки микоплазмы более чувствительны, чем другие бактерии, к воздействию механических, физических и химических факторов (УФ-облучению, действию прямых солнечных лучей, рентгеновскому облучению, изменению рН среды, к действию высокой температуры, высушиванию). При нагревании до 50 °С погибают в течение 10—15 мин, очень чувствительны к обычным химическим дезинфектантам.

Семейство микоплазм насчитывает более 100 видов. Человек является естественным носителем не .менее 13 видов микоплазм, которые вегетируют на слизистых оболочках глаза, дыхательных, пищева­рительных и мочеполовых путей. В патологии человека наибольшую роль играют несколько видов Mycoplasma: M.pneumoniae, M.hominis, M.arthritidis, M.fermentans и, возможно, M.genitalium, и един­ственный вид рода Ureaplasma U.urealyticum. Основное биохимическое отличие последнего от видов Mycoplasma заключается в том, что U.urealyticum обладает уреазной активностью, которой лишены все члены рода Mycoplasma

Патогенные для человека микоплазмы вызывают у него заболевания (микоплазмозы) дыхательных, мочеполовых путей и суставов с разнообразными клиническими проявлениями.

 

Респираторный микоплазмоз

Респираторный микоплазмоз имеет глобальное распространение. По данным ВОЗ (1985г.), ежегодно болеет 8—15 млн человек. Очень часто протекает в виде острой пневмонии (сегментарной, очаговой или интерстициальной). Основной возбудитель — M.pneumoniae, значительно реже — M.hominis, и очень редко заболевание дыхательных путей у детей в возрасте до 1 года вызывает U.urealyticum.

M.pneumoniae. Основные биологические и морфологические свойства типичны для рода Mycoplasma, однако имеется ряд отличительных признаков. По форме это короткие нити длиной 2~5мкм, клетки обладают скользящей подвижностью. Размножаются путем бинарного деления и высвобождения эле­ментарных телец из нитей. Свежеизолированные колонии часто лишены полупрозрачной периферической зоны, а имеют вид приподнятой кольцевидной гранулярной структуры диаметром 30-100мкм. Растут медленнее, чем другие микоплазмы. Колонии появляются через 5—10 дней инкубации, иногда позднее. Требуется несколько последовательных пересевов, чтобы колонии приобрели вид «глазуньи».

Колонии на плотной среде адсорбируют эритроциты, трахеальные эпителиальные клетки обезьян, крыс, морских свинок, кур, клетки некоторых культур, а также сперматозоиды человека и быков. Рецепторы эритроцитов и эпителиальных клеток для M.pneumoniae разрушаются нейраминидазой; адсорбция клеток предотвращается, если микоплазмы обработать предварительно нейраминовой кислотой. M.pneumoniae вызывает гемагглютинацию эрит­роцитов человека и животных, обладает гемолитической активностью, обусловленной продукцией H2O2;митогенным действием в отношении Т- и В-лимфоцитов и цитотоксическим действием; высоко­чувствительна к эритромицину. В антигенном отношении вид M.pneumoniae представляет однородную группу, типоспецифических антигенов не обнаружено.

Резистентность к действию физических и химических факторов невелика.

Факторы патогенности:высокое сродство к эпителиальным клеткам дыхательных путей, гемадсорбционные, гемолитические, цитотоксические свойства микоплазм, их подвижность.

Эпидемиология.Источником инфекции является больной человек, а также носители, в том числе перенесшие болезнь в бессимптомной форме. Заражение происходит воздушно-капельным путем, так как возбудитель локализуется главным образом на клетках реснитчатого эпителия дыхательных путей. Респираторный микоплазмоз — малоконтагиозное заболевание, что объясняет­ся кратковременным сроком выживания возбудителя во внешней среде, поэтому для заражения требуется тесное и длительное общение с источником инфекции. Этим и обусловливается более высокая заболеваемость в организованных коллективах, в особенности во вновь организованных, где через 2—3 мес заражается до 50% его членов. Болеют чаще лица в возрасте от 1 года до 30 лет.

Патогенез и клиника.Инкубационный период длится 7-14 дней, иногда до 25 дней. Возбуди­тель адсорбируется на слизистой оболочке верхних дыхательных путей, размножается и активно распространяется по слизистой оболочке трахеи и бронхов, достигает альвеолоцитов, внедряется в межальвеолярные перегородки. В результате повреждения клеток возникают перибронхиальные, периваскулярные и интерстициальные инфильтраты. Для микоплазменной пневмонии, которая разви­вается обычно постепенно, типичен сухой или со скудной мокротой длительный изнуряющий ка­шель; физикальные изменения в легких выражены слабо или отсутствуют, поэтому пневмония выявляется при рентгенологическом исследовании. Воспалительные инфильтраты рассасываются мед­ленно — в течение 3-4 нед, иногда дольше. У детей раннего возраста нередко наблюдается двустороннее поражение легких. Течение болезни, как правило, доброкачественное.

Постинфекционный иммунитетпосле острой инфекции сохраняется в течение 5-10 лет, иногда дольше. Он обусловлен как секреторными, так и гуморальными антимикробными антителами, а также сохраняющимися более продолжительный срок антителами, подавляющими метаболизм микоплазм, и клеточными элементами (макрофаги, Т-лимфоциты). После бессимптомных и стертых форм инфекции иммунитет кратковременный и слабо выражен.

Лабораторная диагностика.Поскольку атипические пневмонии имеют различную этиологию, решающая роль в их диагностике принадлежит лабораторным методам. Для диагностики респираторного микоплазмоза (микоплазменной пневмонии) используют бактериологические и серологические методы, а также выявление микоплазм и их идентификацию с помощью иммунологических приемов. Материа­лом для бактериологического исследования служат мокрота, слизь из глотки, плевральная жидкость, лаваж (от франц. lavage — промывать, смывы с поверхности бронхиол и альвеолярных структур легких, полученные при бронхоскопии). Для получения культур посевы производят на среды, содержащие все необходимые для роста микоплазм питательные вещества. Для угнетения роста сопутствующих бакте­рий в питательную среду добавляют пенициллин и ацетат таллия, к которым M.pneumoniae устойчива. Выделенную культуру идентифицируют на основании морфологических, культуральных свойств, призна­ков, а также с помощью диагностических иммунных сывороток, полученных путем иммунизации кроликов препаратами цитоплазматических мембран M.pneumoniae.

Микоплазмы и их антигены могут быть обнаружены в исследуемом материале с помощью иммунофлуоресценции, РПГА, РАГА, ИФМ. Кроме того, для идентификации микоплазм используют еще 2 теста: угнетение роста и угнетение метаболизма, которые достигаются с помощью специфи­ческих антител.

Для серологической диагностики применяют РПГА, РСК, иммунофлуоресценцию, ИФМ с использо­ванием специфической гликолипидной фракции мембран M.pneumoniae. Нарастание титра антител определяют в парных сыворотках. В качестве одного из ускоренных методов может быть использована и внутрикожная проба с аллергеном из M.pneumoniae. Для выявления M.pneumoniae разработана ипредложена тест-система на основе ЦПР, позволяющая обнаружить носительство микоплазм даже в тех случаях, когда они не обнаруживаются никакими другими методами.

Лечение.При острой форме микоплазменной пневмонии наиболее эффективно применение эрит­ромицина и тетрациклинов.

Профилактика.Неспецифическая профилактика такая же, как в отношении острых респиратор­ных вирусных заболеваний. Для специфической профилактики разрабатываются инактивированные вакцины, химические вакцины (из антигенов цитоплазматической мембраны M.pneumoniae), а также живые вакцины из аттенуированных штаммов возбудителя.

 

Источник: cyberpedia.su

Методы диагностики хламидиоза

Методы диагностики хламидиоза у мужчин и женщин делятся на 2 направления:

  1. Для непосредственного выявления хламидий.
  2. Для обнаружения тех изменений, которые они вызывают.

В первом случае применяются 4 основных метода:

  1. Культуральный способ – обнаружение хламидий в клеточной культуре (используется посев биологического материала на специальные среды). Этот метод считается «золотым стандартом», однако выполнить его не всегда просто. Он требует больших материальных затрат и длительного времени ожидания результатов.
  2. Выявление ДНК хламидий – ПЦР (метод полимеразной цепной реакции);
  3. Серологические методы, которые предполагают выявление антител к хламидиям. Это иммуноглобулины, которые могут быть разных классов M, G, A.
  4. Выявление антигенов хламидиоза с помощью меченых антител.

Во втором случае, т.е. для диагностики тех изменений, которые вызывают хламидии, используются следующие методы:

  1. Кольпоскопическое обследование шейки матки у женщин. Оно предполагает осмотр цервикального канала и шеечной поверхности под увеличением кольпоскопа.
  2. Уретроскопия – эндоскопическая визуализация слизистой мочеиспускательного канала, который достаточно часто поражается на фоне хламидиоза.
  3. Рентгенологическое обследование легких, вовлекаемых в патологический процесс, если заражение произошло пневмофильными возбудителями хламидиоза. В этом случае также может применяться и бронхоскопия – эндоскопическое обследование бронхиального дерева.

Лабораторная диагностика хламидиоза

Лабораторная диагностика хламидиоза у мужчин и женщин проявляет различную чувствительность и специфичность. Поэтому надо не растеряться и понять, какой метод обследования выбрать для себя. Как же сделать правильный выбор? Разбираемся в вопросе поэтапно.

Для начала следует определиться с такими понятиями, как специфичность и чувствительность метода.

  • Специфичность — это доля тех людей, у которых результаты диагностики отрицательны, по отношению ко всем небольным пациентам. Этот критерий отражает, насколько метод оказывается ценным в отношении здоровых людей. Чем выше специфичность, тем больше вероятность того, что здоровый человек не будет принят за больного.
  • Чувствительность — это доля тех людей, у которых результаты диагностики положительны по отношению ко всем больным пациентам. Этот показатель отражает процент выявления случаев заболевания. Чем он выше, тем больше шансов, что будет выявлен действительно больной человек.

Культуральная диагностика хламидиоза

Лучшими являются культуральные методы, потому что их чувствительность составляет 70-80% в сравнении с ПЦР. Это означает, что такая диагностика выявляет 70-80% больных хламидиозом пациентов, а только в 20-30% случаев они ускользают из поля зрения клинициста, т.к. тест оказывается отрицательным. Несмотря на высокую эффективность такой диагностики, она является очень трудоемкой, т.к. необходимо произвести забор материала в стерильных условиях, поместить его на специальные среды и дождаться роста колоний, при этом обеспечив достаточные для этого процесса условия.

Чаще всего такая диагностика хламидиоза у мужчин и женщин используется в 3 случаях:

  • Научно-экспериментальные цели для получения данных, необходимых в клинической практике (инновационная диагностика хламидиоза и лечение, а также выявление особенностей клинической симптоматики в зависимости от вида возбудителя).
  • Определение информативности других методов диагностики.
  • Оценка чувствительности хламидий к антибиотикам, особенно при упорном и длительном течении хламидиоза.

Выявление антител к хламидиям

Такая диагностика хламидиоза включает в себя следующие методы:

  • иммуноферментный анализ;
  • реакция иммуноблотинга;
  • реакция геммаглютинации.

Однако наибольшее распространение для обнаружения хламидиоза у мужчин и женщин получил первый метод – иммуноферментное исследование. Он давно применяется в клинической практике и имеет массу положительных отзывов от врачей. Этот метод предполагает выявление в крови или соскобе противохламидийных антител – иммуноглобулинов различных классов.

Важно учитывать, что хламидии не являются мощным антигенным стимулятором иммунной системы, поэтому образование антител происходит не очень активно и в малых количествах. В связи с этим, чтобы диагностика хламидиоза у мужчин и женщин была особенно информативна, рекомендуется производить забор крови в определенные временные промежутки. Оптимальнее это делать в период яркой клинической симптоматики, особенно связанно с системными проявлениями (поражение глаз, суставов, сердца и т.д.).

У пациентов возникает вопрос, как провести диагностику хламидиоза, если поблизости нет современной лаборатории. Методы иммуноферментного анализа как нельзя лучше решают эту задачу, т.к. материал можно определенное время хранить в специальных условиях. Для этого сыворотку необходимо пропустить через центрифугу, чтобы плазма отделилась от форменных элементов. В таком виде при температуре 4-8 °С можно сохранять в течение 5 дней, а в температурном режиме — 20°С она сохраняется до 1 месяца.

Чтобы результаты обследования были наиболее достоверными, врачи советуют проводить исследование в динамике через некоторое время, например, после лечения. Это поможет выявить, как изменяется титр антител – снижается, остается на прежнем уровне или повышается. После терапии оптимальным вариантом является его снижение. Если же имеется возрастание титра в 4 раза и более, то это обычно указывает на обострение патологического процесса.

Однако метод иммуноферментного анализа может выполняться не только с кровью. В качестве материала некоторые фирмы производители тест-систем предполагают использование отделяемого или соскобов со слизистой оболочки мочеполового тракта (наружные отделы) или прямой кишки, или глаз.

Этим способом выявить наличие противохламидийных антител удается в 60-70% случаев.

ПЦР-диагностика

Методы ПЦР для выявления хламидиоза у мужчин и женщин в настоящее время очень широко используются. Этот способ предполагает создание многочисленных копий нуклеиновых кислот хламидий (ДНК или РНК) и выявление их с помощью стандартных методов (чаще всего используется все тот же иммуноферментный анализ).

Главное преимущество ПЦР в выявлении хламидиоза — это высокая чувствительность и специфичность такой диагностики, которая практически сопоставима с культуральным методом, но при этом не требует таких колоссальных затрат. Однако у метода есть и свои недостатки, которые в большей степени касаются материальной стороны. Так, ПЦР требует:

  • дорогостоящего оборудования;
  • специально укомплектованной лаборатории;
  • должной подготовки медицинского персонала для выполнения анализов.

Еще один минус ПЦР — это обсеменение материала сопутствующей микрофлорой (кроме хламидий), что негативно сказывается на результатах обследования. Поэтому ПЦР не лишена ложноположительных результатов.

Выявление хламидийных антигенов

Этот метод основан на иммунофлюоресцентной микроскопии взятых мазков. Под воздействием люминесцентного свечения хламидии выглядят как желтые и желто-зеленые тельца на фоне цитоплазмы, которая в этом свечении визуализируется как желто-коричневая. Этот метод позволяет также выявлять даже растворимые хламидийные антигены, поэтому используется как скрининговый, т.е. предназначенный для массового обследования.

Большинство зарубежных фирм выпускает специальные экспресс-тесты для диагностики хламидиоза. Они содержат моноклональные антитела, которые связываются с антигенами хламидий и обеспечивают специфическое свечение.

Однако для того, чтобы диагностика хламидиоза была проведена данным методом, требуется наличие люминесцентного микроскопа и обученного лаборанта. Это не единственные недостатки, которые присущи этому методу. Он имеет хороший уровень чувствительности и специфичности, однако этих показателей недостаточно для стабильного выявления малых количеств элементарных телец, располагающихся вне клеток организма человека. К тому же методы иммунофлюоресцентной микроскопии не могут использоваться для проверки отрицательных результатов обследования, полученных иным способом. Всё это заметно снижает диагностическую ценность иммунофлюоресценции.

Забор материала

Лабораторная диагностика хламидиоза у мужчин и женщин предполагает в обязательном порядке правильный забор материала. В противном случае велика доля ложноотрицательных результатов. Но что значит правильный забор?

Опорными пунктами «правильности» являются:

  • До взятия биологического материала у мужчин и женщин им запрещено мочиться за 1-1,5 часа до процедуры. Это позволит не смыть хламидии со слизистой, а значит, они попадут в получаемый образец материала. Однако если имеются обильные гнойные выделения, то материал берут сразу же после мочеиспускания.
  • Для взятия соскоба использует специальные инструменты. Это могут быть ложки Фолькмана, стерильные тампоны, платиновая петля (чаще всего применяется у мужчин) или щеточка.
  • Перед забором материала врач обязательно удаляет слизистую пробку, в которой патогенных возбудителей обычно очень мало, чтобы их идентифицировать (определить).
  • Важно производить забор материала при подозрении на урогенитальную форму хламидиоза из наиболее уязвимых зон. Это одна у мужчин – уретра – и 2 зоны у женщин – слизистая шейки матки и мочеиспускательный канал.
  • Помимо знания мест забора, надо еще и соблюсти требуемую глубину введения инструментов, чтобы получить материал, где больше всего будет хламидий в случае имеющегося инфицирования. У женщин — это 1,5 см для цервикального канала и 1-1,5 см для уретры. У мужчин – 2,5-4 см вглубь уретрального канала, при этом требуется предварительная обработка с помощью физиологического раствора головки пениса в месте введения инструментов.

Инструментальная диагностика хламидиоза у женщин и мужчин

Как же определить, насколько проявилось негативное влияние хламидий на организм человека? В этом помогут инструментальные методы диагностики. С их помощью можно определить, какой орган поражен, есть ли осложнения и т.д.

У мужчин для оценки степени прогрессирования урогенитального хламидиоза чаще всего врачами применяется:

  • УЗ-сканирование органов малого таза – простаты, семенных пузырьков, яичка и т.д.
  • Уретроскопия – осмотр слизистой мочеиспускательного канала с применением эндоскопической техники.
  • Экскреторная урография – для исключения поражения почек (хламидийного пиелонефрита).

Женщинам показаны следующие методы обследования, определяющие урогенитальную форму хламидийной инфекции:

  • Кольпоскопия.
  • УЗ-сканирование матки и ее придатков для выявления хронического воспалительного процесса.
  • Рентгенография почек.

Для исключения хламидийной пневмонии, бронхита или фарингита проводится рентгенологическое обследование. Осмотр глазного яблока с помощью микроскопа позволяет выявить конъюнктивит и предположить его природу.

При подозрении на синдром Рейтера проводится рентгенологическое обследование суставов. Оно оценивает состояние хряща и околосуставных тканей, которые часто вовлекаются в патологический процесс при хламидиозе.

Заключение

Современная диагностика хламидиоза у мужчин и женщин предполагает в первую очередь проведение лабораторных исследований, среди которых особенно информативными являются ПЦР и серологические методы. Параллельно проводятся и инструментальные методы, направленные на выявление тех патологических изменений в организме, которые вызвали хламидии.

Источник: minoleksin.ru


You May Also Like

About the Author: admind

Добавить комментарий

Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *

Этот сайт использует Akismet для борьбы со спамом. Узнайте как обрабатываются ваши данные комментариев.