Порядок исследования проб крови на вич


  1. не инфицирован (соблюдены диагностические сроки проведения анализа);
  2. серонегативный вариант течения инфекции (антитела вырабатываются поздно);
  3. терминальная стадия СПИД (нарушено образование антител к ВИЧ);
  4. исследование не информативно (диагностические сроки не соблюдены).

Обратите внимание! Информация о положительных результатах определения антител к ВИЧ. Уважаемые пациенты! В соответствии с нормативными актами, действующими на территории Российской Федерации, доводим до вашего сведения:

  • информация о положительных результатах определения антител к ВИЧ (тест №68) передаётся лабораторией ООО «ИНВИТРО» (Москва) — в Центр СПИДа;
  • Информация о положительных результатах определения антител к ВИЧ (тест №68) передаётся лабораторией ООО «ИНВИТРО-СПб» (Санкт-Петербург) — в Санкт-Петербургский ГУЗ «Центр по профилактике и борьбе со СПИД и инфекционными заболеваниями».

Основания

  • Постановление Главного государственного санитарного врача РФ от 11.01.2011 N 1 «Об утверждении СП 3.1.5.2826-10 «Профилактика ВИЧ-инфекции» (п. 7.4.1.).

  • Для Москвы также дополнительно: Приказ Департамента Здравоохранения правительства Москвы и Центра Государственного Санитарно-Эпидемиологического надзора в г. Москве №20/9 от 13.01.2004 г. «Инструкция о порядке специального учета инфекционных и паразитарных заболеваний в Москве» (абз. 6 п. 2.2.).
  • Для Санкт-Петербурга также дополнительно: п. 11.6 Распоряжения Комитета по здравоохранению Правительства Санкт-Петербурга № 661-р от 12.12.2011 г.; п. 2.2. Приложения № 1 к Распоряжению Комитета по здравоохранению Управления Роспотребнадзора по г. Санкт-Петербургу от 24.09.2007 г. N 479-р/1 «О порядке специального учета инфекционных и паразитарных болезней и других состояний в Санкт-Петербурге».

Оформление заявок для проведения исследований в ООО «ИНВИТРО» осуществляется по паспорту или документу, его заменяющему (миграционная карта, временная регистрация по месту жительства, удостоверение военнослужащего, справка из паспортного стола при утере паспорта, регистрационная карта учёта из гостиницы). Предъявленный документ в обязательном порядке должен содержать информацию о временной или постоянной регистрации на территории РФ и фотографию. При отсутствии паспорта (документа его заменяющего) пациент вправе оформить анонимную заявку для сдачи биоматериала. При анонимном обследовании, заявке и полученному от клиента образцу биоматериала присваивается номер, известный только пациенту, и медперсоналу, оформлявшему заказ. ! Результаты исследований, выполненных анонимно, не могут быть представлены для госпитализации, профессиональных осмотров и не подлежат регистрации в ОРУИБ.

Источник: www.invitro.ru

Важность клинической диагностики ВИЧ


В понимании многих людей ВИЧ-инфицированный человек выглядит болезненно, изнеможенно. Он кашляет, чихает, чешется, стонет, у него все болит… На самом деле это не так! Проблема в том, что после инфицирования ВИЧ и в последующий инкубационный период симптомы полностью отсутствуют. Затем наступает острая фаза, на протяжении которой присутствуют симптомы, напоминающие ОРВИ или грипп. Но и они вскоре проходят, и наступает, так называемый, латентный период – продолжительный промежуток времени, когда ВИЧ-инфекция себя ничем не выдает. С момента инфицирования и до стадии пред-СПИДа может пройти порядка 10 лет, в течение которых, ни сам пациент, ни его окружение, даже и не подозревают о болезни. А когда она уже на полную мощность заявляет о себе, контролировать ее очень трудно. Сложно противостоять осложнениям ВИЧ, поддерживать практически разрушенную иммунную систему человека.

Очень важно понимать, что, хотя и есть группы риска – гомосексуалисты, наркозависимые и девушки легкого поведения – в основной массе, пациенты с ВИЧ-инфекцией – это обычные люди. Они учатся, ходят на работу, посещают общественные места, знакомятся в интернете – в общем, живут как все. К сожалению, но от ВИЧ никто не застрахован. Незащищенный половой контакт в порыве страсти, заветное тату без соблюдения стерильности, маникюр за полцены у начинающего мастера, уличная драка – все эти и множество других житейских ситуаций могут обернуться инфицированием ВИЧ.


Не ошибается лишь тот, кто не живет! Мы не можем знать все наперед, не можем исправить уже совершенных ошибок, но мы можем предпринять простые шаги для исправления их последствий – обратиться в ближайший кожно-венерологический диспансер, в местную клинику или специализированный СПИД-центр для сдачи анализов и ранней диагностики ВИЧ.

Благоприятные сроки для диагностики ВИЧ

Факт возможного инфицирования и плохое самочувствие без видимых причин – два веских основания для обращения к специалистам. Но отрицательный результат тестирования на антитела не всегда означает, что человек не инфицирован, так как существует период “серонегативного окна” (время между заражением и появлением антител), который составляет около трех месяцев. Поэтому лучше повторить их спустя 3 месяца с момента возможного инфицирования. Если же ответ опять будет отрицательным, но ваша тревога не проходит, и вы уверены в заражении ВИЧ, тогда лабораторную диагностику необходимо повторить спустя 6 месяцев после факта заражения.

Что касается плохого самочувствия, то поводом провериться на ВИЧ может быть сочетание следующих симптомов:


  • увеличение лимфатических узлов на шее, в паху, в области подмышек;
  • лихорадка;
  • мышечные или головные боли;
  • молочница и грибковые поражения, в том числе кандидоз полости рта;
  • воспаление слизистой носа, рта или глотки;
  • ночная потливость;
  • ломота в суставах;
  • длительная диарея;
  • тошнота, рвота;
  • резкое снижение массы тела;
  • высыпания на коже.

Важно понимать, что с момента, когда проявляются первые признаки ВИЧ-инфекции и до момента, когда заболевание переходит в латентную стадию, проходит очень мало времени – около 3-6 недель с факта инфицирования. Нельзя упускать из вида этот промежуток времени! Поскольку последующие 8-10 лет вы будет жить, нормально себя чувствовать и даже не подозревать о том, что больны ВИЧ-инфекцией. Драгоценное время будет упущено.

Тесты на ВИЧ: сроки и достоверность

Современные методы диагностики ВИЧ

В настоящее время в диагностике ВИЧ используется двухуровневый подход – косвенные и прямые тесты. Косвенные тесты позволяют обнаружить в крови пациента специфические антитела к ВИЧ, а прямые тесты помогают выявить собственно сам ВИЧ и определить степень вирусной нагрузки на организм. В России стандартная диагностика ВИЧ включает следующие методы лабораторных исследований:

  • ИФА (иммуноферментный анализ).
  • Иммуноблот (иммунный блоттинг).


Также могут быть применены следующие методики:

  • Экспресс-тест ИХА (иммунохроматография).
  • ПЦР (полимеразная цепная реакция).

Диагностические принципы лабораторных исследований и степень их достоверности приведены в нижеследующей таблице.

Метод исследования

Диагностический принцип

Достоверность

Время после заражения

Экспресс-тест ИХА

Выявление антител к ВИЧ

93-99%

с 3 недели

Скрининговый тест ИФА

Выявление антител к ВИЧ и антигенов вируса

Иммуноблот

Антитела к нескольким белкам ВИЧ

99,9%

с 5 недели

ПЦР

Исследуется генетический материал вируса

80%

с 5 дня

98%

со 2 недели

При проведении исследований важно использовать сверхточное оборудование и верно интерпретировать результаты анализов. В противном случае точность диагностики снижается. При этом специалисты считают, что рациональнее всего проводить исследования в следующей последовательности.


  1. Сначала экспресс-диагностика, основанная на методе ИХА.
  2. В случае положительного результата – еще один анализ крови по методу ИФА.
  3. Положительный второй результат – проводится дообследование методом ИФА или иммуноблоттингом.
  4. В исключительных случаях для окончательной постановки диагноза можно применить более сложный и дорогостоящий метод ПЦР.

Экспресс-тесты методом ИХА или скрининг ИФА,  предполагающий серологическое иммуноферментное исследование крови, выполняются в течение 15-30 минут. Высокая скорость диагностики актуальна в неотложных случаях, при планировании срочных операций. Но для постановки окончательного диагноза необходимо использовать основной метод диагностики – иммунный блоттинг. Если результаты ИФА и иммунного блоттинга противоречат друг другу, то возможно проведение референс диагностики – анализ сразу двумя методами. К проведению ПЦР прибегают в исключительных случаях, т.к. это наиболее дорогостоящий метод исследования. Далее разберем каждый из методов диагностики более подробно.

Экспресс-тест ИХА

Иммунохроматографические тесты неплохо зарекомендовали себя в экспресс-диагностике ВИЧ. Визуально они выглядят как полоски, на поверхность которых наносят исследуемый биологический материал (кровь, слюна). Для получения результата потребуется всего 10-15 минут, по истечении которых на тесте проявится, или цветная и контрольная полоска – положительный результат, подтверждающий наличие антител к ВИЧ, или только контрольная полоска – отрицательный результат.


С недавнего времени американская компания OraSure Technologies наладила массовое производство экспресс-тестов для домашнего применения. Они отпускаются без рецепта, и при желании их может использовать каждый желающий. Однако необходимо учесть, что по точности диагностики ИХА уступает методу ИФА, а для постановки окончательного диагноза необходимо проведение иммуноблота.

Скрининговый тест ИФА

Принцип метода основан на способности искусственно созданных белков ВИЧ, улавливать вырабатывающиеся в организме человека специфические антитела. В результате взаимодействия, тест-система ИФА изменяет окрас индикатора. Полученные изменения цвета обрабатываются с помощью аппаратуры, которая выдает результат анализа. При этом необходимо учесть, что скрининговый тест предназначен для выявления не ВИЧ как такового, а антител к нему. А поскольку для их появления в организме, необходимо время, то целесообразнее всего проводить скрининг спустя 3-6 недель после факта возможного инфицирования. Для этого достаточно всего 5 мл крови из вены пациента, забор которой проводят натощак, т.е. спустя 7-8 часов после последнего приема пищи.

Помимо положительного или отрицательного результата, тест ИФА может дать ложноположительный или ложноотрицательный результат.


  • Ложноположительный – речь может идти об сходных по своей структуре антителах, которые вырабатываются в организме при аутоиммунных заболеваниях, множественных миеломах, алкогольном гепатите и других патологиях.
  • Ложноотрицательный – скорее всего, тестирование было проведено преждевременно или иммунная система слишком слаба и не вырабатывает антитела к ВИЧ.

При сомнительном результате тест проводится повторно.

Иммунный блоттинг

Иммуноблот – это основной метод диагностики ВИЧ, сочетающий иммуноферментный анализ (ИФА) с предварительным электрофоретическим переносом на нитроцеллюлозную полоску антигенов вируса. Для их выявления анализ проводят в три этапа:

  • подготовка нитроцеллюлозной полоски;
  • исследование пробы биологического материала пациента;
  • трактовка результата.

Таким образом, в ходе проводимого исследования, основные белки ВИЧ распределяются по поверхности в виде отдельных полос, которые проявляются при проведении иммуноферментной реакции и подтверждают наличие или отсутствие антител к антигенам ВИЧ. Полученные в ходе исследования иммунным блоттингом результаты считаются окончательными.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР)

Главное отличие ПЦР от других методов диагностики – тест-система определяет ДНК вируса. С ее помощью можно выявить даже единичные вирусные частицы. Применение метода возможно уже на 5ый день после факта возможного инфицирования с точностью до 80%, что позволяет провести раннюю диагностику ВИЧ. Однако ПРЦ проводят только в исключительных случаях.


  • для постановки диагноза новорожденным, появившимся на свет от ВИЧ-инфицированных матерей;
  • при сомнительных результатах иммуноблота;
  • для оперативного исследования донорской крови;
  • для оценки уровня ВИЧ в крови инфицированного пациента.

Несмотря на высокую чувствительность метода ПЦР, он обладает меньшей диагностической чувствительностью к ВИЧ, что объясняется вариабельностью генома вируса. Поэтому для постановки окончательного диагноза данный метод не используется.

Новые и альтернативные методы диагностики ВИЧ

Недавно, сотрудниками Питтсбургского университета был разработан новый высокочувствительный тест для обнаружения скрытых вирусов – тест TZA. Для его проведения требуется меньше времени и крови пациента. Принцип действия TZA сводится к поиску гена, который активируется только при репликации вируса. Несмотря на то, что разработчики уверены в эффективности теста, большинство специалистов склоняется к тому, что TZA не сможет заменить существующие методы диагностики полностью, поскольку он характеризуется иным механизмом действия и не подходит абсолютно каждому ВИЧ-инфицированному пациенту.

Где и как можно пройти диагностику ВИЧ


Сегодня тест на ВИЧ-инфекцию не является проблемой. При желании пациента, кровь на анализ можно сдать анонимно и абсолютно бесплатно. Сделать это можно в медицинских организациях по месту жительства, в Свердловском областном центре профилактике и борьбы со СПИД (г. Екатеринбург, ул. Ясная, 46. Регистратура: (343) 383-30-18 Телефон доверия по проблеме ВИЧ/СПИД: (343) 310-00-31 (будни, с 9 до 20 часов).

Диагностика ВИЧ – дело сугубо добровольное. Однако есть четыре ситуации, для которых прохождение теста является обязательным:

  1. Донорство.
  2. Трудоустройство на работу, предполагающую непосредственный контакт с биоматериалом, который может содержать ВИЧ.
  3. Иностранные граждане.

Лица при призыве на военную службу, поступающие в военные учебные заведения.

Но и в этих случаях тестирование не может проводиться насильно, поскольку для любого медицинского вмешательства необходимо добровольное и осознанное согласие пациента. Именно осознанное, поскольку каждый из нас должен понимать важность своевременной диагностики ВИЧ.

Источник: profilaktica.ru

Оснащение: шприц ёмкостью 10 – 20мл с иглой для в/в инъекций, спиртовые шарики (спирт – 70%), маска, перчатки, жгут, клеёнчатая подушечка, салфетка, маска, кожный антисептик, стерильная пробирка.

  1. Объяснить пациенту цель исследования и заручиться его согласием.
  2. Приготовить направление.
  3. Надеть маску, тщательно вымыть руки проточной водой с мылом, обработать кожным антисептиком, надеть перчатки, обработать их спиртовым шариком или антисептиком для перчаток.
  4. Усадить пациента на стул или уложить на кушетку.
  5. Освободить руку от одежды до середины плеча.
  6. Попросить пациента максимально разогнуть руку в локтевом суставе, под локоть положить клеёнчатую подушечку.
  7. Проверить упаковку шприца на целостность, срок годности.
  8. Наложить жгут на среднюю треть плеча.
  9. Правила наложения жгута:
    • концы жгута должны смотреть вверх;
    • жгут накладывается на плечо через салфетку или одежду;
В иммунологическую лабораторию КРОВЬ НА ВИЧ НАПРАВЛЕНИЕ Ф.И.О.__________________________ Год рождения____________________ Адрес___________________________ Место работы____________________ Код контингента__________________ Дата______________ Отделение_______________________ Ф.И.О. врача_____________________
    • пульс на лучевой артерии должен прощупываться (рука не должна бледнеть или синеть – пережимаются только вены, артерии свободны).
  1. Попросить пациента несколько раз сжать и разжать кулак (поработать кулачком).
  2. Прощупать вену и встать по ходу вены.
  3. Дважды обработать кожу спиртовыми шариками движениями снизу вверх вначале 10х10см и вторым шариком 5х5см по ходу вены.
  4. Вскрыть упаковку со шприцем, насадить иглу на шприц и проверить проходимость иглы и наличие воздуха в шприце.
  5. Попросить пациента сжать кулак и зафиксировать вену первым пальцем левой руки, оттягивая кожу вниз.
  6. Держа иглу срезом вверх (и делениями на цилиндре вверх)параллельно вене, под острым углом к коже проколоть кожу.
  7. Продолжая фиксировать вену, слегка изменить направление иглы к вене и осторожно проколоть вену. Возникает ощущение попадания в пустоту (провала).
  8. Зафиксировать шприц, слегка придавив его к руке пациента вторым пальцем правой руки.
  9. Оттянуть поршень на себя и набрать нужное количество крови.
  10. Снять жгут. Пациент при этом разжимает кулак.
  11. На место прокола приложить спиртовый шарик и извлечь иглу, придерживая кожу. Запомните! Сначала снять жгут, дать крови отток, а затем извлечь иглу!
  12. Попросить пациента перехватить ватный шарик свободной рукой и согнуть руку в локте на 5 минут, резко не вставать, посидеть 5 – 10 минут в процедурном кабинете.
  13. Снять иглу со шприца с помощью специального устройства на контейнере, поместить в контейнер для использованных игл для дезинфекции,
  14. Осторожно по стеночки вылить кровь из шприца в стерильную пробирку, на пробирке написать фамилию и номер пациента, поместить пробирку в штатив.
  15. Шприц освободить от остатков крови в ёмкость №1 с дезраствором, набрать полный шприц дезраствора из ёмкости №1, и поместить в ёмкость № 2 с дезсредством. После дезинфекции шприцы и иглы помещаются в жёлтый мешок «Б» для утилизации.
  16. Помочь пациенту лечь удобно, поправить постель.
  17. Снять перчатки вымыть руки.
  18. Отметить в медицинской карте и в процедурном листе о выполнении процедуры.
  19. Отправить пробирку вместе с направлением в лабораторию.

Примечание: на некоторые виды исследования (исследования свёртывающей системы крови) кровь берут без шприца. После пункции вены шприц отсоединяют от иглы, к канюле подставляют стерильную пробирку и ждут, когда наберётся нужное количество крови. В связи с угрозой инфицирования вирусными гепатитами и ВИЧ-инфекцией, данную методику необходимо применять только по показаниям.

Источник: studopedia.ru

Современный порядок обследования граждан на ВИЧ — инфекцию

      Гражданин России может обследоваться на ВИЧ – инфекцию в любом медицинском  учреждении, в государственных и муниципальных учреждениях бесплатно, добровольно с предварительным и последующим консультированием по ВИЧ-инфекции  одним и тем же специалистом, анонимно. Обследование детей до 14 лет может проводиться по просьбе или с согласия родителей.

         Выдача официального документа о наличии или об отсутствии ВИЧ-инфекции  осуществляется только учреждениями государственной или муниципальной системы здравоохранения

Проведение до — тестового и после -тестового консультирования

  1. Освидетельствование на ВИЧ-инфекцию проводится с обязательным до- и после — тестовым консультированием по вопросам профилактики ВИЧ-инфекции.
  2.  При проведении до — тестового консультирования необходимо заполнить форму информированного согласия на проведение освидетельствования в двух экземплярах, одна остается в медицинском учреждении, другая выдается на руки обследуемому.

Обязательное обследование на ВИЧ проводится следующим контингентам граждан

1.Доноры крови, биологических жидкостей, органов и тканей, в том числе абортной и плацентарной крови для производства биологических препаратов

2.Работники учреждений здравоохранения, лабораторий, научно-исследовательских учреждений, предприятий, в силу служебной необходимости, имеющие непосредственный контакт с ВИЧ-инфицированными (центры СПИД, специализированые отделения) – 1 раз в год,

имеющие контакт с биологическими материалами, содержащими ВИЧ (лаборатории, НИИ) – 2 раза в год

3.Иностранцы, въезжающие в РФ на срок более 3 мес. при отсутствии сертификата об отсутствии ВИЧ-инфекции     

4.Медицинские работники стационаров (отделений) хирургического профиля при поступлении на работу и в дальнейшем 1 раз в год

5.Лица, проходящим военную службу и поступающим в военные вузы и на военную службу по призыву и контракту

  1. Лица, поступающие в вузы министерств и ведомств, устанавливающих ограничения для приёма на службу лиц с ВИЧ-инфекцией
  2. Военнослужащие при прохождении военно-врачебной экспертизы
  3. Лица, находящимся в местах лишения свободы, привлекаемые в медицинских учреждениях уголовно-исполнительной системы к работе с больными с ВИЧ и инфицированным материалом;  по клиническим показаниям, устанавливаемых приказами Министерства здравоохранения РФ

Мероприятия, проводимые в связи с выявлением ВИЧ – инфицированности, помимо противоэпидемических и лечебных:

  1. Лица, ВИЧ — инфицированные, если они могут явиться источниками  в связи с особенностями производства или выполняемой ими работой, переводятся на другую работу, не связанную  с риском инфицирования
  2. Работники, имеющие контакт с ВИЧ-инфицированными, либо материалами, содержащими ВИЧ,  подлежат переводу на другую работу, исключающую условия распространения ВИЧ-инфекции
  3. ВИЧ — инфицированные  не могут быть донорами

4.Иностранцы подлежат депортации

5.Военнослужащие признаются ограниченно годными или не годными  и могут быть уволены с военной службы.

    Сведения о результатах исследования крови на антитела к ВИЧ регистрируются по форме №4  и имеют соответствующее кодирование.

 

             Клинические показания к обследованию на ВИЧ

       Симптомы и состояния: лихорадка более 1 месяца; увеличение лимфоузлов  двух и более групп свыше 1 месяца; диарея — более 1 месяца; необъяснимая потеря массы более 10%; затяжные и рецидивирующие пневмонии или пневмонии, не поддающиеся обычной терапии; затяжные и рецидивирующие гнойно-бактериальные, паразитарные заболевания, сепсис; подострый энцефалит и слабоумие у ранее здоровых лиц; ворсистая лейкоплакия языка; рецидивирующая пиодермия; хронические воспалительные заболевания женской репродуктивной системы неясной этиологии.

      Острые и хронические заболевания: вирусные гепатиты B, C; легочный и внелегочный туберкулез; саркома Капоши; лимфома мозга; Т-клеточный лейкоз; цитомегаловирусная инфекция; генерализованные или хронические формы                       герпесвирусной инфекции; рецидивирующий опоясывающий лишай у лиц моложе 60 лет; мононуклеоз (через 3 месяца после начала заболевания); пневмоцистоз (пневмонии); токсоплазмоз центральной нервной системы; криптококкоз внелегочный; криптоспородиоз; изоспороз более 1 мес.; гистоплазмоз внелёгочный; стронгилоидоз;  кандидоз пищевода, бронхов, трахеи или легких; глубокие микозы; атипичные микробактериозы; прогрессирующая многоочаговая лейкоэнцефалопатия; анемии различного генеза.

Эпидемиологические показания к обследованию на ВИЧ — инфекцию

  • Употребление инъекционных наркотиков, гомосексуальные контакты с мужчинами при постановке на учёт, далее 1 раз в год
  • Наличие вирусного гепатита «B» или «С» при установлении диагноза и через 6 месяцев, далее – по стандарту обследования
  • Наличие заболеваний, передающихся половым путем при установлении диагноза и через 6 месяцев
  • Эпидемиологически значимый контакт с больным с ВИЧ, ИППП или с представителем группы риска (ПИН, МСМ, КСР)
  • Рождение от ВИЧ-инфицированной матери, либо грудное вскармливание ВИЧ-инфицированной женщиной

     Новорожденному, рожденному  ВИЧ – инфицированной женщиной,  проводится исследование крови методами ИФА, ИБ и ПЦР. Затем на 1, 2, 4, 5, 6 месяцах – методом ПЦР, а 9,12 и 18 месяцах – методом ИФА и ИБ.                                                                                      

    Всем беременным женщинам должно быть предложено тестирование на ВИЧ  при первичном обращении по поводу беременности; в третьем триместре (после 30 недель). Не обследованным на ВИЧ — во время беременности  или, если обследование в третьем триместре не проведено, то тестирование проводится экспресс методом при поступлении на роды.                                                          

     При первичном обращении на ранних сроках беременности и взятии  беременной на учет проводится осмотр лечащим врачом,                                                         включающий сбор анамнеза и физикальное обследование, исследование крови на антитела к ВИЧ (ИФА, ИБ). При положительных результатах обследования  — подтверждение диагноза ВИЧ-инфекции; установление стадии болезни; выявление имеющихся у пациента вторичных и сопутствующих заболеваний;  определение тактики дальнейшего ведения пациента.

              

 

Лабораторные методы диагностики ВИЧ – инфекции и  интерпретация их результатов

      Современные методы лабораторной диагностики ВИЧ –инфекции регламентируются следующими нормативными документами:

1.Санитарные правила СП 3.1.5.2826-10
«Профилактика ВИЧ-инфекции»

2.Приказ Минздравмедпрома РФ от 16.08.2004 №170
«О мерах по совершенствованию профилактики и лечения ВИЧ-инфекции в Российской Федерации»

3.Письмо ГУЗ КЦ ПБ СПИД от 28.09.2009 №02-14/715-Г «Об алгоритме лабораторного обследования на ВИЧ-инфекцию»

   Методы лабораторной диагностики ВИЧ — инфекции

      Серологические методы – обнаружение антител состоят из двух этапов: 1-й этап – ИФА – скрининговое тестирование, 2-й этап – ИБ – подтверждающее тестирование.

    Вирусологические методы – обнаружение антигенов: определение  P 24-антигена (совместно с ИФА), получение культуры вируса (28 дней).

   Молекулярные методы – обнаружение генетического материала  — качественные (РНК/ДНК) и количественные (РНК/ДНК).

              Этапы серологической диагностики                                                      

        1-й этап  — иммуноферментный анализ – выявление суммарного спектра антител против антигенов ВИЧ с помощью твёрдофазного иммуноферментного анализа проводятся в скрининговой лаборатории – ( положительный результат подтверждается в 2-х постановках с использованием одной и той же тест-системы) и в референс-лаборатории – положительный результат подтверждается в 2-х исследованиях при помощи разных по составу антигенов, антител или формату тестов диагностических тест-систем.         Иммуноферментный анализ (ИФА) — проводится  на стандартных тест системах, предусматривает исследование сразу нескольких пациентов на одной панели. Метод имеет определенный процент ложноположительных результатов и является отборочным тестом для дальнейшего исследования — иммунного блотинга (ИБ).

      Результаты ИФА интерпретируются как положительные, неопределенные и отрицательные. При  получении положительного или сомнительного результата исследование этим методом проводится еще дважды.                                                                                      

     Ложноположительные результаты могут наблюдаться при: аутоиммунных заболеваниях, инфекциях, вызванных вирусом Эпштейна-Барр,  онкологических заболеваниях, беременности, вакцинации от гриппа, вакцинации против ВИЧ, технической или канцелярской ошибке.

     2-й этап — иммуноблотинг — выявление антител к отдельным белкам вируса проводится  однократно с помощью специального устройства, являясь экспертным методом, подтверждающим показатели ИФА. Результат взаимодействия антител и соответствующих антигенов визуализируется в виде полос на определенных участках стрипа. ВОЗ считает положительными сыворотки, в которых обнаруживаются антитела к каким либо двум белкам оболочки ВИЧ — вируса. При сомнительных результатах исследования повторяют через 3 месяца.

     Частота ложноположительных результатов только в реакции ИФА – 0,02-0,5%, по стандартной методике ИФА + ИБ – 0,0004-0,0007%.

      Поэтому медицинскому работнику нужно знать, что объявлять результат исследования пациенту имеет право только врач после проведенного полностью комплекса исследований.

        При интерпретации полученных данных лабораторной диагностики ВИЧ – инфекции нужно помнить о возможности получения ложноотрицательных результатов в так называемом периоде «окна». Серореверсия – исчезновение антител может наблюдаться в терминальной стадии заболевания, при длительном применении ВААРТ(высокоактивная антиретровирусная терапия) со стойкой вирусной супрессией( подавление активности вируса  более 5 лет), применении ВААРТ в острой стадии ВИЧ-инфекции.

     Ложноотрицательные результаты могут быть связаны с атипичной иммунной реакцией у пациента, когда антитела длительно не вырабатываются, агаммаглобулинемией( первичным врожденным гуморальным иммунодефицитом ).

      Появление  ложноотрицательных результатов иногда наблюдается при инфицировании штаммами группы «N» и «О» вирусов ВИЧ – 1 и ВИЧ -2, не имеющими выраженной агрессии .

     Вирус ВИЧ -2 редкий распространен в западной Африке.      ВИЧ — 1 имеет 4 штамма. Штамм М – самый агрессивный, а штаммы О, N и Р встречаются реже и в основном в Африке. Внутри группы М существует 9 подтипов которые могут создавать гибридный вирус CRF. Все это создает проблемы в диагностике.

    Частота ложноотрицательных результатов в популяциях с низким уровнем распространения – 0,001%, в популяциях с высоким уровнем распространения – 0,3%

     Серологическая диагностика у детей, рожденных от ВИЧ-инфицированных матерей имеет свои особенности — в течение 6-12 месяцев от рождения сохраняются материнские антитела к ВИЧ. Поэтому таких детей несколько раз обследуют до 18 месяцев. сохранение антител через 18 и более месяцев свидетельствует о заражении ВИЧ – инфекцией.

                  

                             Молекулярная диагностика

        Метод ранней диагностики ВИЧ-инфекции (7-14 день от момента заражения): ПЦР — полимеразная цепная реакция на провирусную ДНК – ген — инженерный метод, исследование  проводится на уровне нуклеиновых кислот и определение уровня РНК ВИЧ-1 (Gen Probe Aptima). Позволяет определять наличие ВИЧ при количестве вирусных частиц 1-10 копий/мл крови. Чувствительность 96-99%, специфичность 99%. В диагностике применяется как вспомогательный.  Может использоваться при неонатальном скрининге, исследовании образцов крови и кровепродуктов на станциях переливания крови.

      Существует понятие — уровень «диагностического окна»  в зависимости от применяемых методов диагностики. ПЦР дает возможность ранней диагностики с 10 дня от момента инфицирования, на втором месте определение антигена р24 – с 15 дня, ИФА и Иммуноблот  значительно позже.

 

          Экспресс диагностика ВИЧ — инфекции

     Экспресс диагностика  имеет свои преимущества: не требует много времени, сложного и дорого оборудования, простые в использовании методы, результаты готовы в день (в час!) обследования и недостатки: стоимость выше, чем обычного ИФА (до 10 раз), сравнительно низкая специфичность (до 70%). Положительные и отрицательные результаты экспресс тестов должны быть подтверждены стандартными методами (ИФА+ИБ).  

    Область применения экспресс тестов: трансплантология — перед забором донорского материала; донорство — обследование крови, в случае экстренного переливания препаратов крови и отсутствия обследованной на антитела к ВИЧ донорской крови; вертикальная профилактика — тестирование беременных женщин с неизвестным ВИЧ-статусом в предродовом периоде (для назначения медикаментозной профилактики ВИЧ-инфекции в родах); постконтактная профилактика, — тестирование на ВИЧ в случае аварийной ситуации.

    Обязательно параллельное исследование той же порции крови    классическими методами ИФА, ИБ. Выдача заключения о наличии или отсутствии ВИЧ-инфекции только по результатам экспресс-теста не допускается.

 

Источник: xn--80agabe1dc1k.xn--p1ai

Современный порядок обследования граждан на ВИЧ — инфекцию

      Гражданин России может обследоваться на ВИЧ – инфекцию в любом медицинском  учреждении, в государственных и муниципальных учреждениях бесплатно, добровольно с предварительным и последующим консультированием по ВИЧ-инфекции  одним и тем же специалистом, анонимно. Обследование детей до 14 лет может проводиться по просьбе или с согласия родителей.

         Выдача официального документа о наличии или об отсутствии ВИЧ-инфекции  осуществляется только учреждениями государственной или муниципальной системы здравоохранения

Проведение до — тестового и после -тестового консультирования

  1. Освидетельствование на ВИЧ-инфекцию проводится с обязательным до- и после — тестовым консультированием по вопросам профилактики ВИЧ-инфекции.
  2.  При проведении до — тестового консультирования необходимо заполнить форму информированного согласия на проведение освидетельствования в двух экземплярах, одна остается в медицинском учреждении, другая выдается на руки обследуемому.

Обязательное обследование на ВИЧ проводится следующим контингентам граждан

1.Доноры крови, биологических жидкостей, органов и тканей, в том числе абортной и плацентарной крови для производства биологических препаратов

2.Работники учреждений здравоохранения, лабораторий, научно-исследовательских учреждений, предприятий, в силу служебной необходимости, имеющие непосредственный контакт с ВИЧ-инфицированными (центры СПИД, специализированые отделения) – 1 раз в год,

имеющие контакт с биологическими материалами, содержащими ВИЧ (лаборатории, НИИ) – 2 раза в год

3.Иностранцы, въезжающие в РФ на срок более 3 мес. при отсутствии сертификата об отсутствии ВИЧ-инфекции     

4.Медицинские работники стационаров (отделений) хирургического профиля при поступлении на работу и в дальнейшем 1 раз в год

5.Лица, проходящим военную службу и поступающим в военные вузы и на военную службу по призыву и контракту

  1. Лица, поступающие в вузы министерств и ведомств, устанавливающих ограничения для приёма на службу лиц с ВИЧ-инфекцией
  2. Военнослужащие при прохождении военно-врачебной экспертизы
  3. Лица, находящимся в местах лишения свободы, привлекаемые в медицинских учреждениях уголовно-исполнительной системы к работе с больными с ВИЧ и инфицированным материалом;  по клиническим показаниям, устанавливаемых приказами Министерства здравоохранения РФ

Мероприятия, проводимые в связи с выявлением ВИЧ – инфицированности, помимо противоэпидемических и лечебных:

  1. Лица, ВИЧ — инфицированные, если они могут явиться источниками  в связи с особенностями производства или выполняемой ими работой, переводятся на другую работу, не связанную  с риском инфицирования
  2. Работники, имеющие контакт с ВИЧ-инфицированными, либо материалами, содержащими ВИЧ,  подлежат переводу на другую работу, исключающую условия распространения ВИЧ-инфекции
  3. ВИЧ — инфицированные  не могут быть донорами

4.Иностранцы подлежат депортации

5.Военнослужащие признаются ограниченно годными или не годными  и могут быть уволены с военной службы.

    Сведения о результатах исследования крови на антитела к ВИЧ регистрируются по форме №4  и имеют соответствующее кодирование.

 

             Клинические показания к обследованию на ВИЧ

       Симптомы и состояния: лихорадка более 1 месяца; увеличение лимфоузлов  двух и более групп свыше 1 месяца; диарея — более 1 месяца; необъяснимая потеря массы более 10%; затяжные и рецидивирующие пневмонии или пневмонии, не поддающиеся обычной терапии; затяжные и рецидивирующие гнойно-бактериальные, паразитарные заболевания, сепсис; подострый энцефалит и слабоумие у ранее здоровых лиц; ворсистая лейкоплакия языка; рецидивирующая пиодермия; хронические воспалительные заболевания женской репродуктивной системы неясной этиологии.

      Острые и хронические заболевания: вирусные гепатиты B, C; легочный и внелегочный туберкулез; саркома Капоши; лимфома мозга; Т-клеточный лейкоз; цитомегаловирусная инфекция; генерализованные или хронические формы                       герпесвирусной инфекции; рецидивирующий опоясывающий лишай у лиц моложе 60 лет; мононуклеоз (через 3 месяца после начала заболевания); пневмоцистоз (пневмонии); токсоплазмоз центральной нервной системы; криптококкоз внелегочный; криптоспородиоз; изоспороз более 1 мес.; гистоплазмоз внелёгочный; стронгилоидоз;  кандидоз пищевода, бронхов, трахеи или легких; глубокие микозы; атипичные микробактериозы; прогрессирующая многоочаговая лейкоэнцефалопатия; анемии различного генеза.

Эпидемиологические показания к обследованию на ВИЧ — инфекцию

  • Употребление инъекционных наркотиков, гомосексуальные контакты с мужчинами при постановке на учёт, далее 1 раз в год
  • Наличие вирусного гепатита «B» или «С» при установлении диагноза и через 6 месяцев, далее – по стандарту обследования
  • Наличие заболеваний, передающихся половым путем при установлении диагноза и через 6 месяцев
  • Эпидемиологически значимый контакт с больным с ВИЧ, ИППП или с представителем группы риска (ПИН, МСМ, КСР)
  • Рождение от ВИЧ-инфицированной матери, либо грудное вскармливание ВИЧ-инфицированной женщиной

     Новорожденному, рожденному  ВИЧ – инфицированной женщиной,  проводится исследование крови методами ИФА, ИБ и ПЦР. Затем на 1, 2, 4, 5, 6 месяцах – методом ПЦР, а 9,12 и 18 месяцах – методом ИФА и ИБ.                                                                                      

    Всем беременным женщинам должно быть предложено тестирование на ВИЧ  при первичном обращении по поводу беременности; в третьем триместре (после 30 недель). Не обследованным на ВИЧ — во время беременности  или, если обследование в третьем триместре не проведено, то тестирование проводится экспресс методом при поступлении на роды.                                                          

     При первичном обращении на ранних сроках беременности и взятии  беременной на учет проводится осмотр лечащим врачом,                                                         включающий сбор анамнеза и физикальное обследование, исследование крови на антитела к ВИЧ (ИФА, ИБ). При положительных результатах обследования  — подтверждение диагноза ВИЧ-инфекции; установление стадии болезни; выявление имеющихся у пациента вторичных и сопутствующих заболеваний;  определение тактики дальнейшего ведения пациента.

              

 

Лабораторные методы диагностики ВИЧ – инфекции и  интерпретация их результатов

      Современные методы лабораторной диагностики ВИЧ –инфекции регламентируются следующими нормативными документами:

1.Санитарные правила СП 3.1.5.2826-10
«Профилактика ВИЧ-инфекции»

2.Приказ Минздравмедпрома РФ от 16.08.2004 №170
«О мерах по совершенствованию профилактики и лечения ВИЧ-инфекции в Российской Федерации»

3.Письмо ГУЗ КЦ ПБ СПИД от 28.09.2009 №02-14/715-Г «Об алгоритме лабораторного обследования на ВИЧ-инфекцию»

   Методы лабораторной диагностики ВИЧ — инфекции

      Серологические методы – обнаружение антител состоят из двух этапов: 1-й этап – ИФА – скрининговое тестирование, 2-й этап – ИБ – подтверждающее тестирование.

    Вирусологические методы – обнаружение антигенов: определение  P 24-антигена (совместно с ИФА), получение культуры вируса (28 дней).

   Молекулярные методы – обнаружение генетического материала  — качественные (РНК/ДНК) и количественные (РНК/ДНК).

              Этапы серологической диагностики                                                      

        1-й этап  — иммуноферментный анализ – выявление суммарного спектра антител против антигенов ВИЧ с помощью твёрдофазного иммуноферментного анализа проводятся в скрининговой лаборатории – ( положительный результат подтверждается в 2-х постановках с использованием одной и той же тест-системы) и в референс-лаборатории – положительный результат подтверждается в 2-х исследованиях при помощи разных по составу антигенов, антител или формату тестов диагностических тест-систем.         Иммуноферментный анализ (ИФА) — проводится  на стандартных тест системах, предусматривает исследование сразу нескольких пациентов на одной панели. Метод имеет определенный процент ложноположительных результатов и является отборочным тестом для дальнейшего исследования — иммунного блотинга (ИБ).

      Результаты ИФА интерпретируются как положительные, неопределенные и отрицательные. При  получении положительного или сомнительного результата исследование этим методом проводится еще дважды.                                                                                      

     Ложноположительные результаты могут наблюдаться при: аутоиммунных заболеваниях, инфекциях, вызванных вирусом Эпштейна-Барр,  онкологических заболеваниях, беременности, вакцинации от гриппа, вакцинации против ВИЧ, технической или канцелярской ошибке.

     2-й этап — иммуноблотинг — выявление антител к отдельным белкам вируса проводится  однократно с помощью специального устройства, являясь экспертным методом, подтверждающим показатели ИФА. Результат взаимодействия антител и соответствующих антигенов визуализируется в виде полос на определенных участках стрипа. ВОЗ считает положительными сыворотки, в которых обнаруживаются антитела к каким либо двум белкам оболочки ВИЧ — вируса. При сомнительных результатах исследования повторяют через 3 месяца.

     Частота ложноположительных результатов только в реакции ИФА – 0,02-0,5%, по стандартной методике ИФА + ИБ – 0,0004-0,0007%.

      Поэтому медицинскому работнику нужно знать, что объявлять результат исследования пациенту имеет право только врач после проведенного полностью комплекса исследований.

        При интерпретации полученных данных лабораторной диагностики ВИЧ – инфекции нужно помнить о возможности получения ложноотрицательных результатов в так называемом периоде «окна». Серореверсия – исчезновение антител может наблюдаться в терминальной стадии заболевания, при длительном применении ВААРТ(высокоактивная антиретровирусная терапия) со стойкой вирусной супрессией( подавление активности вируса  более 5 лет), применении ВААРТ в острой стадии ВИЧ-инфекции.

     Ложноотрицательные результаты могут быть связаны с атипичной иммунной реакцией у пациента, когда антитела длительно не вырабатываются, агаммаглобулинемией( первичным врожденным гуморальным иммунодефицитом ).

      Появление  ложноотрицательных результатов иногда наблюдается при инфицировании штаммами группы «N» и «О» вирусов ВИЧ – 1 и ВИЧ -2, не имеющими выраженной агрессии .

     Вирус ВИЧ -2 редкий распространен в западной Африке.      ВИЧ — 1 имеет 4 штамма. Штамм М – самый агрессивный, а штаммы О, N и Р встречаются реже и в основном в Африке. Внутри группы М существует 9 подтипов которые могут создавать гибридный вирус CRF. Все это создает проблемы в диагностике.

    Частота ложноотрицательных результатов в популяциях с низким уровнем распространения – 0,001%, в популяциях с высоким уровнем распространения – 0,3%

     Серологическая диагностика у детей, рожденных от ВИЧ-инфицированных матерей имеет свои особенности — в течение 6-12 месяцев от рождения сохраняются материнские антитела к ВИЧ. Поэтому таких детей несколько раз обследуют до 18 месяцев. сохранение антител через 18 и более месяцев свидетельствует о заражении ВИЧ – инфекцией.

                  

                             Молекулярная диагностика

        Метод ранней диагностики ВИЧ-инфекции (7-14 день от момента заражения): ПЦР — полимеразная цепная реакция на провирусную ДНК – ген — инженерный метод, исследование  проводится на уровне нуклеиновых кислот и определение уровня РНК ВИЧ-1 (Gen Probe Aptima). Позволяет определять наличие ВИЧ при количестве вирусных частиц 1-10 копий/мл крови. Чувствительность 96-99%, специфичность 99%. В диагностике применяется как вспомогательный.  Может использоваться при неонатальном скрининге, исследовании образцов крови и кровепродуктов на станциях переливания крови.

      Существует понятие — уровень «диагностического окна»  в зависимости от применяемых методов диагностики. ПЦР дает возможность ранней диагностики с 10 дня от момента инфицирования, на втором месте определение антигена р24 – с 15 дня, ИФА и Иммуноблот  значительно позже.

 

          Экспресс диагностика ВИЧ — инфекции

     Экспресс диагностика  имеет свои преимущества: не требует много времени, сложного и дорого оборудования, простые в использовании методы, результаты готовы в день (в час!) обследования и недостатки: стоимость выше, чем обычного ИФА (до 10 раз), сравнительно низкая специфичность (до 70%). Положительные и отрицательные результаты экспресс тестов должны быть подтверждены стандартными методами (ИФА+ИБ).  

    Область применения экспресс тестов: трансплантология — перед забором донорского материала; донорство — обследование крови, в случае экстренного переливания препаратов крови и отсутствия обследованной на антитела к ВИЧ донорской крови; вертикальная профилактика — тестирование беременных женщин с неизвестным ВИЧ-статусом в предродовом периоде (для назначения медикаментозной профилактики ВИЧ-инфекции в родах); постконтактная профилактика, — тестирование на ВИЧ в случае аварийной ситуации.

    Обязательно параллельное исследование той же порции крови    классическими методами ИФА, ИБ. Выдача заключения о наличии или отсутствии ВИЧ-инфекции только по результатам экспресс-теста не допускается.

 

Источник: xn--80agabe1dc1k.xn--p1ai


You May Also Like

About the Author: admind

Добавить комментарий

Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *

Этот сайт использует Akismet для борьбы со спамом. Узнайте как обрабатываются ваши данные комментариев.