ИФА – иммуноферментный анализ. Задача метода ИФА – выявление антител к вирусу иммунодефицита в биологическом материале. С помощью метода можно отследить присутствие в жидкости не самих вирусов, но только антител, вырабатывающихся в ответ на их присутствие. Иммуноферментный анализ широко используется при диагностике ЗППП. Он помогает выявить ВИЧ и другие инфекции, передающиеся половым путем.
Существует несколько видов ИФА: прямой вариант, косвенный вариант, метод «сэндвича». В любом случае методика основана на определении наличия антител, которые служат индикатором проникновения чужеродного агента. Чтобы выявить эти «метки», биологический компонент обрабатывают ферментами.
Иммуноферментный анализ определяет антитела с точностью 96 – 98%, погрешность незначительна. Она составляет 2 – 4%.
ИФА – метод диагностики ВИЧ
ИФА анализ на ВИЧ – это первый этап диагностики. Антигенами вируса иммунодефицита являются протеины p24, p15, p17, p31 и гликопротеины gp 41, gp55, gp66, gp120, gp160.
Чтобы обнаружить вирусный белок, берут порцию крови из вены. Образец, направленный на исследование крови ИФА, обрабатывают иммуноферментными реагентами. Из крови выделяют сыворотку. Если в ходе исследования обнаруживаются антитела к ВИЧ, значит, в крови уже присутствует вирус.
Кровь сдают строго натощак. За 2 дня до анализа не рекомендуется есть жирную пищу и употреблять алкоголь. Следует за 14 дней прекратить прием противовирусных препаратов.
Преимущества метода:
сравнительно небольшая стоимость;
высокая стабильность реагентов;
высокая чувствительность;
короткий срок проведения;
минимальное влияние человеческого фактора.
Современные тест-системы для ИФА производят по мировым стандартам. Это повышает точность метода.
, 300px" />
Иммуноферментный анализ не всегда дает достоверные результаты. После попадания вируса в кровь начинается латентная (скрытая) стадия развития. Период, пока вирусы не начали размножаться, и антитела еще не сформированы, называется «время серонегативного окна». Делать ИФА на этом этапе бессмысленно. Если заражение произошло, результат будет ложноотрицательным. Как быстро вирус себя обнаружит, зависит от того, какое количество опасных клеток попало в организм. При незащищенном половом акте или переливании зараженной крови этот срок будет минимальным.
Для высокой достоверности ИФА на ВИЧ исследование проводят трижды. Сроки сдачи ИФА на вирус иммунодефицита человека:
через 6 недель после вероятного контакта,
через 3 месяца,
спустя полгода.
ИФА 4 поколения на ВИЧ – метод, наиболее информативный на ранних сроках заражения. Его можно проводить уже через 1 месяц после предполагаемого инфицирования. Тест на ВИЧ 4 поколения является дорогостоящим по сравнению с аналогом 3-го поколения. Поэтому в государственных медучреждениях он используется как дополнительный метод диагностики. Бесплатно проводится тест 3. Если по его итогам однозначного ответа дать нельзя, пациента направляют на ИФА 4 поколения.
Важно! Сразу после инфицирования человек становится заразным. Он опасен для окружающих, даже когда еще не знает о своем диагнозе!
Если при ИФА выявлены антитела к антигенам ВИЧ, необходимо проводить дополнительные исследования. К таким относится полимеразная цепная реакция (ПЦР). Достоверность этого метода – 80%. С помощью ПЦР исследуют кровь, сперму и влагалищные выделения. Биологическую жидкость расщепляют в медицинском реакторе, затем подвергают обработке ферментами. В итоге получают данные о том, какова концентрация клеток ВИЧ в жидкой среде. Из-за большой погрешности (20%) при положительном результате дополнительно проводят иммунный блоттинг.
Следующий этап диагностики – тест Комбо (или иммунный блоттинг). Это высокочувствительное исследование (98% достоверности), которое проводят, если через 6 месяцев результаты ИФА неоднозначны.
Расшифровка результатов ИФА
Время расшифровки составляет от 24 до 48 часов. Если необходимо получить информацию срочно (требуется хирургическое вмешательство), расшифровку проводят за 2 часа. В провинциальных медицинских пунктах не всегда есть необходимые реагенты. Пробу берут по месту обращения, затем ее передают в областной центр. При таких обстоятельствах итог можно узнать через 1- 2 недели.
Результат иммуноферментного анализа может быть либо положительным, либо отрицательным; других вариантов нет.
Даже если при первичном и повторных ИФА итог был положительным, пациента нельзя признать ВИЧ-инфицированным. Возможна погрешность. Причины ложноположительного результата:
хронические заболевания;
длительные инфекционные заболевания;
беременность.
Поэтому результат анализа должен быть уточнен дополнительными исследованиями.
Если при проведении иммуноблоттинга на ВИЧ результат положительный (реактивный), человек считается ВИЧ-инфицированным, а отрицательный тест значит, что он здоров.
Проводится еще тест на вирусную нагрузку. Этот показатель при ВИЧ характеризуется количеством вирусных частиц в единице крови (анализ определяет РНК-частицы вируса). Нормой считается количество от 5000 до 15000 клеток вируса в единице крови.
Если цифра находится в этих пределах, либо меньше, вирус неактивен. Даже в случае дальнейшего подтверждения позитивного ВИЧ-статуса человек не заметит перемен в состоянии здоровья долгое время (10 – 15 лет). Если нагрузка менее 20000 клеток, это близко к норме. Когда число вирусных клеток увеличивается, следует незамедлительно начинать противовирусную терапию.
Источник: aids24.ru
Примерно половина всех вопросов, которые возникают на тему ВИЧ, связаны с тестами на ВИЧ и их достоверностью. Сейчас повсеместно в качестве первичного (скринингового) теста на ВИЧ используется тест ИФА (иммуноферментный анализ). Его особенность в том, что он определяет не наличие самого вируса в организме, а наличие антител к нему (что, однако, является полным доказательством того что и сам вирус присутствует, даже если сам вирус из-за низкой вирусной нагрузки не определяется методом ПЦР). Но основная проблема в том, что антитела к ВИЧ появляются не сразу после инфицирования, а с некоторой задержкой. Поэтому возможна ситуация когда инфицирование уже произошло (и возможна передача ВИЧ другим сексуальным партнерам), а тест на ВИЧ еще ничего не показывает. Этот период называется периодом сероконверсии, серонегативным окном или просто – периодом окна. И естественно, что основной вопрос на эту тему – сколько же длиться этот период окна или, другими словами, через какой срок после возможного риска инфицирования, негативный результат теста ИФА можно считать полностью достоверным.
И ответ на этот вопрос действительно очень важен для тех, у кого был риск инфицирования, потому что именно от этого срока зависит, сколько им придется томиться в волнительном ожидании до того момента, когда можно будет сделать тест.
Надо понимать, что если инфицирование произошло, то тест ИФА покажет его, скорее всего, намного раньше срока серонегативного окна, но если инфицирования нет, то полностью уверенным в этом можно быть только в результате негативного теста после окончания периода окна.
Если поискать эту информации в Сети, то можно найти очень разные и противоречивые данные. Упоминается период окна от 2-х месяцев до полугода, года и, иногда, даже больше. И тут дело в том, что тесты ИФА используются довольно давно, и с тех пор сменилось несколько их поколений. Первые тесты были довольно малочувствительны, и для их «срабатывания» нужна была повышенная концентрация антител. Именно отсюда долгое время в качестве серонегативного окна фигурировал срок в 6 месяцев.
В настоящее время почти везде распространены тесты ИФА 4-го поколения, или так называемые комбо-тесты. В них кроме наличия непосредственно самих антител определяется еще наличие специфичного антигена p24, который, в случае инфицирования, появляется на несколько недель раньше антител. Это позволяет утверждать что, что период серонегативного окна для современных ИФА тестов не превышает 3-х месяцев. Другими словами отрицательный тест, сделанный через 3 месяца после риска инфицирования, будет полностью достоверным. Хотя, по существующей статистике в течении первых 22 дней после заражения ИФА уже положителен в 50% всех случаев, а в течении первых 6 недель после заражения ИФА положителен уже в 95%. (Источник Current Medical Diagnosis and Treatment 2008, page 1162).
Поэтому оптимальная схема сдачи теста на ВИЧ такова: через 6 недель после риска (достоверность отрицательного теста 95%) и еще раз, для гарантии, через 3 месяца после риска (достоверность практически 100%).
Есть информация о том, что после периода острой стадии ВИЧ антиген p24 может исчезнуть. Но нужно понимать, что если это происходит, то к этому моменту уже выработаны антитела к ВИЧ и поэтому тест ИФА в любом случае будет положительным и достоверным.
Почему же в Сети, на телефонах доверия и других источниках до сих пор так часто фигурирует срок в 6 месяцев? Одна из причин – просто устаревшие данные, которые касались тестов ИФА более ранних поколений. Еще дело, возможно, в том, что, насколько я знаю, срок в 6 месяцев до сих пор присутствует в официальных рекомендациях для врачей. И поэтому при официальной консультации, чаще всего для перестраховки и для формального соблюдения этих рекомендаций, говорят о 6-месячном периоде окна, заставляя людей ждать и мучаться пол года, вместо 3-х месяцев.
Увеличение периода сероконверсии возможно лишь в некоторых исключительных и поэтому очень редких случаях: если человек принимает постконтактную профилактику от ВИЧ либо иммуноподавляющие препараты – иммунодепрессанты (никакие другие препараты повлиять на период сероконверсии не могут), либо в случае тяжелых заболеваний иммунной системы (никакие другие заболевания также не влияют на размер окна). Но, в последнем случае, не знать о своем заболевании просто невозможно, т.к. без серьезных последствий оно протекать не может. Информация о том, что на период окна может влиять прием наркотиков, — не соответствует действительности.
Чтобы окончательно закрыть тему тестов ИФА хочу добавить, что по ряду причин (беременность, некоторые заболевания и др.) этот тест может дать ложноположительный результат (примерно в 1% случаев). Поэтому всегда любой положительный ИФА тест в обязательном порядке перепроверяют на более чувствительном и специфичном тесте – иммуноблоте. Положительный результат иммуноблота после положительного ИФА достоверен на 99,9% — это максимальная точность для любого медицинского теста. И только после такого подтверждение ставится диагноз «ВИЧ инфекция». Если иммуноблот отрицательный, значит, первый тест был ложноположительным, и на самом деле ВИЧ у человека нет.
Итак, для всех, кто собирается делать тест на ВИЧ, я повторю еще раз основной тезис этого поста: окончательную достоверность тест на ВИЧ принимает через 3 месяца после возможного инфицирования. Хотя, в большинстве случаев, если инфицирование все же произошло, тест ИФА станет положительным задолго до окончания этого периода.
UpDt: Чтобы не быть голословным привожу для примера перевод выдержки из ф.
обязательным, согласно приказу Минздрава Французской республики от 18 января 1993 года, отменено согласно Приказу Минздрава от 1 августа 2007 г."
/Videx K.
Источник: myhiv.livejournal.com
Насколько достоверными являются анализы на ВИЧ
ВИЧ является одним из самых страшных заболеваний современности из-за того, что лекарства от него так и не было придумано. Одновременно с этим стоит сказать, что только своевременно сданные анализы дают возможность не только успокоить, но и начать лечение на ранних стадиях.
Для того чтобы провести полное исследование на ВИЧ, требуется сдать различные анализы. Причем только врачи, могут назначить какие будут наиболее результативны в данный момент времени. Причем достоверность проведенных тестов не вызывает сомнений. Ведь только с их помощью точностью до 90-99% выяснить произошло ли заражение ВИЧ или нет.
Проводя исследования, врачи будут учитывать возможность погрешности, а так же наличие различных факторов, способных исказить точность результатов. Причем различные анализы дают возможность получить точный результат относительно ВИЧ. Каким будет самый достоверный анализ? В число самых точных тестов, стоит отнести иммуноферментное исследование на ВИЧ. Достоверность полученных данных не будет вызывать сомнений, так как формируется из целого ряда подтвержденных фактов. Причем на первое место выходит периодичность проведенных исследований. А именно через какое время будет проведено первое исследование.
Следует понимать, что проведение ИФА-тестирование дает возможность быстрого обнаружения АТ, во время диагностирования ВИЧ инфекции. Чаще всего, его проводят в первый месяц, после предполагаемого заражения. К нему прибегают когда следует провести диагностику как тех, кто предполагает наличие диагноза, так и те, кто хочет провериться.
Проведение ИФА теста проводить через 2 недели после предполагаемого заражения, будет рано, так как эффективность будет незначительной. Это связано с тем, вырабатываться антитела для защиты организма от вирусов. Они достигают своей концентрации только через месяц после вероятного заражения.
Через какое время могут появиться первые симптомы? Кроме того, перед тем как проявятся первые симптомы, имеющие отношение к ВИЧ-инфекции, может пройти несколько недель или месяцев.
Максимальная точность достигается только спустя месяц, когда антитела набирают нужную концентрацию. Для получения более точного результата потребуется провести анализ не ранее 3-4 месяцев, спустя вероятного заражения.
Исследование на ВИЧ с учетом количества антигенов
Проведение исследования на ВИЧ при помощи иммунного блоттинга позволит определить в каком состоянии находится иммунная система человека. Проведение исследования по поводу ВИЧ, заключается в точном выявлении антигенов – это. С его помощью можно выяснить будет человек заражен или нет.
Через какой период будет эффективен анализ?
Для достижения самого достоверного результата следует обращаться для проведения анализа через месяц-два. К этому моменту антигены будет вполне различимы. А иммунная система достаточно ослаблена и требует начала лечения.
Проведение экспресс-исследований на ВИЧ
Проведение различных видов исследований, в число которых входит ПЦР и экспресс-проверка, позволяет значительно ускорить процедуру выяснения наличия у человека в крови ВИЧ-инфекции. В итоге не нужно будет ждать месяц для получения результата. Результат можно получить через гораздо меньшее время. При этом следует учитывать, что погрешность будет составлять около пяти процентов. Именно по этой причине анализ на ПЦР будет применяться очень редко. Чаще всего он может применяться для того чтобы выявить точное количество антител, находящихся в биологическом материале или крови больного. Это позволяет сделать вывод относительно состояния здоровья человека, а так же для выработки курса лечения.
При этом, ПЦР-анализ, по его достоверности нельзя считать универсальным способом проведения исследований. Это связано с тем, что у него больше других ложноположительных результатов, требующих дополнительных обследований. Чаще всего его используют, когда ставится диагноз заболевания, связанный с проведением скрининга для уточнения диагноза, связанного с подозрением на ВИЧ. Дает возможность определить стадию развития СПИДа. Даже не смотря на наличие вероятности погрешности в виде ложноположительного результата, позволяет получить ответ уже на 11-15 день с момента, как произошло заражение. И это самый быстрый способ получить ответ, который в дальнейшем может быть опровергнут или подтвержден другими способами исследований. Особенность этого способа такова, что он берет за основу не антитела, а учитывает наличие самого вируса в организме человека.
Возможные ошибки во время обследования
Любое исследование не может дать 100% результат. Процент погрешности будет учитываться специалистами для получения максимального результата при обследовании на ВИЧ-инфекцию. А потому могут возникать:
ошибки технического характера, как результат неправильного хранения, транспортировки или обработки частиц крови или иных биологических образцов;
ошибки при обследовании беременных, когда отклонение на уровне гормонов дает показатели, которые можно принять за положительный результат теста;
возникновение ложноположительных результатов, проявляемых в результате тяжелых хронических или инфекционных заболеваний, способных дать положительный на ВИЧ результат;
в случае нарушения работы иммунной системы, что тоже приводит к ошибкам во время диагностики и первичному результату анализов.
Именно по этой причине, получив положительный или отрицательный диагноз, рекомендуется спустя несколько месяцев провести дополнительное исследование, результат которого будет в несколько раз точнее первого или наоборот подтвердит полученные ранее данные.
Источник: testanaliz.ru
Я сдал анализ на ВИЧ. Он показал отрицательный результат. Но я беспокоюсь: «А вдруг, он не совсем точен? Может ли он быть ложноотрицательным? Вдруг у меня ВИЧ, а анализы не показывают это? Может ли быть такое? Или наоборот, анализ показал, что у меня положительный результат на ВИЧ. Но меня не покидают сомнения, что это могло быть ошибкой, потому что я девственница».
Достоверны ли современные анализы на ВИЧ?
Да. Современные тест-системы для детектирования наличия ВИЧ — достаточно достоверны с учётом периода «окна».
Например, тест-системы 4-го поколения выявляют 95% инфицированных ВИЧ через 28 дней после момента заражения.
Поэтому рекомендуется повторить анализ через 3 месяца после рискованного контакта. Это необходимо, чтобы «дозрели» остальные 5% ВИЧ-инфицированных, которые были не выявлены в первые 28 дней.
Если же получен положительный результат анализа на ВИЧ, то используется другой вид теста — вестерн-блотинг (иммуноблотинг, «блот»). Иммуноблот детектирует белки различный частей вируса. Достоверность иммуноблота как подтверждающего теста — 100%.
Первый Вестерн блот для более точного определения ВИЧ.
Что может повлиять на результат анализа на ВИЧ?
Результаты анализов на антитела к ВИЧ, подтвержденные вторым тестом, не подвержены влиянию других факторов, например таких, как: инфекций, лекарств, прививок, излишнего веса, приема пищи или жидкости перед сдачей анализа, употребление алкоголя или рекреационных психоактивных веществ, использование шампуня, ополаскивателя или времени дня.
Также на результат не влияет, даже если у Вас был грипп или простуда или Вы принимаете какие-либо лекарства.
Вам не нужно не есть, не пить перед сдачей анализа на ВИЧ. Еда и напитки не влияют на результаты анализов.
Нужно ли ещё раз сдавать анализ на ВИЧ?
Это зависит от того, как давно был Ваш последний рискованный контакт при котором был риск инфицирования ВИЧ.
Согласно международной практики, если контакт был менее трех месяцев назад, то последний раз обычно рекомендуется проводить тестирование через три месяца после контакта.
Нужно ли сдавать на ВИЧ ещё раз, если уже сдал через 3 месяца после контакта?
В соответствии с общеприменительной практикой, например согласно руководства Великобритании человек с отрицательным результатом на ИФА 4-го поколения через три месяца после контакта считается ВИЧ-отрицательным.
Является ли отрицательный анализ точным на 100%?
Результаты анализов на ВИЧ после 3 месяцев имеют точность более 99,97%. Они работают для всех типов и подтипов ВИЧ.
Очень редко какие медицинские тесты имеют 100% точность. Нельзя исключить очень редкие случаи, когда будет получен ложноотрицательный результат.
Тем не менее, тесты на ВИЧ являются одним из наиболее точных тестов среди подобных тестов на другие инфекции. Тесты, показывающие отрицательный результат, «интерпретируются» как отрицательные.
Если результат отрицательный через три месяца после контакта, то Ваш результат интерпретируется как отрицательный. Это предполагает, что у Вас больше не было рисков инфицирования в эти 3 месяцев. Т.е. если в этот период опять был рискованный контакт, то соответственно временной 3-месячный период смещается дальше по времени.
На этом этапе Вы можете начать спать спокойно. Цель тестирования достигнута. Сделайте правильные выводы и не допускайте рискованных контактов в дальнейшем. Если же Вы не можете перестать беспокоиться и «начать жить», внимательно изучите: «Как избавиться от спидофобии».
Схема. Риск заражения ВИЧ.
Узнайте, как защитить себя в будущем, чтобы Вам больше не пришлось проходить через этот ад: Профилактика заражения ВИЧ. Это позволит Вам принимать обоснованные решения и следить за своим здоровьем.
Если результат отрицательный через четыре недели после заражения, это говорит о том, что Вы, скорее всего, будете ВИЧ-отрицательным. Тест через три месяца подтвердит это.
Что такое «ложноотрицательный» результат анализа на ВИЧ?
Ложноотрицательный результат теста это, когда тест показывает отрицательный результат, а у человека на самом деле есть ВИЧ.
Это очень редко и обычно происходит в период окна, когда человек заражен, но тест не может выявить инфекцию, т.к. нет необходимой концентрации антител к ВИЧ.
Через сколько недель от контакта можно выявить, что заразился ВИЧ.
Как и в других типах тестов, в тесте на ВИЧ всегда есть небольшой процент погрешности. Например, если использовать тесты, которые определяют только антитела к ВИЧ без антигена (ИФА 3-го поколения, большинство экспресс-тестов), то только 0,3% тестов (3 теста на 1000) будут ложноотрицательными через 3 месяца.
С тестами 4-го поколения эта погрешность еще ниже. На практике, отрицательный результат на ИФА 4-го поколения через три месяца означает, что у Вас нет ВИЧ.
Вам не нужно ещё сдавать снова, если у Вас в будущем не будет новых рисков инфицирования ВИЧ.
Что такое «ложноположительный» результат теста?
Ложноположительный результат теста на ВИЧ — это когда результат теста положительный, но в действительности у человека нет никакого ВИЧ. Это может произойти с тестами на антитела, когда тест реагирует на антитела для других инфекций.
Примерно 1,5% (15 из каждых 1000) результатов тестов на антитела являются ложноположительными. Тесты четвертого поколения (которые кроме антител ещё и определяют антиген — см. картинку выше) имеют гораздо меньшую вероятность ложного срабатывания.
Это означает, что небольшой процент людей, которые дали положительный результат на экспресс-тесте (обычно на них результат выдают в течение часа), может оказаться ВИЧ-отрицательным.
Поэтому после положительного результата на ВИЧ делают ещё один тест на ВИЧ — в лаборатории, чтобы избежать таких ситуаций.
Если Ваш анализ крови был первоначально выполнен в лаборатории, и он дал положительный результат, то Вас направят в СПИД-центр, чтобы подтвердить или опровергнуть наличие ВИЧ в Вашем организме. Там ещё раз перепроверят Ваш образец крови на референс-ИФА. И если он даст положительный результат, то проведут исследование с помощью второго типа теста, называемого вестерн-блоттингом, который на 100% точен.