Ифа положительный иммуноблот отрицательный что это значит


Когда экспресс-анализ крови, сданный в любой лаборатории показывает наличие ВИЧ-инфекции, это не повод впадать в панику. Вирус иммунодефицита человека необходимо выявить другими, более сложными анализами.

Иммуноблоттинг на ВИЧ проводится обязательно в качестве окончательного подтверждения диагноза пациента. Он точнее ИФА (иммуноферментного анализа) и его результаты являются констатацией факта наличия или отсутствия заболевания.

 

Что такое иммуноблот на ВИЧ

Иммуноблот на ВИЧ имеет международное название western blot. Данная методика лабораторной диагностики выявляет антитела к ВИЧ в сыворотке крови. Протоколы Всемирной организации здравоохранения предписывают использовать его в качестве дополнительной экспертизы в случае, когда ИФА показывает наличие антител. Порядок именно таков, поскольку данный анализ является более точным, специфическим и дорогостоящим.

ВИЧ иммуноблоттинг разработали в американской лаборатории George Stark, которая располагается в Стэнфордском исследовательском университете. Помимо непосредственно медицины, методика применяется в генетике, биохимии, молекулярной биологии и является особо точной.

 

Предназначения анализа иммуноблоттинга на ВИЧ?


Иммуноблоттинг на ВИЧ — сложный компонентный анализ при помощи которого выявляют антитела к вирусу иммунодефицита человека. Он является сочетанием ИФА и разделённых электрофоретическим образом белков вируса. Будучи составной частью геля они переносятся на мембрану из нитроцеллюлозы. Вся процедура проходит в несколько этапов строго в лабораторных условиях и требуют соответствующей квалификации и оборудования.

Все кто интересуются, что такое иммуноблот на ВИЧ, детально изучают и механику проведения данного исследования. В ходе анализа, на первом этапе вирус очищается, разрушается на составные части и проходит воздействие электрофорезом. А его антигены делятся в соответствии с молекулярным весом. Следом применяется метод блоттинга, используя который, антигены из геля переносят на нитроцеллюлозу или фильтр из нейлона. На них содержатся белки, которые характерны для ВИЧ и на данном этапе они абсолютно невидимы глазу. После этого, на материал с антигенами наносится сыворотка или плазма крови. Если в них присутствуют антитела, то они связываются только со специфическими белками-агентами, которые соответствуют непосредственно им. Под воздействием сложных процедур, они визуализируются. Это и позволяет подтвердить наличие у человека заболевания.


Если иммуноблот положительный, то есть на мембране проявились следы, можно подтверждать наличие у человека ВИЧ. Диагностика одинаково эффективна на различных стадиях заболевания и позволяет выявить к каким именно антигенам вируса у пациента образовались антитела.

 

Почему данный анализ является необходимостью?

Коварство вируса иммунодефицита человека заключается в том, что длительное время он может абсолютно не проявляться. Тем временем, он живёт в клетках, встраивая в их ДНК свою информацию. В отличии от более простых вирусных инфекций, организм самостоятельно не может с ним справиться. Более того, лекарства которые могут убить болезнь — не изобретены. В результате своей деятельности, ВИЧ разрушает лейкоциты, снижая иммунитет и человек становится бессильным против любой, даже минимальной инфекции.

ВАЖНО! Если лечить ВИЧ при помощи поддерживающих препаратов, которые не позволяют вирусу размножаться, вести полноценную жизнь можно до глубокой старости. Поэтому, при малейших подозрениях, сдать анализ не будет лишним. В случае, если иммуноблот отрицательный — вируса в организме нет, даже если простой анализ крови говорит противоположное. А если заболевание выявлено и пациент не принимает терапию, то он обречён. Больше 10 лет с момента заболевания, люди которые не лечатся адекватными препаратами не живут. ВИЧ нельзя вылечить при помощи народной медицины, голоданий и прочих практик. На данном этапе эволюции, человечество изобрело только лекарства, которые останавливают развитие вируса.


 

Особенности метода

Что такое иммуноблот на ВИЧ и зачем он нужен — вопрос, который задают пациенты и их родные. Их любопытство не праздное, ведь диагноз уже подтверждён или опровергнут ИФА. Анализ на иммуноферменты точные результаты показывает далеко не всегда. И каждый раз, когда он определяет наличие вируса в организме, требуется подтверждение результатов с использованием ПЦР и вестерн-блотта. Только в случае, когда и иммуноблот на ВИЧ положительный, принимается решение о назначении лечения.

Терапия подбирается в каждом случае индивидуально и она является пожизненной. Её задача — остановить болезнь, чтобы человек мог вести полноценную жизнь. При этом, носителю всегда необходимо помнить о мерах предосторожности в процессе взаимодействия с близкими людьми и в обществе.

ВИЧ-иммуноблоттинг позволяет выявить у больного вирус I-II типа. Антитела организм начинает вырабатывать уже спустя 2 недели после инфицирования. Их число стремительно увеличивается в крови и они не выводятся. Численность только растёт, если заболевание не лечить. При этом, будучи носителем, человек может совершенно не подозревать о своём ВИЧ-положительном статусе, так как вирус может абсолютно не проявлять себя несколько лет.

 

Когда назначают анализ иммуноблот на ВИЧ?


Анализ иммуноблот на ВИЧ делается исключительно после ИФА, если его результат положительный или сомнительный. Помимо этого, обязательный тест на ВИЧ сдают пациенты перед операцией, доноры, женщины во время беременности или планирующие беременность. Раз в 6 месяцев, тест рекомендуют проходить людям, которые часто меняют половых партнёров, так как они находятся в группе риска.

Заразиться ВИЧ можно половым путём и через кровь, в том числе от не стерильных медицинских или косметологических инструментов. Если подтвердится статус ВИЧ-положительный, иммуноблот положительный будет в любом случае. Поэтому, стоит обратиться к врачу при следующих симптомах:

  • Резкое снижение массы тела
  • Постоянная слабость, снижение работоспособности
  • Диарея более 3 недель
  • Лихорадка
  • Обезвоживание организма
  • Увеличенные лимфоузлы
  • Развитие туберкулёза, токсоплазмоза, пневмонии
  • Обострившийся герпес продолжительное время

 

Всё это может указывать на наличие вируса. Кровь для анализа на ВИЧ берут из вены. Сдавать его следует натощак. А за сутки не рекомендуется пить кофе и кофеиносодержащие напитки, алкоголь, испытывать чрезмерные физические нагрузки.

 

Где можно сдать анализ?

Анализ на ВИЧ можно сдать как в обычной поликлинике, частной поликлинике, так и специальных центрах ВИЧ. Результаты ИФА и иммуноблот выдаются в течении суток. По желанию, можно сделать и срочный анализ.


Те, кому в результате анализов поставили диагноз ВИЧ, задаются вопросом — может ли иммуноблот быть ложноположительным? Это практически исключено, но у 1% пациентов подобное случается. Это происходит в том случае, когда тест реагирует на другие антитела. И зачастую, данная ошибка происходит у людей с иными серьёзными хроническими заболеваниями.

Иммуноблот ложноположительный на ВИЧ, зачастую подразумевает иную медицинскую формулировку — неопределённого статуса. В данном случае, тест реагирует на отдельные белки, определяя их как ВИЧ. Такое случается при аутоиммунных заболеваниях, онкологии и даже во время беременности. В данном случае требуется обязательное проведение дополнительных анализов в интервале 1, 3 и 6 месяцев.

Может ли иммуноблот быть ложноположительным — да, может, но крайне редко. Обязательно требуются дополнительные исследования, которые могут подтвердить или опровергнуть заболевание. Ряд людей, у которых возникает подозрение на вирус терзают сомнения — нужно ли сдавать анализ через 4 недели, если через 12 его нужно делать повторно. Можно и не сдавать, но врачи настоятельно рекомендуют это делать, если статус не измениться, то дождаться очередной диагностики будет легче. Если вы видите формулировку иммуноблот ложноположительный на ВИЧ, то скорее всего, статус подвергается сомнению.

 

Стоимость иммуноблота на ВИЧ


Стоимость иммуноблота на ВИЧ зависит от места проведения анализа. В государственных поликлиниках ИФА и иммуноблот должны проводиться бесплатно. Относительно частных клиник, то иммуноблотинг не является дешёвым анализом и цену на него устанавливает отдельно каждое медицинское учреждение. Но, данное исследование дешевле нежели ПЦР.

 

Как приводится процедура?

Процедура проводится путём забора крови из вены натощак. Место забора дезинфицируется и заклеивается пластырем. После анализа рекомендуется выпить сладкий чай или съесть энергетический батончик. Для того, чтобы получить направление на иммуноблот — необходимо обратиться к врачу-терапевту.

 

Результаты анализа

Результаты анализа могут иметь два варианта — иммуноблот отрицательный или положительный. Первое значит, что вирус не обнаружен и человеку переживать не стоит. Второе развитие событий подтверждает наличие ВИЧ-инфекции в организме. После этого нужно пройти исследование ПЦР. Если вы сомневаетесь в правильности результатов, или ИФА показал положительный результат, а  western blot отрицательный — можно пройти повторное тестирование в другой клинике.

Существует вариант, когда результат не определён. Тест реагирует не на все белки вируса, а на отдельные. В данном случае требуется постоянное наблюдение и анализы сдают регулярно. Зачастую, статус ВИЧ-положительный, иммуноблот положительный подтверждается на всех этапах. В течении времени проявляются и остальные белки, а результат становится более явным. Если через 6 месяцев он так и не изменяется, то это значит, что вирус не обнаружен.


 

Иммуноблот положительный

Иммуноблот положительный не означает, что нужно срочно начинать самолечение всеми доступными способами. Подбор лекарств и курс терапии может назначать только лечащий врач. Это связано с типом вируса, его концентрацией, стадией заболевания, общим состоянием здоровья пациента и другими нюансами.

Стоит учитывать, что иммуноблот на ВИЧ, положительный результат не покажет сразу после инфицирования. С момента возникновения риска должно пройти не менее 2 недель. Если результат не определён или даже отрицательный, требуется пройти повторную диагностику через 4-8 недель.

 

Может ли иммуноблот быть ошибочным?

Может ли иммуноблот быть ошибочным — интересуются все, кому после проведения лабораторных исследований поставили диагноз ВИЧ? Это высокоточный анализ и если он показывает наличие инфекции, то этого достаточно для подтверждения диагноза. В ином случае, результат будет отрицательным или неподтверждённым.


Бывают ситуации, когда полоски указывающие на вирус слишком бледные и понять их довольно сложно. Такой результат стоит поддать сомнению и пройти исследование в другой клинике. В целом, ответ на вопрос может ли иммуноблоттинг быть ошибочным — однозначно нет. Данное исследование служит для подтверждения ИФА и если результат обоих идентичен, то заболевание подтверждается. В случае, когда ИФА положительный, а вестерн блот отрицательный — ВИЧ у человека нет.

Источник: medinfo.club

Какие бывают тесты ВИЧ?

Для скрининга (т.е. быстрого и массового тестирования) применяется метод ИФА или ИХЛА. Для подтверждения диагноза применяется иммуноблот.

Для выявления ВИЧ в некоторых ситуациях применяется качественный (т.е. есть или нет, без ответа на вопрос «сколько?») ПЦР РНК или провирусной ДНК ВИЧ, но данный метод является на сегодня вспомогательным и его не следует использовать для скрининга ВИЧ-инфекции.

У лиц с диагностированной ВИЧ-инфекцией применяется количественный метод ПЦР на РНК ВИЧ, он позволяет ответить на вопрос сколько вируса в крови. Его так же не следует применять для диагностики.

Когда после риска нужно сделать тест на ВИЧ?

Оптимально сделать два теста: через 6 недель и через 12 недель (3 месяца, если округлить до целых месяцев) после риска — достоверность отрицательного результата будет предельно близка к 99,9 %. Тест через любой более длительный срок тоже будет достоверен.


На любых сроках от потенциально опасной ситуации после 6-12 недель ИФА не увеличивает и не теряет своей надежности, оставаясь точным методом диагностики и через год, и через два и далее. В очень редких случаях диагностические проблемы могут возникать у очень тяжелых, фактически терминальных пациентов, с развернутой картиной СПИДа. Подробнее можно почитать об этом здесь, также там даны ответы на вопросы о т.н. поздней сероконверсии.

Где я могу пройти тест на ВИЧ?

Существует много мест, где вы можете пройти тест на ВИЧ: в поликлинике, в кабинете частного врача, больницах, клиниках планирования семьи и в местах, специально отведенных для тестирования на ВИЧ.

Всегда старайтесь пройти тестирование там, где проводится консультирование. В некоторых местах имеются услуги по консультированию и тестированию на дому, которые могут включать консультирование пар и оказание им поддержки для безопасного раскрытия результатов после тестирования.

Какой нужно сделать тест?

ИФА или ИХЛА тест на ВИЧ. Это название технологии теста. Конкретное название оборудование будет написано на упаковке теста, например, Abbot ARCHITECT HIV Ag/Ab Combo.


Зачем делать тест через 6 недель, если всё равно нужно будет делать через 12? Можно обойтись только одним тестом через 12 недель?

Да, можно. Первый тест даст уже очень высокую предварительную достоверность, что важно для диагностики, и, кроме того, при отрицательном результате позволяет легче переждать срок до финального теста через 3 месяца.

Что такое период (серонегативного) окна?

Это период между заражением ВИЧ и появлением обнаруживаемых антител к вирусу.

В течение «периода окна» в крови ВИЧ-инфицированных людей нет антител, которые можно обнаружить с помощью теста на ВИЧ. Тест на ВИЧ отрицателен. Однако, в жидкостях организма человека, таких как кровь, семенная жидкость, влагалищное отделяемое и грудное молоко, уже может отмечаться высокий уровень ВИЧ.

ВИЧ может передаваться другим людям во время периода окна, даже если тест на ВИЧ не показал, что у вас ВИЧ-инфекция.

Какова достоверность теста через 6 недель после риска?

Для тестов, определяющих и антитела и антигены — практически полная, для тестов только на антитела — примерно на уровне 95%.

Если ИФА положительный, то это означает диагноз ВИЧ-инфекции?

Нет, требуется подтверждение другим методом. Подтверждающим методом для диагностики ВИЧ-инфекции сегодня является непрямая иммунофлюоресценция (РНИФ, иммуноблот, вестерн-блот). Иммуноблот демонстрирует высокую чувствительность (99,3 — 99,7 %) и специфичность (99,7 %), но так как метод определяет иммуноглобулины класса G, то с момента инфицирования результат может быть ложноотрицательным до трех недель.

У меня первый (второй третий, сорок шестой) ИФА тест на ВИЧ положительный, а иммуноблот отрицательный. Что это значит?

Это значит, что ВИЧ у Вас нет.

У меня иммуноблот сомнительный (неопределенный). Что это значит?

Вам необходимо повторить иммуноблот через 2-3 месяца после первого. Если он будет отрицательным или останется неопределенным, то ВИЧ можно исключить. Иммуноблот может быть отрицательным или сомнительным сразу после инфицирования в пределах 4-8 недель, именно для этого его нужно повторить.

Проверочный иммуноблот оказался положительным. У меня ВИЧ? Ошибки быть не может?

Да, у вас, к сожалению, ВИЧ. Не может.

У меня отрицательный тест через 3 месяца, но у меня продолжаются непонятные симптомы, у меня ВИЧ?

ВИЧ у Вас нет. Ваши симптомы к ВИЧ отношения не имеют. С любой непонятной симптоматикой нужно обращаться к врачам очно.

Есть ли возможность узнать о наличии или отсутствии ВИЧ раньше?

Да, возможно. Первый ИФА (ИХЛА) Ат+Аг тест можно сделать уже через 3 недели после риска, его достоверность будет высокой. Если есть лишние деньги, то можно сделать тест ПЦР ДНК качественный на ВИЧ через 2 недели после риска, его результат тоже даст высокую предварительную достоверность.

Я сдавал тест через 1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12 месяцев после риска. Они все отрицательные. Но я плохо себя чувствую, у меня чешется левая пятка и зудит под левой подмышкой. У меня точно ВИЧ, я уверен, просто тесты его не показывают!

ВИЧ у Вас нет. Со СПИДофобией нужно обратится к психиатру очно.

В чем разница между ИФА и ИХЛА? Что информативнее?

Иммуноферментный анализ (ИФА) и иммунохемилюминесцентный анализ (ИХЛА) это два способа забить гвоздь, большим красным, или средним зеленым молотком. Результат один и тот же — взаимодействие антигена с антителом или отсутствие такового. Т.е. информация — забитый гвоздь — в итоге одна и та же.

Обычно указания на ИХЛА в отношении диагностики ВИЧ носит характер артефакта, и на самом деле речь идет об ИФА. Т.е. с одной стороны — разницы нет, с другой — правильнее оперировать не названием метода, а названием тест-системы.

Как узнать поколение теста, определяет ли он антиген?

Антиген определяется, если известно, что это тест 4-го поколения, если в названии теста фигурируют слова или буквы: антиген, antigen, аг, ag.

Какие поколения тестов сейчас используются? Могут ли это быть старые тесты 2-го поколения?

Все современные тесты — это тесты 3-го (без антигена) или 4-го (с антигеном). Более старые тест-системы не производятся и не используются уже как минимум лет пять. Все современные тесты дают полную достоверность через 12 недель после риска, независимо от их обозначений и поколений.

Что такое тесты 4 поколения? Чем отличается разные поколения ИФА?

Тесты 4 поколения детектируют ВИЧ-инфекцию раньше, так как «видят» не только антитела, как тесты 3 и более ранних поколений, но и антиген ВИЧ. Антитела вырабатываются организмом в ответ на ВИЧ-инфекцию, и на выработку нужно некоторое время. Антиген ВИЧ p24, это белок вирусного капсида, а именно непосредственно кусочек вируса. Понятно, что он начинает определяться в крови ранее, чем антитела — белки иммунной системы человека, которые вырабатываются в ответ на ВИЧ-инфекцию. Т.е. «период окна» для теста 4 поколения совсем небольшой. Когда начинают обнаруживаться в большом антитела против ВИЧ, антиген p24 часто уже не выявляется, вероятнее всего в результате образования комплекса между антигеном и антителами в крови. В случаях его обнаружения антиген p24 является высокоспецифическим индикатором инфекции.

Какого поколения был мой тест?

Для Российской Федерации — четвертного, иных у нас не ввозится и не используется. В названии теста обычно присутствует что-либо из: «Combo», «At/Ag», «АТ/АГ» или «p24».

Выявляет ли ИФА тест 4 поколения ВИЧ-2?

Да, все современные специализированные ИФА-системы выявляют ВИЧ-1 и ВИЧ-2.

Какой период «окна» для тестов 4 поколения (Ag/At Combo)?

Тест-системы 4 поколения способны обнаружить не только антитела к ВИЧ, которые организм вырабатывает в ответ на инфекцию, но и непосредственно ВИЧ, посредством выявления вирусного белка p24. Белок p24 может быть определен очень рано, но его уровень в крови в период после инфицирования постепенно снижается, но одновременно с этим снижением нарастает уровень антител. Все люди разные, потому назвать точный 100% минимальный срок, когда сомневаться в тесте уже нет поводов — невозможно. Однако, на сегодня есть достаточное количество исследований, которые дают нам весьма определенные ориентиры, приведем лишь несколько из них:

  • 14 дней;
  • 17-18 дней (2,5 недели);
  • 3-4 недели;
  • Один месяц.

Итак, у нас достаточно данных считать, что лабораторные ИФА-системы 4 поколения с очень высокой вероятностью «не пропустят» ВИЧ-инфекцию уже через месяц поле инфицирования.

Так все же, с какого срока ИФА 4 поколения совершенно надежно исключает ВИЧ?

Тест 4 поколения может в отдельных случаях выявлять ВИЧ-инфекцию уже через неделю после инфицирования, но ориентироваться на это все же нельзя, потому как это скорее исключение. Как Вы видели выше — месяц вполне надежный срок для современных лабораторных тест-систем.

Я тестировался на разных сроках, в том числе и через 6-8 недель, и через 12 недель (3 месяца после возможного контакта) и не могу успокоиться, потому как наблюдаю различные симптомы, в некоторых результатах анализов есть отклонения и т.д. и т.п. Что делать? Что мне еще сдать?

Ничего, в данном случае вы имеете дело с неким иным заболеванием, и скорее всего с тревожным или тревожно-депрессивным расстройством. Получите консультацию квалифицированного инфекциониста, а затем, если инфекционная или иная природа будет исключена, то обратитесь за помощью к психотерапевту или психиатру.

Что такое специфичность и чувствительность?

Специфичность диагностического теста – это доля верно определенных тестом заведомо отрицательных образцов.

Иначе говоря, для определения специфичности теста необходимо взять несколько тысяч заведомо здоровых людей и проверить их при помощи теста. Если на каждые 1000 образцов будет получено 10 ложных положительных результатов – то специфичность теста составит: (1000-10)/1000*100%=99%. Если количество ложных срабатываний больше, то специфичность становится меньше (т.е. хуже). Так, специфичность теста 99% означает примерно 10 ложных позитивных результатов на 1000 проверенных здоровых людей.

Внимательно изучите инструкцию и материалы предлагаемых на рынке тестов, найдите информацию о том, каким образом была проверена специфичность. Как правило, это данные по испытаниям нескольких тысяч образцов, полученных из разных географических регионов.

Чувствительность диагностического теста – это доля верно определенных тестом заведомо положительных образцов.

Иными словами, если мы возьмем 100 достоверно ВИЧ-инфицированных людей, проверим их тестом и получим 100 положительных результатов, то чувствительность теста будет равна 100%. Практически у всех тестов на рынке чувствительность 100%.

Нельзя путать понятия точности выявления положительных и отрицательных образцов. Точность выявления положительных образцов — это чувствительность теста, а точность выявления отрицательных образцов — это специфичность.

Чувствительный тест часто дает положительный результат при наличии заболевания (обнаруживает его). Однако, особенно информативен он, когда дает отрицательный результат, т.к. редко пропускает пациентов с заболеванием. Пример — ИФА.

Специфичный тест редко дает положительный результат при отсутствии заболевания. Особенно информативен при положительном результате, подтверждая (предположенный) диагноз. Пример — иммуноблот.

Логично использовать для скрининга (быстрого и дешевого тестирования большого числа пациентов) максимально чувствительный вид тестов, а вот для установления диагноза — максимально специфичные методы. Именно поэтому ИФА исторически является скрининговым, а иммуноблотом подтверждается ВИЧ-инфекция.

Важно понимать, что ложные положительные результаты существуют у всех тестов, никакой тест не может давать 100% специфичности! Результаты экспресс-тестов подлежат особой проверке и перепроверке в лабораторных условиях при помощи других методов. Результаты лабораторных ИФА тестов подлежат перепроверке методом иммуноблотинга.

Может ли тест быть ложноположительным?

Да, может. В этом случае в обязательном порядке необходимо сделать проверочный тест иммуноблот, который точно покажет есть у человека ВИЧ или нет.

По каким причинам тест на ВИЧ может быть ложноположительным?

Причин много и все они не известны. Самая частая причина — беременность, также такую вероятность несколько увеличивает недавние вакцинирование некоторыми иммунопрепаратами.

Может ли тест быть ложноотрицательным?

Может, если он сделан в период окна, который длится до 3-х месяцев после риска инфицирования.

Каковы причины ложноотрицательного результата в тесте на ВИЧ?

Ложноотрицательный результат, а точнее существенное удлинение «периода окна», может вызвать начатая очень рано после инфицирования антиретровирусная терапия или постконтактная профилактика, прием средств, подавляющих иммунитет (иммунодепрессантов, например, после пересадки органов и др.), а также некоторые тяжелые заболевания иммунной системы.

Но, нужно понимать, что тесты 4-го поколения определяют не только антитела, но и антиген p24, который является белком вирусной оболочки, т.е. эти тесты определят ВИЧ-инфекцию, даже если антитела по каким-то причинам задерживаются.

Алкоголь, иные психоактивные вещества, любая пища, БАДы, иммуностимуляторы, иммуномодуляторы, антибиотики и любые иные препараты, стресс, полнолуние, созерцание белого коня, усталость, общая болезненность и ослабленный иммунитет, грипп, ангина и прочие заболевания — все это не оказывает значимого влияния на риски ложноотрицательного результата теста на ВИЧ.

Чувствительность тестов на ВИЧ исследована и подтверждена в реальных условиях и на больших выборках, где люди принимают алкоголь, нервничают, принимают самые разные препараты, болеют различными заболеваниями, имеют самые разные отклонения лабораторных параметров.

Я сдавал общий анализ крови (биохимию печени, иммунограмму, липидный профиль), анализы в норме. Означает ли это, что у меня нет ВИЧ-инфекции?

Нет, не означает. Ни по каким анализам, кроме теста на ВИЧ, невозможно ни исключить ни подтвердить ВИЧ-инфекцию.

Я принимаю антибиотики (антидепрессанты, транквилизаторы, настой на мышиных хвостах), будет ли тест достоверен?

Будет. Никакие препараты, кроме препаратов АРТ в качестве постконтактной профилактики не влияют на достоверность теста на ВИЧ.

Я перед сдачей теста выпила стакан пива (бутылку водки, съела два торта, выкурила 5 пачек сигарет, косячок марихуаны), не повлияет ли это на результат теста?

Не повлияет.

Может быть так, что антиген уже связан антителами, а антител еще мало для теста?

Этот феномен описан, но это весьма короткоживущий феномен, по сути это точка пересечения двух условных кривых, никто вам не скажет, это часы или десятки минут, но точно не многие дни, скорее следует предполагать как максимум (предположение, для утверждения не достаточно данных) 1-2 суток. И в любом случае этот феномен, если и возникает, то находится там, где мы вообще из осторожности не говорим о полной достоверности тестирования, т.е. внутри первых 4-6 недель, и с очень высокой долей вероятности этот период внутри еще более короткого промежутка — в пределах первых двух недель, т.е. мы как бы укладываем оба окна одно в другое. Плюс, по всей видимости, есть некоторые условия, которые хоть сколько то значимыми делают вероятность «подловить» это самое второе окно — исходные иммунодефицитные состояния, например, связанные с возрастом.

Если бы доминирующие ИФА системы отдельно показывали срабатывание At или Ag линии, то мы бы знали (т.е. мы и так это знаем, но вот имели бы статистику по этому поводу), что за редким исключением выявление ВИЧ происходит по At линии, а если бы мы неким волшебным образом знали дату инфицирования, то мы бы знали, что за редким исключением мы выявляем довольно поздно, спустя многие месяцы и годы. В отдельных группах риска под влияем активных действий ситуация может чуть смещаться в сторону более раннего выявления, но это все не меняет погоды по большому счету. Т.е. реальных практических рисков феномен второго окна не несет — любой врач будет рекомендовать и принимать во внимание тестирование на тех сроках, когда с очень высокой вероятностью будет антитела в достаточных для детекции количествах.

А какие подтипы выявляет ИФА? Что если я заразился редким подтипом и тест его не видит?

Нет, такого не бывает. Современные скрининговые ИФА-системы выявят любой подтип из группы M и O. Представителей групп N и P зарегистрировано единичное число, их очень непросто найти даже в Камеруне, где их число чуть больше ноля, и измеряется единицами. Как только, с точки зрения эпидпроцесса, распространенность группы превысит хотя бы сотые доли процента, и будут обнаружены в за пределами африканской глуши хотя бы единичные пациенты, то и тест-системы официально подтянутся, вслед за нуждами — будут проведены широкие исследования и появятся группы и подтипы в технических характеристиках систем, то, что их нет там сегодня означает лишь то, что их нет официально. На данный момент рассматривать подобные сценарии нет смысла.

В 2006 году их было известно десять камерунцев с группой N, но спустя 5 лет, после тщательных просеиваний тысяч камерунцев нашли еще… четыре.

По разным оценкам от 400 до 800 тысяч камерунцев живут с ВИЧ, и мы знаем, что возможно до 0,1% являются носителями группы N. Т.е. от 400 до 800 человек на планете.

Важно: все редкие группы и подтипы ВИЧ были выявлены исходно обычным методом ИФА. То, что в технических характеристиках систем не указаны эти подтипы, говорит лишь об одно — число пациентов слишком мало, чтобы можно было бы провести стандартные исследования, для которых требуется не несколько случаев, а сотни, и официально утвердить у регулятора новые строчки в инструкции.

Я слышала, что методом ИФА ВИЧ-2 выявляется позднее, это так?

В данном случае это не имеет значения, антитела выходит на уровень достаточный для детекции примерно в одни и те же временные рамках, общие перестраховочные сроки 6-8 недель от опасного контакта «накрывают» и ситуации с ВИЧ-1 и с ВИЧ-2.

Аптечные ИФА экспресс-тесты достаточно надежны?

Экспресс-тесты на антитела к ВИЧ в США одобрены с 2002 года, в том числе ультрабыстрые тесты, чувствительность таких тестов от 93% и специфичность — от 99%. Одобренный и доступный в РФ экспресс-тест Alere Determine HIV ½ Ag/Ab Combo, значительно уступает по способности к обнаружению антигена р24 ВИЧ по сравнению с коммерческими лабораторными системами 4 поколения.

Следует учитывать, что экспресс-тесты значительно чаще лабораторных дают ложный положительный результат. Положительный прогностический результат для РФ у экспресс-тестов будет примерно 50 на 50, т.е. если экспресс-тест дает положительный результат, то в среднем, т.е. для групп низкого риска, вероятность в данном случае наличия ВИЧ-инфекции лишь 50%, и любой положительный результат обязательно требует перепроверки методом ИФА в условиях лаборатории.

Можно ли применять ПЦР РНК или ДНК ВИЧ для скрининга на ВИЧ?

Да, можно. но не не рекомендуется. Хотя за последнее десятилетие метод стал значительно дешевле и точнее, но все же он до сих пор и дорог, более длительный, и технически сложен, что предполагает большие риски ошибок. В России, так же впрочем, как и США, количественный метод ПЦР не рекомендован для скрининга и диагностики ВИЧ-инфекции в обычных случаях.

Чем отличается ПЦР ДНК от ПЦР РНК ВИЧ?

РНК обычно используется в количественных тестах для оценки вирусной нагрузки у диагностированных лиц, например для оценки эффективности терапии. ДНК — в мононуклеарных клетках, например для диагностики у детей, там, где антитела к ВИЧ матерей мешает использовать метод ИФА. И тот и другой тест могут быть и количественными и качественными. И тот и другой можно в узких случаях применить как диагностический, с учетом конкретных ограничений, которые накладывают технические параметры системы.

Источник: coinfection.net

Общая информация

Иммуноблот – что это такое? Для того чтобы распознать у человека ВИЧ-инфекцию, необходимо пройти метод лабораторного исследования сыворотки крови на присутствие антител. Методику иммуноблоттинга еще называют вестерн-блот (western blot). Ее используют для обнаружения вирусных инфекций человека, как дополнительный экспертный способ. Он необходим для подтверждения ИФА – лабораторного исследования, позволяющего определить в крови наличие ВИЧ-антител. Иммуноблоттингом перепроверяют положительный анализ ИФА. Он считается наиболее чувствительным, сложным и дорогим.

Тестирование в домашних условиях

Наиболее часто неверные показатели анализа обнаруживаются при проведении домашнего тестирования. Получается ложноположительный результат на ВИЧ по причине большого количества ошибок, в результате чего складывается неверное представление о действительном состоянии организма. Ошибочный итог может быть следствием нескольких причин:

  1. Нарушение правил хранения тест–системы;
  2. Нестерильность материала;
  3. Неверное количество крови для анализа;
  4. Наличие других факторов (состояние здоровья, особенности питания, вредные привычки).

Домашний тест на ВИЧ удобен тем, что дает возможность сохранить анонимность — не каждый человек готов предоставлять свои данные из–за опасения разглашения информации в случае обнаружения инфицирования. Но, как показывает практика, выполнение теста дома дает самый большой процент ложноположительного результата на ВИЧ.

Отчасти в этом виноваты сами «авторы» процедуры либо по собственной халатности, либо по незнанию правил подготовки к анализу и особенностей выполнения тестирования. Достаточно часто ложный показатель выдают просроченные ВИЧ–тесты.

Предназначение

Что это такое – иммуноблот? Это методика лабораторного исследования сыворотки крови на наличие антител к вирусу. Во время проведения исследования специалист предварительно разделяет белки вируса в геле и переносит их на нитроцеллюлозную мембрану. Предназначена процедура иммуноблоттинга для определения ВИЧ на разных стадиях. На первом этапе очищенный вирус от составных частей подвергают электрофорезу, а антигены, входящие в его состав, разделяют по молекулярному весу.

Вирус иммунодефицита человека размножается в живой клетке, встраивая в нее свою генетическую информацию. На этом этапе человек становится носителем вируса ВИЧ, если был заражен. Специфика заболевания в том, что оно долгое время может никак себя не проявлять. Вирус разрушает лимфоциты, поэтому иммунитет человека снижается, и организм становится неспособным противостоять инфекциям. Если ВИЧ грамотно и вовремя лечить, пациент проживет до глубокой старости. Отсутствие терапии неминуемо приводит к летальному исходу. С момента инфицирования, но без лечения, максимальный срок жизни составляет не более десяти лет.

Типичные ошибки при диагностике ВИЧ инфекции

Забор биологического материала, доставка и оформление материалов, используемых при проведении лабораторной диагностики, должны соответствовать следующим правилам:

  1. Сопроводительная документация оформляется с указанием наименования тест-системы, ее срока годности и серии.
  2. Полностью указаны паспортные данные обследуемого, дата, место забора биологического материала.
  3. Сыворотка хранится не дольше установленного срока, для исследования берется допустимый объем биоптатат – не меньше 2-5 мл.
  4. Номер на флаконе соответствует указанному номеру в направлении.
  5. Забор биологического материала происходит по установленным правилам, а именно, из локтевой вены. В составе исследуемой крови не должно быть сгустков.

Для забора материала используется сухая пробирка. У новорожденных часто берут пуповинную кровь, указывая о таком факте в направлении.

Типичная ошибка врачей – хранение полученного материала дольше 12 часов при комнатной температуре и дольше 1 дня при температуре 4-8 градусов выше по Цельсию. За счет наступающего гемолиза искажаются результаты диагностического мероприятия.

Итак, к типичным ошибкам во время проведения диагностики ВИЧ-инфекции относят:

  • неправильный забор биологического материала;
  • неправильное хранение биоптата;
  • неправильная транспортировка диагностических систем;
  • длительное хранение тест-системы.

На результат влияет даже качество воды, используемой для промывания тары, в которую помещают биологический материал.

После получения результатов исследования лабораторный работник должен выдать для врача заключение. Если диагностика проводилась в «период окна», он назначает повторное проведение диагностики спустя определенное время. В любом случае, чтобы поставить диагноз «ВИЧ-инфекция», одного иммуноблота недостаточно. Необходима комплексная диагностика.

Особенности

Иммуноблот анализ – достоверный метод, который позволяет определить наличие антител к антигенам ВИЧ первого и второго типа. Если человек инфицирован, уже через две недели появляются антитела, которые могут обнаруживаться и намного позднее. Особенность ВИЧ в том, что количество антител быстро увеличивается и сохраняется в крови больного. Даже если они присутствуют, болезнь может не проявлять себя в течение двух и более лет. Метод ИФА не всегда точно определяет наличие заболевания, поэтому требуется подтверждение результатов с помощью иммуноблоттинга и ПЦР, если иммуноферментный анализ показал положительный результат.

Сроки определения противотрепонемных антител

Нужно знать, что ни один, даже самый точный метод, в том числе, иммуноблот, не позволит получить точных данных, если заражение сифилисом произошло несколько дней назад. Обусловлено это тем, что болезнетворные микроорганизмы находятся в инкубационном периоде на ранних этапах внедрения в организм, соответственно, иммунная система в указанные сроки не начинает продуцировать антитела, выявляемые в ходе проведения иммуноблота.

  • Продуцирование организмом антител IgM для борьбы с проникшей в организм сифилитической инфекцией начинается в период с седьмого по четырнадцатый день заражения сифилисом. Но вероятность обнаружения их в это время даже посредством высокоточных анализов крайне мала. Максимальной концентрации уровень антител достигает в период с шестой по девятую неделю инфицирования.
  • Полное исчезновение выявляемых анализом IgM происходит через три – шесть месяцев после курса терапевтического лечения. Если больной не получал лечение, подобное наблюдается через год – полтора после внедрения в организм сифилитической инфекции. Выявление антител возможно при первичном и вторичном периоде заболевания. При этом определение может быть исключено в том случае, если сифилис протекает в скрытой форме. Появление IgM после полного исчезновения говорит о повторном заражении или низкой эффективности лечения.
  • Выработка организмом специфических антител, отнесенных к классу IgG, начинается примерно через четыре – пять недель с момента внедрения бледной трепонемы в организм. В отличие от IgM, концентрация IgG постоянно увеличивается, достигая максимальной величины к двенадцати – двадцати четырем месяцам после инфицирования и сохраняясь на протяжении нескольких лет или всей жизни даже при условии успешного лечения.

Показания к назначению

Что это такое «иммуноблот» уже выяснили, но кому назначают данное исследование? Поводом сдать анализы на вирус иммунодефицита человека (ВИЧ) методом иммуноблоттинга становится положительный результат ИФА. Необходимо пройти через иммуноферментный анализ пациентам, которые будут оперироваться. Кроме этого, следует сделать анализ женщинам, планирующим беременность, а также всем, кто ведет беспорядочную половую жизнь. Назначают иммуноблоттинг пациентам с ВИЧ, если результаты ИФА вызывают сомнения. Поводом для обращения к врачу могут стать следующие тревожные симптомы:

  • резкое похудение;
  • слабость, потеря работоспособности;
  • расстройство кишечника (диарея), которое продолжается в течение трех недель;
  • обезвоживание организма;
  • лихорадка;
  • увеличение лимфатических узлов на теле;
  • развитие кандидоза, туберкулеза, пневмонии, токсоплазмоза, обострение герпеса.

Пациенту не нужно подготавливаться перед сдачей венозной крови. За 8-10 часов до исследования нельзя принимать пищу. Не рекомендуется за сутки до сдачи крови употреблять алкогольные и кофейные напитки, заниматься тяжелыми физическими упражнениями, испытывать волнение.

Стоимость

Сколько стоит анализ? Иммуноблот на ВИЧ не относится к дешевым исследованиям. В среднем, скрининговое обследование иммуноферментными методами стоит от 500 до 900 рублей. Иммуноблоттинг – это верификационное исследование, стоимость которого составляет от трех до пяти тысяч рублей. Более сложные методы стоят намного дороже. Например, за анализ полимеразной цепной реакции (ПЦР) нужно будет заплатить около 12000 рублей.

вич ифа иммуноблот
Смотреть галерею

Как проводится исследование?

Как проводят анализ ИФА? Иммуноблот положительный/отрицательный подтверждает или опровергает результаты иммуноферментного анализа. Процедура исследования достаточно простая. Специалист проводит забор венозной крови, по времени это занимает не более пяти минут. После взятия проб место укола следует дезинфицировать и заклеить пластырем. Забор проводят натощак, поэтому после процедуры не помешает съесть плитку горького шоколада или выпить сладкий горячий напиток.

Для того чтобы получить направление на бесплатный анализ в государственном медицинском учреждении, необходимо посетить врача-терапевта. В целом, иммуноблот не отличается от других исследований крови по способу забора. Методика исследования простая. Если в крови человека присутствует вирус, организм для его разрушения начинает вырабатывать антитела. Для каждого вируса существует свой набор белков-антигенов. Выявление этих антител и есть основа методики иммуноблоттинга.

Чтобы не стать заложником ложноположительного анализа

Анализ ИФА необходимо провести после сомнительного контакта через 6-12 недель. В этот период обнаруживаются антитела вируса иммунодефицита человека. В этом случае на 70% ложноположительный анализ можно исключить.

Перед сдачей крови на ВИЧ (ИФА) нужно не нарушать диету, не употреблять алкоголь, наркотики и не жить половой жизнью хотя бы за 2-3 недели до сдачи анализа на ВИЧ. Кровь сдается только натощак. Сколько врач возьмет крови, и сколько стоит анализ, а также срок годности анализа можно узнать непосредственно в медицинском центре. При имеющихся вирусных или инфекционных заболеваниях лучше анализ не сдавать, необходимо обратиться в лабораторию через 35-40 дней после выздоровления. При наличии других хронических заболеваний, следует сообщить врачу.

Даже если анализ оказался положительным, не нужно впадать в панику, возможно, он ложноположительный. Сколько месяцев должно пройти после первой сдачи?

Через 3-4 месяца анализ ИФА уже можно пересдать. У человека, в крови которого нет вируса иммунодефицита, результат будет гарантированно отрицательным.

Многих людей интересует вопрос о том, сколько живет ВИЧ? Вирус иммунодефицита человека, попадая на воздух, гибнет практически мгновенно. Погибает он при температуре выше 40°C. Поэтому если бы можно было подогреть кровь человека до такой температуры, ВИЧ был бы побежден, и не умирало бы столько людей, сколько на сегодняшний день погибает от вируса.

Трактовка результата

Самые распространенные методы диагностики инфекции ВИЧ – это иммуноферментный анализ и иммуноблот. Они ипользуются для определения в сыворотки крови антител к вирусу иммунодефицита. Наличие инфекции обычно подтверждают двумя тестами: скрининговым и подтверждающим. Интерпретация результатов исследования должна проводиться врачом, он же ставит диагноз и назначает лечение. Если иммуноблот положительный, это означает, что в организме человека присутствует вирус.

Положительный результат не должен стать поводом для самостоятельного лечения, так как у каждого пациента может быть своя картина заболевания. Качественный анализ включает скрининговый и вертификационный. Если у пациента не обнаружен вирус, то в результате указывают «отрицательно». При обнаружении методом скрининга проводят дополнительное вертификационное исследование. Иммуноблот – это анализ, который подтверждает или опровергает скрининг. Если на тест-полоске появляются потемнения на определенных участках (места локализации белков), ставят диагноз «ВИЧ». Если результаты вызывают сомнения, анализы проводят в течение трех месяцев.

Не допустить заражение вирусом иммунодефицита можно, если соблюдать определенные правила: избегайте случайных половых связей, используйте презерватив во время контактов, не принимайте наркотики. Если болезнь обнаружена у беременной женщины, важно четко соблюдать рекомендации лечащего врача, не забывать проходить обследования на предмет наличия вируса.

Линейный метод

Принцип иммуноблоттинга включает:

  1. Использование нативного вирусного вещества ВИЧ-формат или антигенов в формате Western -Blot.
  2. Соединение белков ВИЧ с отдельными антителами, выявленными в сыворотке крови.
  3. Процесс инкубации, происходящий с добавлением меченных антител к человеческим Ig.
  4. Расшифровку окрашенных полос.

Анализ позволяет врачу своевременно провести интерпретацию результатов исследования. Положительный блот расшифровывают как 2ENV+/- GAG+/POL, неопределенный — 1 ENV+/- GAG+/POL. Отрицательный результат предусматривает отсутствие полос.

Для выполнения анализа применяют рекомбинантный и лизатный иммуноблот. Исследование является специфичным и составляет 99,5%.

Может ли результат анализа быть расшифрован как ложный, интересуются больные. Полученные данные могут быть сформированы в результате стимуляции защитных сил организма (беременности, гемодиализа). При подозрении на острый ретровирусный синдром и контакт с больным ВИЧ-инфекцией пациенту рекомендуют сдать сыворотку на реакцию ПЦР. Повторное серологическое исследование подтверждается путем измерения вирусной нагрузки в представленном образе биологического материала.

Частые вопросы

Какие стадии включает иммуноблот?

  1. Подготовка стрипа.Предварительно очищенный и разрушенный до составных компонентов вирус иммунодефицита (ВИЧ) подвергается электрофорезу, при этом входящие в состав ВИЧ антигены разделяются по молекулярному весу. Затем методом блоттинга (аналог выдавливания на «промокашку» избытка чернил) антигены переносят на полоску нитроцеллюлозы, которая отныне содержит невидимый пока глазом спектр антигенных полос, характерный для ВИЧ.
  2. Исследование пробы.На нитроцеллюлозную полоску наносится исследуемый материал (сыворотка, плазма крови пациента и т.п.), и если в пробе есть специфические антитела, то они связываются со строго соответствующими им (комплиментарными) антигенными полосами. В результате последующих манипуляций результат этого взаимодействия визуализируется – делается видимым.
  3. Трактовка результата.Наличие полос в на определённых участках нитроцеллюлозной пластины подтверждает присутствие в исследованной сыворотке антител к строго определённым антигенам ВИЧ.
  • Полоска А – Положительный контроль
  • Полоска В – Слабоположительный контроль
  • Полоска С – Отрицательный контроль
  • Полоска D – Положительный образец (обнаружено присутствие антител к ВИЧ-1)

Источник: xn—-7sbbabkwnixgwr4a5a.xn--p1ai


You May Also Like

About the Author: admind

Добавить комментарий

Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *

Этот сайт использует Akismet для борьбы со спамом. Узнайте, как обрабатываются ваши данные комментариев.