Проведение реакции вассермана rw


Анализ крови на сифилис – RW-методика

RW-анализ крови на сифилис, также известный, как реакция Вассермана, применяется уже более ста лет и не думает сдавать завоеванные позиции. В плане эффективности данная методика, отличающаяся крайней простотой и в то же время высоким уровнем надежности, не имеет себе равных. Все современные тесты, разработанные с целью диагностики сифилиса на ранней стадии развития болезни, в той или иной мере воспроизводят классическую реакцию Вассермана. И все же, как бы производители подобных анализаторов ни старались, полностью заменить изобретение, которое получило широкое распространение по всему миру и спасло миллионы жизней, они пока не могут, а вот дополнить исследование, подтвердить уже полученные данные им вполне под силу.


Описание методики

Что представляет собой RW-анализ? Дело в том, что столкнувшись с подобным «врагом», организм начинает вырабатывать антитела, которые обезоруживают трепонему за счет реакции связывания комплемента (РСК). Эти антитела, образующие устойчивое соединение с возбудителем сифилиса, постоянно присутствуют в крови и спинномозговой жидкости зараженного человека, однако обнаружить их не так-то просто. Здесь и приходит на помощь реакция Вассермана.

Поэтапное описание анализа выглядит следующим образом:

  1. Пациенту вводят препарат с кардиолипином с целью провоцирования РСК.
  2. Следом за «провокатором» в дело вступает гемолитическая система, запускающая процесс гемолиза.
  3. Сформировавшиеся комплексы нейтрализуются с помощью комплемента.

Если человек болен сифилисом, в его крови и спинномозговой жидкости сразу же после ввода «провокатора» начинают формироваться соединения «антиген-антитело», которые без проблем идентифицируются специалистами-лаборантами. Процесс прекращается тогда, когда иссякает кардиолипин, который вводят в строго ограниченном объеме. Далее в дело вступает комплемент, обезвреживающий образовавшиеся соединения. После того, как данное вещество выполнит свою задачу, специалисты, проводящие исследование, заполняют таблицу, где указывают, с какой скоростью протекала РСК и сколько комплексов образовалось за отведенный промежуток времени. Интенсивность реакции оценивается по шкале от (+) до (++++). От полученных результатов зависит, как и чем будут лечить пациента и то, сколько времени это займет.

Если человек здоров, кардиолипин нейтрализуется еще на стадии введения гемолитической системы. Ввиду отсутствия в крови и спинномозговой жидкости пациента специфических антител, введенный ранее антиген не образует комплексы, а вступает в реакцию гемолиза, вследствие чего его активность довольно быстро сходит на нет.


Катализатор реакции Вассермана, как делают RW анализ

В роли катализатора реакции Вассермана выступает препарат, в состав которого входят три вещества:

  1. Антиген бледной трепонемы, получаемый путем обработки возбудителя болезни ультразвуком либо посредством многоуровневой очистки спиртового липидного экстракта, извлеченного из мышечных волокон бычьего сердца (во втором случае к антигену добавляют лецитин, фосфолипид и холестерин, призванные усилить реакцию).
  2. Гемолитическая система на основе гемолитической сыворотки из крови кролика и осла, иммунизированной эритроцитами барана в возрасте от одного года до четырех лет.
  3. Комплемент, изготовленный из кровяной сыворотки морских свинок.

Указанные компоненты смешиваются в равном количестве (по двадцать пять или пятьдесят миллилитров), после чего готовый препарат используют по назначению.

Как подготовиться к анализу крови RW на сифилис

Материал для исследования берется из локтевой вены в объеме, равном девяти-десяти миллилитрам.


детей в возрасте до года кровь берут из пятки, предварительно надрезав кожу и ткани в указанной области специальным скальпелем. Полученный материал направляют в лабораторию в тот же день. Если по какой-либо причине этого сделать не удалось, пробирку помещают в камеру с определенным температурным режимом, где материал хранится до следующего дня. Кровь сохраняет свои свойства в течение двух суток: по истечении указанного срока толку от нее уже не будет – придется сдавать ее повторно.

Реакция Вассермана, анализ крови на сифилис

При наличии следующих обстоятельств забор крови не осуществляется:

  1. повышенная температура тела;
  2. критические дни;
  3. период восстановления после недавно перенесенной болезни инфекционного характера;
  4. предстоящие роды и послеродовый период;
  5. употребление алкоголя накануне процедуры;
  6. возраст ребенка менее двух недель.

При отсутствии противопоказаний забор крови осуществляется в плановом режиме. Из полученного материала изготавливают сыворотку, которую затем используют для анализа. Происходит это следующим образом:

  1. Извлеченную из вены пациента кровь помещают в термостат, внутри которого поддерживается температура в 37 ºС.

  2. Когда кровь загустеет (данный процесс занимает от пятнадцати минут до получаса), в дело вступает центрифуга, совершающая около тысячи оборотов в минуту.
  3. Примерно через пятнадцать минут непрерывной работы центрифуги над кровяным сгустком появляется прозрачная жидкость – кровяная сыворотка – которую извлекают для дальнейших исследований. Если в сыворотке обнаруживаются эритроциты, жидкость помещают обратно в центрифугу.
  4. Очищенная от эритроцитов сыворотка инактивируется при температуре 55-57 ºС (данный процесс занимает в среднем полчаса).

Инактивированную сыворотку, лишенную естественного комплемента, используют по назначению либо помещают в холодильник, где она хранится несколько дней (но не более недели).

Как проводят анализ крови на сифилис, как делают реакцию Вассермана

Исследование крови на сифилис осуществляется следующим образом:

  1. Три пробирки заполняют кровяной сывороткой, разбавленной раствором натрия хлорида.
  2. В первую пробирку добавляют двадцать пять миллилитров антигена, во вторую – аналогичное количество кардиолипина, в третью (контрольную) доливают раствор хлорида натрия.
  3. Во все пробирки добавляют комплемент.

Чтобы результаты анализа оказались максимально точными, заранее компоненты не смешивают. Далее происходит следующее:

  1. Пробирки помещают в термостат, поддерживающий температуру 36-38 ºС (первичная инкубация).
  2. Через сорок-пятьдесят минут в подогретую жидкость вводят гемолитический состав в объеме, не превышающем пяти миллилитров, после чего интенсивно встряхивают пробирки.
  3. Сосуды помещают обратно в термостат.

После введения гемолитической системы в пробирках начинается реакция, за которой внимательно следят специалисты-лаборанты. Окончательный вердикт выносится после сравнения полученных данных с контрольными образцами – дополнительными пробирками, одна из которых заполнена кровью, инфицированной бледной трепонемой, а другая – чистой кровью.

Реакция Вассермана, анализ крови на сифилис

Исследование спинномозговой жидкости, что такое, как делают

RW-методика допускает использование вместо крови спинномозговой жидкости, которую также разливают по трем пробиркам: в первую наливают неразбавленную субстанцию, во-вторую – смешанные в равных пропорциях спинномозговой состав и раствор хлорида натрия, в третью – жидкость, разведенную раствором хлорида натрия в соотношении 1:5. Дальнейшие действия уже известны: что кровь, что спинномозговая жидкость подвергаются одним и тем же манипуляциям, которые были подробно описаны в предыдущем разделе статьи.

Расшифровка результатов анализов

Об отсутствии в крови возбудителей болезни свидетельствует реакция гемолиза, начавшаяся сразу же после введения в состав гемолитической системы. Подобный результат говорит о том, что в крови пациента нет антител к бледной трепонеме, следовательно, человек полностью здоров.

Если же реакция гемолиза началась с задержкой либо полностью отсутствует, значит, заражение все-таки произошло. В этом случае стадия болезни и степень ее проявления оцениваются, исходя из следующих показателей:


  1. (+) – начальная стадия болезни (признак – незначительная задержка в реакции гемолиза);
  2. (++) – легкая форма болезни (признак – слабоположительная реакция или частичная задержка гемолиза);
  3. (+++) – прогрессирующая форма болезни (признак – положительная реакция или продолжительная пауза перед началом гемолиза);
  4. (++++) – тяжелая (запущенная) форма болезни (признак – резко положительная реакция или полное отсутствие гемолиза).

Иногда в медицинском заключении указывается так называемая сомнительная реакция, обозначаемая в виде (+/-). Наличие подобной отметки говорит о том, что результаты анализа оказались неточными, поэтому желательно его повторить через какое-то время.

Степень погрешности, насколько точны результаты анализа на сифилис

Примерно у каждого двадцатого человека, не имеющего проблем со здоровьем, возможен ложноположительный результат, у каждого четвертого зараженного сифилисом – ложноотрицательный (обычно такое наблюдается на начальной стадии развития болезни, по мере прогрессирования недуга вероятность ошибки снижается).

В подавляющем большинстве случаев возникновение ложноположительной реакции оказывается обусловлено:


  1. употреблением спиртных напитков или жирной пищи накануне или в день забора крови на анализ;
  2. беременностью;
  3. наличием туберкулеза или патологии соединительных тканей системного характера;
  4. воспалением легких;
  5. злокачественным процессом, протекающим в организме;
  6. проблемами с печенью;
  7. малярией;
  8. наличием в организме паразитов;
  9. скарлатиной;
  10. высоким уровнем сахара в крови;
  11. брюшным тифом;
  12. лептоспирозом;
  13. критическими днями.

В случае выявления одного из указанных факторов, влияющих на результаты исследования, рекомендована повторная сдача анализа. Также процедуру следует повторить тем, кто после прохождения курса лечения столкнулся с таким явлением, как синдром серорезистентного сифилиса, проявляющийся в виде отрицательной реакции Вассермана при фактическом наличии в крови антител к бледной трепонеме.

Дополнительное обследование. В случае если результаты RW-анализа оказались неточными, специалисты советуют прибегнуть к усовершенствованному аналогу реакции Вассермана – тесту RPR, дополненному трепонемными тестами РПГА. Этот вид исследования, быстро набирающий популярность, отличается довольно высокой точностью. В качестве единственно верного источника информации его рассматривать, конечно, нельзя, а вот в качестве дополнительного – не только можно, но и нужно.

Источник: womanchoise.ru

Источник: vpahu.com

Реакция вассермана. Что это


Суть RW заключается в том, что кровь больного сифилисом, при добавлении в нее специального белка-агрессора, способна образовывать с ним комплексы, абсорбирующие комплемент, которые будут выпадать в осадок.

Как проводится исследование крови по Вассерману

По сути, реакция Вассермана объясняется наличием в белой трепонеме кардиолипина. Это антиген, который стимулирует синтез антител, которые выявляются в крови при помощи RW.

То есть, к сыворотке крови пациента присоединяют искусственный аналог трепонемы (кардиолипиновый антиген) и специальный связывающий белок (комплимент). Если в крови присутствуют антитела (специфические белки защитники) к бледной трепонеме, то происходит связывание кардиолипинового антигена и этих антител при участии комплемента. Полученное соединение выпадает в осадок, оцениваемый как ++++.

В норме, в сыворотке здоровых людей происходит гемолиз эритроцитов. То есть, в крови нет антител, с которыми могут реагировать кардиолипиновый антиген, а, следовательно, в сыворотке не происходит реакции адсорбирования и связывания комплемента. Свободный комплемент участвует в гемолизе, появление которого оценивается как отрицательная реакция Вассермана, то есть “-“.

Анализ крови на реакцию Вассермана имеет пять вариантов ответа:


  • – (свидетельствует о том, что в сыворотке произошел полный гемолиз эритроцитов, а значит, анализ на сифилис отрицателен);
  • + (такой ответ трактуется как сомнительный, одним + оценивают слабовыраженную задержку гемолиза);
  • ++ (наблюдается при частичной задержке гемолиза и расценивается как слабоположительная реакция Вассермана);
  • +++ (такой результат расценивается как положительная RW, свидетельствующая о значительной задержке гемолиза);
  • ++++ (резко положительная RW, полное отсутствие гемолиза и выпадение осадка говорит о наличии у пациента сифилиса или других заболеваний, ставших причиной получения ложноположительной RW).

Первый ответ свидетельствует об отрицательной RW и не требует дальнейших исследований. При получении других результатов, следует учитывать, что реакция Вассермана не является высокоточной и специфичной.

В связи с этим, при получении сомнительных, слабоположительных и резко положительных реакций Вассермана, для уточнения диагноза проводят трепонемные тесты.

Ложноположительные результаты могут быть связаны с употреблением жирной пищи, спиртных напитков, беременностью, менструацией, малярией, системной красной волчанкой и т.д.

Современное понимание реакции Вассермана

анализ крови по Вассерману   В современных лабораториях «классическая» реакция Вассермана считается устаревшей и не используется. Однако в листе ответов и бланке назначений все равно часто пишут RW.


В настоящее время под этим термином подразумевают модифицированные современные RW.

Наиболее распространенный аналог реакции Вассермана – это RРR (неспецифический антифосфолипидный тест). Он также относится к нетрепонемным тестам (то есть не обладает высокой специфичностью), однако более чувствителен и имеет меньший риск ложноположительных результатов, чем классическая реакция Вассермана.

Тест RРR является скрининговым исследованием, позволяющим обнаружить антитела (IgG и IgM) к кардиолипину.

Для проведения анализа, также, как и для классической реакции Вассермана, применяется венозная кровь.

Анализ желательно сдавать натощак. За час до взятия крови исключается курение. Несмотря на то, что риск ложноположительных результатов при RРR ниже, чем при RW, в идеале, предпочтительно не употреблять накануне анализа спиртные напитки и жирную пищу.

Где сдавать кровь и сколько стоит обследование

Обследование на сифилис можно пройти как в кожно-венерологическом диспансере (бесплатно), так и в частной клинике (или лаборатории).

Также, может использоваться специфический трепонемный тест (РПГА или ИФА IgG/IgМ на сифилис). Этот тест обнаруживает в крови специфические антитела исключительно к бледной трепонеме, поэтому может применяться для уточнения результатов после проведения нетрепонемных тестов. Его стоимость составляет от 320 до 380 рублей.

Показания к исследованию

показания к исследованию   Положительная RPR может выявляться уже через семь – десять суток после появления у пациента первичного сифилитического шанкра или через три-пять недель после заражения.

Реакция Вассермана обладает чувствительностью от 70 до 80% при диагностике первичного сифилиса и практически стопроцентной чувствительностью при раннем латентном и вторичном сифилисе.

После наступления вторичной стадии, титры начинаю снижаться. Следует учитывать, что около тридцати процентов позднего сифилиса может быть ложноотрицательным по RPR.

Поэтому проведение трепонемных тестов, с целью уточнения диагноза, является обязательным.

Однако, реакция Вассермана (RPR) может эффективно применяться для контроля проводимого лечения сифилиса.

Основными показаниями к проведению анализа служат:

  • случайные половые связи;
  • употребление наркотиков;
  • контакт с больным сифилисом;
  • подозрение на сифилис (наиболее специфично появление твердого шанкра);
  • контроль лечения сифилиса;
  • беременность, донорство, работа в медицинских учреждениях (входит в список стандартных обследований);
  • расстройства психики и поражения нервной системы (нейросифилис).

Также, обязательному обследованию подлежат дети, рожденные от инфицированных матерей.

Анализ при беременности

Классическая реакция Вассермана при беременности часто давала ложноположительные результаты. Новые тесты (RРR) реже дают подобные погрешности. Однако, учитывая, что некоторые заболевания также могут стать причиной возникновения ложноположительных результатов, при получении положительного ответа следует выполнить ИФА или РПГА.

Ложноположительная реакция Вассермана. Причины

Чаще всего ложноположительная реакция Вассермана выявляется у пациентов с:ложноположительная реакция Вассермана

  • СД (сахарный диабет);
  • туберкулезом;
  • злокачественными новообразованиями;
  • аутоиммунными патологиями (системное поражение соединительной ткани);
  • вирусными гепатитами;
  • энтеровирусной инфекцией;
  • тяжелой пневмонией;
  • инфекционным мононуклеозом;
  • скарлатиной;
  • малярией;
  • подагрой;
  • алкоголизмом;
  • антифосфолипидным синдромом (при исключенном до этого (при помощи трепонемного теста) сифилисе, RW может применяться с целью подтверждения этого синдрома);
  • эозинофильным инфильтратом в легких.

Также, ложноположительные результаты возможны у детей на седьмой-десятый день жизни, беременных, пациентов после вакцинации и носителей несифилитических трепонем. У лиц, принимающих наркотические средства, реакция Вассермана также будет ложноположительной.

Еще следует учитывать, что при очень высоком титре сифилитических антител могут диагностироваться ложноотрицательные результаты.

В связи с этим, RW следует проводить в комплексе, с использованием специфических трепонемных тестов. Чаще всего применяют ИФА или РПГA к Trepоnemа pаllidum IgG/IgМ,

Положительная реакция Вассермана

Положительная RPR наблюдается при сифилисе:

  • первичном (если заражение произошло от одного до трех месяцев назад);
  • вторичном (заражение – более трех месяцев назад);
  • третичном (заражение- более трех лет назад).

Также, положительный ответ может выявляться в течение года после проведенного лечения и при формировании серорезистентности (также после лечения).

При получении отрицательного ответа нельзя исключить раннее серонегативное первичное или позднее третичное заболевание.

Источник: serdcet.ru

Методы диагностики сифилиса

Тесты должны выявить основного возбудителя болезни – treponema pallidum она же бледная трепонема. Для этого натощак делают забор крови для проведения серологического анализа. Такое исследование принято считать основным видом лабораторной диагностики для выявления сифилиса. Самыми распространёнными методами исследования являются:

  • анализ крови на РВ (RW) – анализ Вассермана;
  • РПГА – реакция пассивной гемагглютинации;
  • ИФА – иммуноферментный анализ крови;
  • РИФ – реакция иммунофлюоресценции;
  • RPR – реакция микропреципитации с кардиолипиновым антигеном;
  • РИБТ – реакция иммобилизации бледных трепонем.

Что такое реакция Вассермана

Это лабораторный анализ крови на сифилис, который направлен на определение иммунологической реакции на проникновение возбудителя в организм. В теле человека начинаются характерные процессы при заражении. Возбудитель заболевания содержит антиген кардиолипин. Сыворотка крови пациента из-за присутствия в ней реагинов вступает в реакцию связывания комплемента. В результате получается специфический комплекс с этим антигеном, который и способна выявить РВ.

При заражении сифилисом у человека в крови обязательно будут антитела к бледной трепонеме, что характеризуется как физиологический ответ иммунной системы. При проведении теста к забранной крови добавляется препарат кардиолипином. Если возбудитель сифилиса уже находится в организме, в результате будет виден РСК, которая связывает введенный антиген и антитела. В расшифровке количество знаков «+» указывает на интенсивность образования комплексов или «-» при их отсутствии.

Показания к исследованию

Рекомендуется регулярно проводить общий анализ крови, чтобы вовремя выявлять любые отклонения в организме человека, на ранней стадии постановка реакции позволяет значительно повысить эффективность лечения. Для сдачи сыворотки на RW существуют следующие показания:

  1. При профосмотрах, медицинских обследованиях на регулярной основе у сотрудников торговли, медицины, образования.
  2. Во время беременности. Существует вероятность заражение сифилисом плода в утробе, поэтому важно выявить результат на анализ Вассермана у женщин, которые планируют родить ребенка или уже вынашивают его. Патология способна нанести серьезный вред малышу.
  3. Людям, у которых был длительные контакты с патологией на работе или в быту.
  4. Если человек страдает алкоголизмом или наркоманией.
  5. При срочной госпитализации больного с признаками сифилиса.
  6. После интимной близости без использования контрацептива со случайным человеком.
  7. Обязательно проходят проверку все желающие стать донором крови или спермы.
  8. Если была прервана беременность неестественным путем.
  9. Проводят тест во время и после отбывания срока в местах лишения свободы.
  10. Поводом для проведения РВ становится госпитализация пациента с увеличенными узлами лимфатической системы и повышенной температурой.

Кровь на реакцию Вассермана при беременности

Это первичный тест, который акушер-гинеколог попросит вас сдать. Анализ крови на реакцию Вассермана может быть неточным, потому что состояние женщины в этот период сказывается на результаты. По статистике 32% случаев показывают ложноположительный результат. При наличии «+» в расшифровке необходимо пройти дифференциальную диагностику. Рекомендуется выполнять тест один раз за триместр вне зависимости от наличия или отсутствия полового контакта. Противопоказаний для проведения RW для беременных нет, это стандартный забор материала.

Подготовка

Некоторые тесты требует специфической подготовки перед сдачей. Анализ Вассермана будет максимально достоверным, если за 2 суток до прохождения исследования вы не будете пить любые спиртные напитки (даже слабоалкогольные). Рекомендуется в этот же период не есть жирную пищу, чтобы не исказить результаты. Нельзя во время подготовки к РВ принимать любые препараты наперстянки.

Как проводится процедура

Кровь на реакцию Вассермана проводится только натощак, это важное условие. Последний прием пищи до забора должен быть не позднее, чем за 6 часов. Сотрудник, который проводит манипуляции, садит клиента на стул или укладывает на кушетку. Для анализа требуется 8-10 мл крови ил локтевой вены. Если исследование проводится маленькому ребенку, то взять материал могут из яремной или черепной вены.

Сколько дней делается анализ крови на RW

Есть два этапа проведения исследования материала. Экспресс-тест Вассермана будет готов через 2 часа, но он сможет только подтвердить или опровергнуть наличие антител сифилиса у пациента. Чтобы получить количественную информацию по состоянию крови, концентрацию антител к трепонеме, нужно от 1 до 7 суток. Продолжительность проведения анализа и расшифровки зависит от лаборатории, количества текущих анализов.

Расшифровка

Исследование крови по Вассерману должен расшифровывать только квалифицированный врач. Результаты могут указывать не только на отрицательную или положительную реакцию, но и на промежуточную. Только специалист сможет правильно интерпретировать данные и не пугать раньше времени пациента. Типичный отрицательный результат обозначается знаком «-» и говорит о несомненном отсутствии сифилиса в организме человека.

Положительная реакция

При оценке концентрации антител положительное проявление может отмечаться одним, двумя, тремя или четырьмя плюсами. В расшифровке могут встречаться следующие обозначения:

  1. «+» и «++» — результат указывает на сомнительную, слабоположительную микрореакцию. Необходимо провести дополнительные диагностические анализы и обследование. Можно через некоторое время повторить анализ Августа Вассермана, потому что полной уверенности в отсутствии или наличии сифилиса нет. Причиной такого результата может стать нарушение подготовительных процедур перед сдачей крови.
  2. «+++» — положительная реакция. Дополнительного или повторного подтверждения не требуется, у пациента есть сифилис и должен пройти полное обследование. Женщинам назначают мазок из влагалища или матки, мужчины сдают материал из уретры. Такой результат редко бывает ошибочным, но могут назначить уточняющие анализы, если симптомы больного схожи на другие заболевания.
  3. «++++» — окончательный положительный результат. Высокая интенсивность реакции.
  4. «++++» — окончательная положительная реакция. Полученный результат достоверный на 100% и не требует никаких дополнительных анализов. Диагноз – сифилис.

Ложноположительная реакции Вассермана

Такой ответ может получить абсолютно здоровый человек, происходит это по конкретным причинам. Происходит такая реакция, если у пациента есть острые или хронические стадии заболевания, недавно сделанные прививки или были недавно получены физические травмы. Все эти состояния приводят к активной выработки неспецифического белка в организме, который называют антителами или иммуноглобулином. Анализ RW направлен на выявления эти белков и распознает как сифилитические. Это и становится основой для получения ложноположительного результата.

Причины

Выше было описано, почему при проведении теста на сифилис пациент может получить ложно положительный результат. Вот перечень состояний, который могут к этому привести:

  • инфаркт миокарда;
  • алкогольное, пищевое отравление;
  • острые, хронические патологии печении, гепатит Д, С, В;
  • травмы мягких тканей или костей;
  • возрастные изменения в работе организма больного;
  • туберкулез;
  • болезни аутоиммунного характера.

Источник: sovets.net


You May Also Like

About the Author: admind

Добавить комментарий

Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *

Этот сайт использует Akismet для борьбы со спамом. Узнайте как обрабатываются ваши данные комментариев.