Рпга анализ крови на сифилис


Выявление в сыворотке крови специфических антител к бледной трепонеме (Treponemapallidum), используемое для подтверждения результатов неспецифических тестов на сифилис, скрининга сифилиса, обследования контактных лиц и доноров крови.

Синонимы русские

Люэс, бледная трепонема.

Синонимы английские

Syphilis, passive hemagglutination test; Syphilis, indirect hemagglutination test; Treponema Pallidum Hemaglutination Assay, TPHA.

Метод исследования

Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не курить в течение 30 минут до сдачи крови.

Общая информация об исследовании

Сифилис – инфекция, передающаяся половым путем, возбудителем которой является спирохета Treponema pallidum subspecies pallidum.


падание этой бактерии в организм приводит к развитию иммунного ответа, сопровождающегося выработкой как неспецифических («нетрепонемных»), так и специфических («трепонемных») антител. Выявление антител к T. pallidumсоставляет основу лабораторного подтверждения сифилиса. В зависимости от типа антител, определяемых в реакции, серологические исследования разделяют на неспецифичексие («нетрепонемные») и специфичексие («трепонемные»). Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА) относится к «трепонемным», то есть специфическим в отношении T. pallidum тестам.

РПГА основана на феномене агглютинации эритроцитов, на поверхности которых адсорбированы антигены T. pallidum (реагент РПГА), при добавлении к ним сыворотки больного сифилисом, содержащей специфические антитела к спирохете. Такие антитела появляются в крови пациентов с сифилисом через 2 (IgM) и 4 (IgG) недели после инфицирования. Следует отметить, что этот период может удлиняться до 6 недель. Поэтому чувствительность РПГА в первичном периоде сифилиса несколько уступает чувствительности этого метода во вторичном и третичном периодах и составляет около 86 %. Преимуществом РПГА является высокая специфичность (96-100 %), позволяющая использовать этот анализ в качестве подтверждающего теста после положительного результата какого-либо неспецифического, «нетрепонемного» исследования (например, антикардиолипинового теста, RPR). Чувствительность РПГА во вторичном, третичном периоде сифилиса, а также при скрытом сифилисе составляет 99-100 %.


Чувствительность РПГА и других «трепонемных» тестов превосходит чувствительность неспецифических («нетрепонемных») тестов, таких как микрореакция преципитации (МРП) с кардиолипиновым антигеном. Поэтому в последнее время в качестве скринингового теста на сифилис стали чаще применять «трепонемные» тесты, в том числе РПГА. При положительном результате скринингового исследования на сифилис с помощью РПГА следует провести подтверждающий тест. В этом случае им является любой другой «трепонемный» тест, но не РПГА (например, иммуноферментный анализ).

Как правило, результат РПГА остается положительным даже после лечения сифилиса. Исключение составляет ситуация, когда терапия была проведена в самом начале заболевания. Так как результат сохраняется положительным пожизненно, РПГА не предназначена для дифференциальной диагностики раннего и позднего сифилиса. По этой же причине данное исследование не используют, чтобы оценивать эффективность лечения заболевания.

При добавлении сыворотки больных сифилисом к реагенту РПГА происходит агглютинация (склеивание) и выпадение в осадок эритроцитов. Степень агглютинации зависит от концентрации антител в сыворотке, поэтому РПГА позволяет не только выявить присутствие антител, но и определить их количество. Результат анализа представлен в виде титра антител. Любой положительный титр указывает на возможную инфекцию T. pallidum, однако возможны ложноположительные реакции. Значительно повышенные показатели характерны для вторичного и скрытого раннего сифилиса.


Ложноположительные результаты РПГА наблюдаются в 0,05-2,5 % случаев и чаще всего обусловлены наличием в сыворотке пациента аутоантител (при системных заболеваниях соединительной ткани, например при системной красной волчанке), антител к другим возбудителям, схожим по антигенной структуре с T. pallidum (Borrelia burgdorferi, сапрофитные трепонемы полости рта и гениталий), а также другими физиологическими и патологическими состояниями (беременность, онкологические заболевания, острый инфаркт миокарда). Как правило, титр ложноположительной реакции РПГА низкий. Исключение составляют результаты РПГА у пациентов с диффузными заболеваниями соединительной ткани и злокачественными новообразованиями, когда титр антител может достигать очень высоких значений. Ложноположительные реакции негативируются спонтанно и бесследно в течение 4-6 месяцев (острая ложноположительныя реакция, часто на фоне беременности) или более длительного периода (хроническая ложноположительная реакция).

Учитывая эти особенности, результат РПГА следует интерпретировать с учетом дополнительных анамнестических и лабораторных данных. При подтверждении диагноза «сифилис» необходимо исключить наличие других инфекций, передающихся половым путем, а также обследовать всех половых партнеров и членов семьи пациента.

Для чего используется исследование?

  • Чтобы подтвердить диагноз «сифилис» при положительном результате неспецифического скринингового теста;
  • для скрининга сифилиса;
  • для обследования лиц, находившихся в половом и тесном бытовом контакте с больным сифилисом;
  • для исключения сифилиса у донора крови.

Когда назначается исследование?

При обследовании:

  • пациента с клиническими признаками сифилиса (безболезненный эрозивный или язвенный дефект на твердом основании) и регионарной лимфаденопатии (первичный сифилис), полиморфная кожная сыпь, многоочаговая или диффузная алопеция, сифилитическая лейкодерма (вторичный сифилис), плотноэластический узел с распадом или формированием «сухого» рубца (третичный сифилис);
  • лиц, находившихся в половом и тесном бытовом контакте с больным сифилисом;
  • донора крови;
  • при ежегодном профилактическом обследовании, госпитализации в стационар, оформлении санитарной книжки.

Что означают результаты?

Референсные значения: отрицательно.

Причины положительного результата:

  • первичный, вторичный, третичный, а также скрытый сифилис (приобретенный и врожденный);
  • беременность;
  • ВИЧ-инфекция;
  • гепатиты В и С;
  • употребление инъекционных наркотиков;
  • острый инфаркт миокарда;
  • диффузные заболевания соединительной ткани;
  • возвратный тиф;
  • лептоспироз;
  • клещевой боррелиоз;
  • тропические трепонематозы (фрамбезия, беджель, пинта);
  • воспалительные процессы, обусловленные сапрофитными трепонемами полости рта и гениталий;
  • злокачественные новообразования;
  • обширная травма и переломы;
  • бактериальный эндокардит;
  • туберкулез;
  • инфекционный мононуклеоз;
  • поствакцинальная реакция.

Причины отрицательного результата:

  • отсутствие сифилиса;
  • первые 2-4 недели после инфекции T. pallidum;
  • неправильное взятие материала на исследование.

Что может влиять на результат?

  • Результат анализа может быть ложноотрицательным в течение первых 2-4 (до 6) недель после заражения.

Важные замечания

  • Исследование не позволяет дифференцировать;
    • сифилис (T. pallidum) и другие трепонематозы (T. pallidumsubspeciespertenue, endemicum, carateum);
    • ранний и поздний сифилис.
  • Исследование не предназначено для контроля лечения сифилиса.
  • Результат анализа следует оценивать вместе с дополнительными анамнестическими, лабораторными и инструментальными данными.

Также рекомендуется

  • Сифилис RPR (антикардиолипиновый тест / микрореакция преципитации), титр
  • Treponema pallidum, IgM, титр
  • Treponema pallidum, IgG, титр
  • Treponema pallidum, IgG вликворе
  • Treponema pallidum, антитела

  • HIV 1, 2 Ag/Ab Combo (определение антител к ВИЧ типов 1 и 2 и антигена p24)
  • Вирусный гепатит B. Контроль активности вируса перед началом лечения
  • Вирусный гепатит C. Анализы для первичного выявления заболевания. Обследование контактных лиц
  • Интимный – оптимальный – анализ мазка у мужчин
  • Интимный – оптимальный – анализ мазка у женщин
  • Госпитализация в хирургический стационар
  • Госпитализация в терапевтический стационар

Кто назначает исследование?

Дерматовенеролог, невролог, врач общей практики, эпидемиолог.

Литература

  • French P, Gomberg M, Janier M, Schmidt B, van Voorst Vader P, Young H; IUST. IUSTI: 2008 European Guidelines on the Management of Syphilis. Int J STD AIDS. 2009 May;20(5):300-9.
  • Seña AC, White BL, Sparling PF. Novel Treponema pallidum serologic tests: a paradigm shift in syphilis screening for the 21stcentury. Clin Infect Dis. 2010 Sep 15;51(6):700-8.
  • Luger A. Diagnosis of syphilis. Bull World Health Organ. 1981;59(5):647-54.
  • Holmes K.K. Sexually Transmitted Diseases / K.K. Holmes, P.F. Sparling, W.E. Stamm; 4th ed. — McGraw-Hill, 2008.

Источник: kdlmed.ru

При проведении анализа крови подсчитывается количество склеенных и выпавших в осадок эритроцитов. Результат исследования представляется как уровень титра антител и определяется как:

  • положительный;
  • ложноположительный;
  • отрицательный.

При титре от 1:2 до 1:800 устанавливается подозрение на сифилис, что означает наличие в организме пациента антител к трепонеме. Однако это не указывает на присутствие болезни у человека. На первой стадии развития сифилиса показатели редко достигают уровня в 1:320. Вторая стадия заболевания определяется титрами, немного превышающими показатели в 1:320. При третьей, скрытой стадии болезни, показатели снова могут упасть ниже 1:320. Высокий уровень титра, превышающий показатели в 1:640, обычно выявляется при высокой активности инфекции.

Ложноположительными обычно являются показатели, превышающие значение 1:800. Также неспецифическими или ложноположительными могут быть значения менее 1:640. Подобные ситуации возможны при наличии таких факторов:

  • поствакцинальный период;
  • менструации;
  • беременность;
  • аутоиммунные заболевания;
  • употребление жирной пищи накануне анализа;
  • онкология;
  • перенесенный за прошедшие 6–8 месяцев инфаркт миокарда;
  • любые инфекционные заболевания;
  • туберкулез;
  • хронические патологии работы внутренних органов.

В том случае, когда пациент когда-либо ранее перенес сифилис, анализ РПГА у него будет положительным пожизненно, даже если человек здоров. Потому для уточнения ложноположительных и положительных результатов назначается дополнительное исследование в виде анализов крови РМП или РПР. Если РПР либо РМП отрицательный, то болезнь у пациента отсутствует.


При отрицательной реакции эритроциты не склеиваются в структуру. Такой результат проводимых исследований возможен в том случае, если болезнь у пациента отсутствует. Однако отрицательная реакция может проявиться и тогда, когда кровь для проведения исследования взята неправильно, либо с момента инфицирования прошло не более 4 недель и организм не успел начать выработку антител.

Довольно часто результаты теста записываются с условными обозначениями:

  • 2+;
  • 3+;
  • 4+.

При этом 2+ означает, что наблюдается слабовыраженная реакция теста. Значение 3+ это положительная реакция, а показатель 4+ соответствует титрам с высокими результатами.

Источник: www.baby.ru

Общая характеристика РПГА

РПГА-тест связан с феноменом агглютинации эритроцитов, поверхность которых адсорбирует антиген бледной трепонемы в момент добавления к нему крови сифилитического больного. Организм начинает синтезировать антитела класса М спустя 14 суток после внедрения спирохеты. Иммуноглобулины класса G возникают в крови инфицированного через месяц. В некоторых случаях время образования антител удлиняется до 45 дней, поэтому РПГА-метод при первоначальной форме венерического заболевания менее чувствителен по сравнению с исследованием, осуществляемом на втором и третьем этапах сифилиса.


Тест, в котором применяется гемагглютинация, характеризуется высокой специфичностью (до 98%), что позволяет применять пассивный метод для подтверждения диагноза после использования неспецифического анализа. Степень чувствительности РПГА во вторичной, третичной фазе, а также при скрытой форме сифилиса достигает 100%. Достоверность этого и других трепонемных методик гораздо выше по сравнению с тестом, основанном на микрореакции преципиации, поэтому в настоящее время в лабораториях чаще применяются специфические способы при скрининговых исследованиях.

Часто результаты РПГА-метода остаются положительными даже после завершения терапии инфекционного заболевания. Лишь при проведении лечения на первоначальной стадии анализ становится отрицательным. Тест-система не позволяет дифференцировать раннюю и позднюю форму сифилиса, поскольку положительный результат сохраняется на всю жизнь. Также с помощью РПГА невозможно оценивать степень эффективности терапии.

Исследование с использованием реакции пассивной гемагглютинации рекомендуется пройти не только при наличии признаков инфицирования бледными трепонемами, но и при подготовке к беременности.

Выявление сифилиса на ранней стадии позволяет избежать развития врожденных дефектов у плода и раннего родовспоможения. Анализ может назначаться во время подготовки пациента к плановой операции, а также при желании стать донорами крови.


Методика проведения

В условиях лаборатории к реагентам РПГА специалисты добавляют сыворотку инфицированного человека, что приводит к агглютинации эритроцитов и выпадению их в осадок. Степень склеивания связана с концентрацией белковых образований в крови, поэтому серодиагностика, проводимая этим методом, выявляет не только наличие антител, но и определяет их число.

Результаты исследования представляются в виде титров. При получении положительного анализа можно говорить о наличии в организме пациента бледной трепонемы. В некоторых случаях возможно получение ложноположительной реакции. Значительное завышение показателей означает, что у больного вторичный или скрытый сифилис.

Как подготовиться к сдаче анализа

Рпга анализ крови на сифилисДля того чтобы тест-система показала верные результаты, пациенту необходимо тщательно подготовится к исследованию:

  1. Последний прием пищи должен быть не позже 20 часов вечера. Накануне сдачи крови желательно употреблять продукты с минимальным количеством жиров. Тяжелая пища может способствовать получению ложноположительного или ложноотрицательного результатов. В этом случае пациенту придется пересдавать кровь на повторное исследование.
  2. Забор крови проводится утром, поскольку многим пациентам сложно обойтись без пищи длительное время.
  3. Перед посещением лаборатории запрещается курить, пить кофе и чаи. Вещество, содержащееся в табачном дыме и попавшее в кровь, может привести к получению ложноположительного или отрицательного результатов.
  4. Врачи не рекомендуют непосредственно перед сдачей анализов физически перегружать организм. Запрещено заниматься силовыми тренировками, избегать стрессовых ситуаций.
  5. За несколько дней до процедуры забора крови необходимо полностью отказаться от алкогольных напитков. Спирт может привести к искажению результатов и получению неверных значений.
  6. Перед сдачей анализов допускается выпить небольшое количество чистой питьевой воды без содержания газов.

Как сдают материал на исследование?

Анализ на сифилис РПГА может проводиться с применением венозной, капиллярной крови, а также спинномозговой жидкости (ликвора), забираемой при подозрении на поражение бледными трепонемами нервной системы (нейросифилис).

Во многих лабораториях для проведения теста используют венозную кровь.

Она набирается в чистые сухие пробирки или вакутайнеры без использования веществ-антикоагулянтов. Биоматериал помещается в термостат на час (T=37), после чего переносится на 60-90 минут в холодное место. Центрифугирование получившегося сгустка совершается в течение ¼ часа при 1000 оборотах в минуту.

После расслаивания образца жидкая часть быстро забирается на исследование, поскольку может наступить распад антител. При необходимости плазма может храниться 5 дней в холодном месте (2-8С). Сильная заморозка допускается только однократно. Хранение такого материала возможно не более 1,5 месяцев. Исследование ликвора проводится в краткие сроки. Перед анализом спинномозговая жидкость не подготавливается.

В стандартных тест-системах (Эколаб) применяются следующие наборы:

  • пробирка с эритроцитами с содержащимися на поверхностной части антигенами патогенного возбудителя;
  • флакон, в котором находятся чистые кровяные тельца;
  • емкость с буферным раствором для разведения крови больного;
  • сыворотка инфицированного человека, применяемая для контроля;
  • сыворотка здорового пациента для сравнительного анализа;
  • пластмассовый планшет, имеющий нумерованные лунки для перемешивания образцов и определения результата.

Набор для проведения исследования содержит определенное число реактивов.

Расшифровка результатов — нормы и отклонения

Рпга анализ крови на сифилисСифилитический РПГА-метод предоставляет два вида показателей:

  1. Качественный. Отвечает за наличие в сыворотке белковых телец, появление которых вызвано внедрением в организм патогенного возбудителя.
  2. Количественный. Помогает оценивать степень интенсивности продукции антител и определять характер активности бледной трепонемы.

В первую очередь лаборанты выявляют качественный результат. При обнаружении иммуноглобулинов устанавливается их число.

Анализ может показывать:

  • 4+ – результаты положительные;
  • 3+ – положительные;
  • 2+ – слабоположительные;
  • 1+ – результат сомнителен;
  • – – инфицирования нет.

При получении сомнительного результата рекомендуется провести повторное исследование через 14 дней после первого анализа.

Для первичной формы сифилиса характерны сниженные показатели (менее 1:320). При вторичном венерическом заболевании выявляются повышенные значения титров (более 1:320). При скрытом течении инфекции показатели также занижены.

Отрицательный РПГА-тест означает, что пациент не инфицирован бледными трепонемами либо заболевание находится в инкубационном периоде, который составляет 7-14 дней. В некоторых случаях такой результат получается из-за ошибки лаборанта при взятии биологического материала для проведения исследования.

Причиной получения ложноположительного результата становятся:

  1. Беременность.
  2. Аутоиммунные процессы.
  3. Гепатиты.
  4. Бактериальные эндокардиты.
  5. Состояния после вакцинаций.

Исследования с применением РПГА-метода не позволяют проводить дифференциацию сифилиса и других трепонематозов, ранней и поздней формы венерического заболевания. Результаты необходимо оценивать в совокупности с другими показателями, полученными с использованием лабораторных, инструментальных методов.

Цена вопроса

Стоимость исследования крови с применением реакции пассивной гемагглютинации составляет в среднем 5,6$. При этом в частных лабораторных центрах за взятия венозной крови для проведения анализа берется 2,8$. В государственных клиниках исследование проводится бесплатно по направлению врача-венеролога.

Источник: VeneroMed.ru


You May Also Like

About the Author: admind

Добавить комментарий

Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *

Этот сайт использует Akismet для борьбы со спамом. Узнайте, как обрабатываются ваши данные комментариев.