Титры при сифилисе


препаратов. Каплю полученного серозного экссудата помещают в центре тонкого обезжиренного предметного стекла и покрывают покровным стеклом. При этом капля не должна выходить за пределы покровного стекла. Между линзой темнопольного микроскопа и покровным стеклом помещают маленькую каплю иммерсионного масла, с которой и контактирует линза микроскопа. Яркого освещения препарата добиваются поворотами зеркала и движениями тубуса микроскопа. В темном поле должны появиться движущиеся светящиеся частицы, эпителиальные клетки, лейкоциты. Бледная трепонема выглядит в виде тонкой спирали или тонкого нежного пунктира, с серебристым оттенком. Она совершает плавные движения. Tr. pallidum следует отличать от Tr. refringens, которая может встречаться на половых органах, и в полости рта. Последняя выглядит более толстой, имеет широкие, грубые, неравномерные завитки (5–7 завитков), отличается резкими беспорядочными движениями.

Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) позволяет выявить единственную молекулу ДНК бледной трепонемы среди сотен тысяч других молекул.


тод ПЦР, предложенный в 1983 г. лауреатом Нобелевской премии (1995) Kary Mullis, заключается в амплификации (размножении) в пробирке определенных участков ДНК возбудителя в процессе повторяющихся температурных циклов. На каждом этапе вновь синтезированные молекулы копируются ферментом ДНК-полимеразой, благодаря чему происходит многократное удвоение специфических фрагментов ДНК. Метод включает этапы денатурации ДНК, отжига праймеров и элонгации, или синтеза. Детекция полученных фрагментов ДНК проводится методом электрофореза в агаровом геле (т. е. разделение молекул ДНК по молекулярному весу). ПЦР-тест для выявления ДНК бледной трепонемы был разработан в 1991 году. Метод ПЦР является высоко специфичным, чувствительным и воспроизводимым, при грамотном техническом исполнении и хорошей подготовке образцов он практически не дает ложных результатов и очень оправдан для диагностики сифилиса при небольшом количестве трепонем в исследуемом материале, что особенно ценно при диагностике врожденного сифилиса. И хотя у ПЦР пока исследовательский статус, но уже в недалеком будущем эта реакция должна стать ведущим лабораторным тестом в диагностике сифилиса.

Метод ДНК-зондирования, или гибридизации нуклеиновых кислот

базируется на использовании, как и в методе ПЦР, искусственно синтезированных нуклеотидов, которые называются не праймерами, а зондами. Вначале из образцов клинического материала выделяют ДНК, потом ее кипятят (денатурируют) и фиксируют на нитроцеллюлозном фильтре. Затем идет этап гибридизации с ДНК-зондом, способным специфически гибридизироваться с ДНК искомого возбудителя. На концах зонда имеются метки в виде сульфоновых групп или биотина, против которых имеются


Источник: StudFiles.net

Какие реакции оставляют следы после сифилиса?

Следы после сифилиса могут обнаруживаться практически в любых серологических исследованиях.

В их числе:

  • ИФА;
  • РПГА;
  • РИБТ;
  • РИФ;
  • иммуноблот.

исследования крови на сифилис

Основные причины данного явления:

  • неполноценное лечение;
  • позднее обращение пациента и, как следствие, поздно начатое лечение;
  • наличие у пациента сопутствующих инфекционных заболеваний, возбудители которых могут иметь антигенное сходство с бледной трепонемой (туберкулез, малярия);
  • сохранение очагов сифилиса, которые недоступны для воздействия антибактериальных препаратов, но никак не проявляют себя клинически;
  • переход бледной трепонемы в альтернативные жизненные формы (L-формы, гранулы, цисты) с их длительным сохранением в организме человека;
  • нахождение возбудителя сифилиса в полимембранных фагосомах клеток, в результате чего они бактерии становятся невосприимчивыми ни к антибиотикам, ни к иммуноглобулинам;
  • нарушения липидного обмена.

Существует также теория, согласно которой следы сифилиса обусловлены аутоиммунными реакциями.

Суммарные антитела – след сифилиса

Одна из часто используемых реакций для диагностики сифилиса – это ИФА. Определяются суммарные антитела М и G.

Результат может быть положительным и отрицательным.

В случае положительного результата это не обязательно указывает на заболевание сифилис. Как мы уже выяснили, это может быть всего лишь серологический шрам. Кроме того, ряд заболеваний провоцирует ложноположительные реакции.

ИФА на сифилис

В их числе:

  • инфаркт миокарда;
  • аутоиммунные патологии;
  • ВИЧ, гепатит и ряд других инфекций;
  • беременность;
  • болезни печени и т.д.

Поэтому ИФА является скрининговым, а не подтверждающим методом. На основании одного этого анализа диагноз не ставится.

непростой диагноз

РПГА – след сифилиса

РПГА может использоваться как скрининговый или подтверждающий тест. Он проводится качественным или полуколичественным методом.

Качественный метод позволяет получить только два вида результатов: он бывает положительным или отрицательным. Этот способ подходит для первичной диагностики сифилиса.


проведение РПГА теста

Но он непригоден для обследования лиц, которые уже проходили лечение по поводу этого заболевания. У них применяется полуколичественный РПГА.

Он дает три вида результатов:

  • антител нет – болезнь вылечена, следов сифилиса нет;
  • титр антител больше 1:640 – у пациента активная инфекция;
  • титр антител меньше 1:640 – это следы сифилиса, скорее всего человек вылечился.

РИБТ и РИФ след сифилиса

РИБТ позволяет получить такую градацию результатов:

  • положительная;
  • слабоположительная;
  • сомнительная;
  • отрицательная.

При активном сифилисе она будет положительной.

проведение РИБТ на сифилис

При перенесенном ранее заболевании может быть сомнительной или слабоположительной.

РИФ – еще один подтверждающий тест, обладающий высокой чувственностью.

Переход положительной РИФ в отрицательную является гарантией излечения человека. Но результат этого исследования может оставаться положительным, даже если возбудитель полностью уничтожен антибиотиками.

Иммуноблот – след сифилиса

Иммуноблот вялятся одним из наиболее достоверных методов диагностики сифилиса. Исследуются антитела IgG к разделенным при помощи электрофореза антигенов бледной трепонемы.

Результат может быть положительным, отрицательным или неопределенным. При наличии иммуноглобулинов реакция иммуноблот может быть ложноположительной.


иммуноблот на сифилис

Как убрать следы сифилиса из крови?

Некоторые пациенты стремятся избавиться от следов сифилиса. К сожалению, добиться этого невозможно.

как убрать следы сифилиса из крови

Ни повторный курс антибиотикотерапии, ни процедуры экстракорпорального очищения крови (плазмаферез и другие) не позволяют преодолеть серорезистентность. Но в наличии серологического шрама ничего страшного нет. Антитела не опасны для здоровья человека. При необходимости сдать анализы на сифилис, обращайтесь в нашу клинику. У нас доступны все самые современные исследования.

При подозрении на сифилис обращайтесь к грамотному венерологу-сифилидологу.

Источник: prosifilis.ru

Первичный серонегативный сифилис


твердый шанкрНаиболее эффективным лечение заболевания является на ранней стадии. Это первичный сифилис – стадия образования твердого шанкра. Лучше всего провести терапию до того, как серологические реакции станут позитивными. То есть, ещё до выработки организмом антител к инфекции. В случае своевременного лечения контроль излеченности проводится однократно. Для этого достаточно сдать RPR спустя 3 месяца после завершения курса терапии. При отрицательном результате человека снимают с учета.

Ранний серопозитивный сифилис

Если реакции стали положительными, лабораторный контроль излеченности проводится гораздо дольше.

Пациента ведут до полной негативации серологических реакций. Не должно быть даже сомнительного анализа на сифилис. Он должен стать только отрицательным. После того как будут получены первые отрицательные анализы после лечения больной стоит на учете ещё 6 месяцев. В течение этого времени требуется провести как минимум двукратное обследование.

Поздние формы сифилиса

После лечения поздних форм сифилиса требуется контроль в течение 3 лет. Причем, независимо от того, как быстро негативируются серологические реакции. На второй и третий год после завершения терапии нужно делать нетрепонемные тесты 1 раз в 6 месяцев.

Трепонемные тесты (ИФА, РПГА и другие) проводят 1 раз в год. Если все реакции стали негативными, и если с момента окончания лечения прошло больше 3 лет, человека могут снять с учета.

Нейросифилис


сифилис нервной системыНейросифилис относится к поздним формам сифилиса. При этом заболевании человека тоже обследуют в течение не менее 3 лет. Но дополнительно требуется ликворологический контроль.

Ликвор – это жидкость, которая омывает спинной мозг. Для проведения анализа требуется спинномозговая пункция. Между двумя поясничными позвонками делается прокол. Затем ликвор вытекает по игле, и его собирают в специальный контейнер.

Первый раз этот анализ берут через 6 месяцев после завершения курса терапии.

Доктор смотрит, произошла ли санация ликвора. Для этого ставятся серологические реакции и оценивается уровень цитоза. Если ликвор ещё не очищен от инфекции, проводится повторный курс терапии.

В спинномозговой жидкости оценивается также уровень белка. Однако этот показатель не влияет на принятие решения о необходимости терапии. Потому что белок снижается очень медленно. Даже после успешной терапии он может оставаться повышенным ещё в течение 2 лет.

Если врач определил, что санация ликвора проведена успешно, следующий контроль назначается через 6 месяцев. В дальнейшем человека обследуют каждые полгода в течение 3 лет. При стойкой санации ликвора его снимают с учёта.


Обследование новорожденных на сифилис

Контрольному обследованию подлежат все дети, которые рождены от матерей, страдающих сифилисом. Причем, не важно, заразились ли они инфекцией и получали ли терапию.

педиатр осматривает ребенкаСрок наблюдения длится в общей сложности 1 год, если ребенок не заболел врожденным сифилисом. Первый раз малыша обследуют в возрасте 3 месяца. Его осматривает врач-педиатр, невролог, офтальмолог и ЛОР.

Проводится анализ крови на антитела одним из серологических методов. Если результат отрицательный, следующий контроль делают в возрасте 1 год.

При повторном отрицательном результате малыша снимают с учёта. Если результат серологического теста в 3 месяца положительный, то повторный контроль проводится в 6 месяцев. Следующий – в 1 год. Если ребенок заболел сифилисом и получал терапию, график контроля после лечения такой же, как у взрослых. С той лишь разницей, что на учете маленький пациент стоит не менее 1 года.

В случае положительного результата контрольного исследования требуется:

  • выполнение подтверждающего теста;
  • осмотр представителями нескольких врачебных специальностей с целью обнаружения клинических признаков сифилиса;
  • по показаниям – спинномозговая пункция.

При обнаружении сифилиса проводится лечение. Если инфекция не выявлена, через 3 месяца требуется очередной серологический контроль.

Что такое центр снятия с учета больных сифилисом в Москве

После лечения за каждым пациентом ведется наблюдение в течение определенного количества времени. Этот временной промежуток обычно составляет от 3 месяцев до 3 лет.

Иногда – дольше, если первый курс лечения оказался неудачным и потребовалось «перелечивание». В центре снятия с учета больных человек:

  • сдает анализы;
  • проходит клиническое обследование у представителей разных медицинских специализаций;
  • получает справку о прохождении лечения;
  • получает документ, свидетельствующий о том, что пациент здоров.

Здесь не лечат анонимно. Но иногда без центра снятия с учета не обойтись. Потому что у некоторых пациентов высокие титры антител могут не проходить после лечения. В этом случае они не пройдут ни одну медицинскую комиссию.

справка об излеченности от сифилисаВ Центре человеку выдается справка по анализам от сифилидолога, что в лечении он не нуждается. С таким документом его могут допустить к работе с детьми или на предприятиях пищевой промышленности.


Очень часто женщины сдают анализы перед беременностью. Даже после лечения сифилиса они могут быть положительными. И в этом случае будущей маме потребуется справка о том, что она благополучно избавилась от этого заболевания и снята с учета.

Как снимают с учёта?

Вопрос о снятии учета в каждом случае рассматривается индивидуально. Каждого пациента наблюдают врачи. Проводится клинический и серологический контроль. Больного осматривают терапевт, невролог, офтальмолог и ЛОР. Если человек лечился от нейросифилиса, требуется ликворологический контроль излеченности. Комиссия оценивает:

  • было ли проведено лечение;
  • насколько оно было адекватным, соответствующим клинической ситуации;
  • в каком состоянии находится пациент (клинический осмотр);
  • отрицательны ли результаты серологических тестов;
  • произошла ли санация ликвора.

Если все показатели в норме, человека снимают с учета. 

Титры при сифилисе

Положительный анализ на сифилис после лечения

Большинство людей после лечения ждут отрицательных результатов серологических исследований. Их логика понятна: раз антибиотики убили возбудителя инфекции, он не должен определяться в лабораторных анализах. На самом деле это не всегда так.

Потому что в крови определяется не сама бактерия, а антитела к ней. Это факторы иммунной системы. Они вырабатываются после проникновения бледной трепонемы в организм человека. Но даже если бактерия погибла, это не значит, что антитела тут же должны исчезнуть. Они ещё как минимум несколько месяцев циркулируют в крови и могут определяться в ходе лабораторных тестов. Иногда реакции остаются положительными ещё несколько лет после излечения. Особенно если человек страдал поздней формой сифилиса.

анализ на сифилис: обнаруженоУ некоторых же людей анализы всю жизнь положительные. В ходе большинства исследований анализы выдаются либо количественные, с указанием титра, либо с определенной градацией результатов. Например, результат может быть положительным, слабоположительным, сомнительным.

Доктор оценивает не только сам факт обнаружения антител, но также динамику изменения их количества. То есть, если реакция становится менее положительной, чем была несколько месяцев назад, это говорит в пользу излечения. Но при этом дальнейший контроль не исключается.

Если же титр антител остается стабильным или даже увеличивается, это свидетельствует о неполном излечении. В случае, когда в течение 1 года после лечения сохраняются позитивные серологические реакции, пациент считается серорезистентным.

Данный термин применяется только в отношении тех больных, у кого титр антител не снижается. У некоторых реакция остается положительной. Но при этом наблюдается снижение количества антител. Положительным прогностическим признаком считается:

  • уменьшение интенсивности реакции с положительной до слабоположительной;
  • снижение титра антител в 4 и более раза по сравнению и исходным.

В этом случае человек не считается серорезистентным. Данные результаты оцениваются как замедленная негативизация серологических реакций. За человеком ведется дальнейшее наблюдение.

венеролог назначает анализ на сифилисПовторное исследование ему назначают через 6 месяцев после предыдущего. Врач оценивает:

  • стали ли результаты отрицательными;
  • если нет, есть ли дальнейшая позитивная динамика.

Об излеченности свидетельствует отрицательный результат серологического теста. Но и дальнейшее уменьшение титра антител тоже говорит в пользу успешности терапии. Тем не менее, в этом случае настороженность по поводу возможности рецидива сохраняется. Поэтому человека не снимают с учета. Если реакция положительная, но титр антител продолжает уменьшаться, пациенту назначается следующий серологический контроль. Он снова проводится через полгода.

Если реакции стали отрицательными – человек излечился. Но если снижение титра антител остановилось, это показание к назначению дополнительного курса терапии.

Могут ли возрастать титры после лечения

После проведенного курса терапии титры антител не должны возрастать. Они должны уменьшаться. Поэтому, если концентрация иммуноглобулинов находится на одном уровне, и тем более если она увеличивается, это говорит о том, что сифилис не излечен.

Иммунная система продолжает распознавать возбудителя. Она и дальше вырабатывает антитела. Соответственно, пациент нуждается в повторном курсе терапии. Его назначают сразу же, как только обнаружено отсутствие динамики снижения титра антител или его возрастание. Иногда это случается в первые месяцы после лечения, в иных случаях – через 1-2 года. Как правило, дополнительное лечение назначается однократно. При этом препараты и дозы подбираются таким образом, чтобы достичь максимальной концентрации антибиотиков в крови. Поэтому высокодюрантные пенициллины обычно не используются. Предпочтение отдают препаратам средней дюрантности или растворимым пенициллинам.

лечение сифилисаЛечение может проводиться как в стационаре, так и амбулаторно. Большинство пациентов предпочитают лечиться амбулаторно. Тем более что острой необходимости в госпитализации нет. Ведь состояние пациентов с сохраняющимися позитивными серологическими реакциями обычно не требует круглосуточного наблюдения медицинского персонала.

При амбулаторном лечении используется в основном прокаин-пенициллин. Инъекции назначаются 1 раз в сутки. Разовая доза – 1,2 млн ЕД. В качестве альтернативного препарата может быть использована новокаиновая соль пенициллина. Она назначается в дозе 600 тыс ЕД, дважды в день.

Может ли через много лет стать положительным анализ после лечения

Бывают случаи, когда исследования стали отрицательными. Человека сняли с учета. Но через несколько лет он обследуется, и анализы вновь становятся положительными.

О чем это говорит? Возможны такие причины позитивности реакций после того, как ранее они стали отрицательными:

  • повторное заражение сифилисом;
  • ложноотрицательные результаты.

Если человек переболел сифилисом, это не означает, что он имеет пожизненный иммунитет от этого заболевания. Повторное заражение вполне возможно. Часто оно происходит от того же человека, от которого больной заразился в предыдущий раз. Вот почему важно обследовать и пролечивать всех партнеров. Но иногда серологические исследования дают ложные результаты. Особенно если пациент проходил диагностику с помощью нетрепонемных тестов (RPR или РМП).

мужчина у венеролога

Многие заболевания могут привести к их позитивности. Это различные инфекции, онкологические патологии, аутоиммунные заболевания, поражения печени и т.д.

Нужно сделать подтверждающий тест. Если он окажется негативным, то человек здоров. Если подтверждающее исследование даст положительный результат, потребуется ещё один курс терапии.

Можно ли заразить детей или партнера после лечения, если анализы положительные

Если человек пролечился от сифилиса, то он не заразен при условии, что клинические признаки заболевания отсутствуют. При этом результаты серологических тестов могут оставаться положительными.

Если человека ещё не сняли с учета, и он продолжает раз в несколько месяцев сдавать анализы, это означает, что нет 100% уверенности, что он здоров. Вполне вероятно, что возбудитель сифилиса ещё находится в организме. Но для передачи инфекции этого недостаточно.

Сифилис передается, если возбудитель выделяется во внешнюю среду. А это происходит в основном в первичную и вторичную стадию, когда на половых органах есть твердый шанкр, либо на теле присутствует сыпь. Если нет ни изъязвлений, ни высыпаний, передача инфекции маловероятна.

Могут ли быть после лечения анализы отрицательные, а сифилис есть

Бывает так, что до лечения анализы отрицательные, хотя человек болен сифилисом. Это происходит, если не успевают выработаться антитела. А вот после лечения это практически исключено. Поэтому при отрицательных результатах серологических исследований человека снимают с учета.

Сдать любые анализы на сифилис вы можете в нашей клинике. У нас можно пройти обследование как для первичной диагностики заболевания, так и после его лечения.

Если вам необходимо сдать анализы на сифилис после лечения, обращайтесь к автору этой статьи – венерологу в Москве с многолетним опытом работы.

Источник: onvenerolog.ru

Антитела к бледной трепонеме и серологическая диагностика

При заражении сифилисом в организме больного образуются антитела. Серологическая диагностика помогает врачу изучать динамику образования антител в организме больного сифилисом в начальных стадиях заболевания, в период лечения и после его окончания, решить вопрос рецидив заболевания у больного или повторное заражение (реинфекция), поставить диагноз сифилиса при массовых медицинских условиях.

Антитела к бледной трепонеме IgM

Первыми после заражения начинают вырабатываться антитела IgM. Они начинают выявляться при помощи серологических реакций уже со второй недели после заражения. На 6 — 9 неделях заболевания их количество становится максимальным. Если больной не лечился, то антитела исчезают через полгода. Антитела IgM исчезают через 1 — 2 мес. после лечения раннего сифилиса, через 3 — 6 мес. — после лечения позднего сифилиса. Если регистрируется их рост, то это служит признаком рецидива сифилиса или говорит о повторном заражении. Молекулы IgM крупные и через плаценту к плоду не переходят.

Антитела к бледной трепонеме IgG

Антитела иммуноглобулины IgG появляются в конце первого месяца (на 4-й неделе) от момента заражения. Их титр выше, чем титр IgM. IgG сохраняются после излечения достаточно длительное время.

Неспецифические антитела

Существует множество серологических реакций. Это объясняется антигенной множественностью бледных трепонем. В сыворотке крови больного человека на разных стадиях сифилиса кроме специфических образуются те или иные неспецифические антитела — агглютинины, комплементсвязывающие, иммобилизины, антитела, вызывающие иммунную флюоресценцию, преципитины и др. Серологические реакции по выявлению неспецифических антител обладают относительной специфичностью поэтому, чтобы избежать диагностических ошибок, следует пользоваться не одним, а комплексом серологических реакций (КСР).

Ложноположительные анализы на сифилис

Отличительной особенностью нетрепонемных тестов является получение ложноположительных реакций. Антитела-реагины, которые вырабатываются в крови человека против кардиолипинового антигена, регистрируются не только при сифилисе, но и при других заболеваниях: коллагенозах, гепатитах, заболеваниях почек, тиреотоксикозе,  онкозаболеваниях, при инфекционных заболеваниях (лепра, туберкулез, бруцеллез, малярия, сыпной тиф, скарлатина), при беременности и месячных циклах, при приеме жирной пищи и алкоголя. Отмечено, что с возрастом количество ложноположительных реакций возрастает.

Лабораторная диагностика сифилиса с применением серологических реакций

Серологические тесты на сифилис подразделяются на трепонемные и нетрепонемные.

1. Нетрепонемные тесты

В качестве антигена в этой группе тестов используется кардиолипиновый антиген. Липидные антигены возбудителей сифилиса самые многочисленные. Они составляют 1/3 сухой массы клетки. С помощью нетрепонемных тестов выявляются антитела-реагины, которые вырабатываются против кардиолипинового антигена. В эту группу входит реакция связывания комплемента (РСКкард), реакция микропреципитации (РМП), реакция быстрого определения реагинов плазмы (RPR) и др. С помощью нетрепонемных тестов проводится первичный скрининг на сифилис (обследование групп населения), а возможность получения результатов в количественном варианте позволяет использовать эти тесты с целью контроля эффективности лечения. Положительные результаты нетрепонемных тестов должны подтверждаться трепонемными тестами. Отличительной особенностью нетрепонемных тестов является получение ложноположительных реакций.

2. Трепонемные тесты

В трепонемных тестах используются антигены трепонемного происхождения, выделенные из культуры бледных трепонем. С их помощью подтверждаются положительные результаты нетрепонемных тестов. В группу входят: РСКтреп — реакция связывания комплемента, РИФ — реакция иммунофлюоресценции и ее модификации, РИТ, РИБТ — реакция иммобилизации бледных трепонем, РПГА — реакция пассивной гемагглютинации, ИФА — иммуноферментный анализ.

3. Тесты на сифилис с использованием рекомбинантных антигенов

Антигены для данной группы тестов получают генно-инженерным путем и используют в реакциях — РПГА и ИФА, в анализах иммуноблоттинга (ИБ) и иммунохроматографическом анализе.   

Диагностика сифилиса с применением нетрепонемных тестов

Для выявления сифилиса используются нетрепонемные тесты или комплекс серологических реакций (КСР). Серологическая диагностика применятся с 5-й недели от момента заражения или с 2-3 недели после появления твердого шанкра. Антитела выявляются практически у всех больных со свежим первичным, вторичным и рецидивным сифилисом. Серологические реакции положительные у 70 — 80% больных с третичным активным сифилисом, в 50 — 60% случаев у больных третичным скрытым сифилисом.

Серологические реакции с применением нетрепонемных тестов могут давать ложноположительные результаты.

Реакция связывания комплемента (РСК кард, КСК с КА, реакция Вассермана)

Реакция Вассермана (RW, РВ), изобретенная А. Вассерманом более 100 лет назад, сегодня претерпела множество изменений, однако, как дань традиции, сохранила свое название по настоящее время. Реакция связывания комплемента с применением кардиолипинового антигена предназначена не только для выявления антител, но и выполняется в количественном варианте — с разными разведениями сыворотки, что позволяет использовать ее для контроля эффективности лечения. Низкая чувствительность и специфичность, получение ложноположительных результатов — отрицательные стороны данного вида исследования.

Суть реакции Вассермана заключается в следующем: антигены, которые применяются при постановке реакции Вассермана, в случае наличия антител к возбудителям сифилиса в крови человека посредством комплимента связываются с ними и выпадают в осадок. Интенсивность реакции обозначают знаком (+). Реакция может быть отрицательной (-) — отсутствие осадка, сомнительной (небольшой осадок или +), слабоположительной (++), положительной (+++) и резко положительной (++++).

Более чувствительной является видоизмененная реакция Вассермана — реакция Колмера. С ее помощью выявляются антитела в сыворотках, где реакция Вассермана дала отрицательный результат.

При резко положительных реакциях проводится количественное определение реагинов, для чего используется сыворотка в разведениях от 1:10 до 1: 320, что позволяет использовать данный вид исследования для контроля эффективности лечения. Например, снижение титра антител и последующая их серонегативация (получение отрицательных результатов), говорит об успешном излечении заболевания.

Микрореакция преципитации (МРП)

Микрореакция преципитации применяется для массовых обследований отдельных групп населения, диагностики сифилиса и контроля над эффективностью лечения. Для проведения данного вида исследования необходимо небольшого количества исследуемого материала. В основе микрореакции преципитации лежит иммунологическая реакция антиген-антитело. В случае наличия антител в сыворотке крови обследуемого комплекс антиген-антитело выпадает в осадок с образованием хлопьев. Реакция проводится в лунках специальной стеклянной пластины. Оценивается по интенсивности выпавшего осадка и величине хлопьев в (+) как реакция Вассермана. При обследовании беременных, доноров и для контроля эффективности лечения не применяется. VDRL и RPR являются разновидностями микрореакций.

Все положительные тесты, полученные при проведении неспецифических серологических реакций, требуют подтверждения специфическими реакциями — трепонемными тестами.

Диагностика сифилиса с применением трепонемных тестов

При проведении трепонемных тестов используются антигены трепонемного происхождения. Их отрицательной стороной является невозможность использования для контроля эффективности проводимого лечения, получение положительных результатов при спирохетозах и невенерических трепонематозах и получение ложноположительных результатов при онкологических заболеваниях, лепре, некоторой эндокринной патологии. Такие тесты, как РПГА, ИФА и РИФ остаются положительными многие годы после излечения сифилиса, а в некоторых случаях и пожизненно.

РИБТ и РИФ являются более специфическими из всех серологических реакций, применяемых для диагностики сифилиса. Они позволяют различать ложноположительные реакции, выявлять поздние формы сифилиса, протекающие с отрицательными реакциями. При помощи РИБТ распознаются ложноположительные реакции у беременных, когда необходимо решить вопрос об инфицированности ребенка.

Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ, РИТ)

Суть реакции заключается в том, что антитела, находящиеся в сыворотке крови больного, обездвиживают бледные трепонемы. Отрицательной считается реакция при иммобилизации до 20% возбудителей, слабоположительная — 21 — 50%, положительная — 50 — 100%. РИБТ иногда дает ложноположительные результаты. Тест сложный и трудоемкий, однако, является незаменимым при проведении дифференциальной диагностики скрытых форм заболевания и ложноположительных результатов серологических реакций, в том числе у беременных. РИБТ дает 100% положительный результат при вторичном, раннем и позднем сифилисе, в 94 — 100% случаев — при других формах сифилиса.

Реакция иммунофлюоресценции (РИФ)

Суть реакции заключается в том, что бледные трепонемы (антигены), соединенные с антителами, меченными флюорохромами, издают в люминесцентном микроскопе желто-зеленое свечение. Результат оценивается знаком (+). С помощью РИФ выявляются иммуноглобулины класса А.  Реакция иммунофлюоресценции становится положительной раньше, чем реакция Вассермана. Она всегда положительная при вторичном и латентном сифилисе, в 95 — 100% случаев положительная при третичном и врожденном сифилисе. Техника проведения данного вида исследования проще, чем у РИБТ, но заменить РИФ на РИБТ невозможно, так данная реакция уступает РИБТ по специфичности. РИФ-10 (модификация РИФ) более чувствительна, РИФ-200 и РИФ-абс более специфичны.

Реакция иммунного прилипания бледных трепонем (РИПБТ)

Суть реакции заключается в том, что сенсибилизированные сывороткой больного бледные трепонемы в присутствии комплемента прилипают к поверхности эритроцитов. Полученные комплексы при цетрофугировании выпадают в осадок. Чувствительность данного теста и специфичность близки к РИФ и РИБТ.

Иммуноферментный анализ на сифилис (ИФА)

С помощью ИФА определяются иммуноглобулины класса М и G. Методика IgM – ИФА может быть использована в качестве скринингового и подтверждающего теста. Чувствительность ИФА и его специфичность аналогичны РИФ. При сифилисе ИФА дает положительные результаты с третьего месяца инфицирования и довольно долго (иногда всю жизнь) остается положительным.

Реакция пассивной (непрямой) гемагглютинации (РПГА)

РПГА основана на способности эритроцитов, на которых адсорбированы антигены бледной трепонемы, в присутствии сыворотки больного склеиваться (гемагглютинация). РПГА применяется для диагностики всех форм сифилиса, в том числе скрытого. При применении высокого качества антигена данный вид серологической реакции превышает все остальные тесты по специфичности и чувствительности.

Микробиологическая диагностика

Наряду с серологической диагностикой методика обнаружения бледных трепонем (микробиологическая диагностика) играет важную роль, особенно в период серонегативного сифилиса, когда еще в крови отсутствуют антитела, но уже есть первые проявления свежего первичного сифилиса (твердый шанкр).

Биологическим материалом для исследования служит отделяемое с поверхности твердых язв (шанкров), содержимое пустулезных сифилидов, мокнущих и эрозивных папул, пунктаты инфицированных лимфатических узлов, ликвор и амниотическая жидкость, для проведения ПЦР — кровь.

Наилучшей методикой обнаружения возбудителей сифилиса является исследование биологического материала в темном поле микроскопа. Данная методика позволяет увидеть бледные трепонемы в живом состоянии изучить ее особенности строения и движения, отличить патогенные возбудители от сапрофитов.

Обнаружение бледных трепонем при микроскопии в темном поле — абсолютный критерий окончательной диагностики сифилиса.

Источник: microbak.ru

Выявление в сыворотке крови специфических антител к бледной трепонеме (Treponema pallidum), используемое для подтверждения результатов неспецифических тестов на сифилис, скрининга сифилиса, обследования контактных лиц и доноров крови.

Синонимы русские

Люэс, бледная трепонема.

Синонимы английские

Syphilis, passive hemagglutination test; Syphilis, indirect hemagglutination test; Treponema Pallidum Hemaglutination Assay, TPHA.

Метод исследования

Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Сифилис – инфекция, передающаяся половым путем, возбудителем которой является спирохета Treponema pallidum subspecies pallidum. Попадание этой бактерии в организм приводит к развитию иммунного ответа, сопровождающегося выработкой как неспецифических («нетрепонемных»), так и специфических («трепонемных») антител. Выявление антител к T. pallidumсоставляет основу лабораторного подтверждения сифилиса. В зависимости от типа антител, определяемых в реакции, серологические исследования разделяют на неспецифические («нетрепонемные») и специфические («трепонемные»). Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА) относится к «трепонемным», то есть специфическим в отношении T. pallidum тестам.

РПГА основана на феномене агглютинации эритроцитов, на поверхности которых адсорбированы антигены T. pallidum (реагент РПГА), при добавлении к ним сыворотки больного сифилисом, содержащей специфические антитела к спирохете. Такие антитела появляются в крови пациентов с сифилисом через 2 (IgM) и 4 (IgG) недели после инфицирования. Следует отметить, что этот период может удлиняться до 6 недель. Поэтому чувствительность РПГА в первичном периоде сифилиса несколько уступает чувствительности этого метода во вторичном и третичном периодах и составляет около 86  %. Преимуществом РПГА является высокая специфичность (96-100  %), позволяющая использовать этот анализ в качестве подтверждающего теста после положительного результата какого-либо неспецифического, «нетрепонемного» исследования (например, антикардиолипинового теста, RPR). Чувствительность РПГА во вторичном, третичном периоде сифилиса, а также при скрытом сифилисе составляет 99-100  %.

Чувствительность РПГА и других «трепонемных» тестов превосходит чувствительность неспецифических («нетрепонемных») тестов, таких как микрореакция преципитации (МРП) с кардиолипиновым антигеном. Поэтому в последнее время в качестве скринингового теста на сифилис стали чаще применять «трепонемные» тесты, в том числе РПГА. При положительном результате скринингового исследования на сифилис с помощью РПГА следует провести подтверждающий тест. В этом случае им является любой другой «трепонемный» тест, но не РПГА (например, иммуноферментный анализ).

Как правило, результат РПГА остается положительным даже после лечения сифилиса. Исключение составляет ситуация, когда терапия была проведена в самом начале заболевания. Так как результат сохраняется положительным пожизненно, РПГА не предназначена для дифференциальной диагностики раннего и позднего сифилиса. По этой же причине данное исследование не используют, чтобы оценивать эффективность лечения заболевания.

При добавлении сыворотки больных сифилисом к реагенту РПГА происходит агглютинация (склеивание) и выпадение в осадок эритроцитов. Степень агглютинации зависит от концентрации антител в сыворотке, поэтому РПГА позволяет не только выявить присутствие антител, но и определить их количество. Результат анализа представлен в виде титра антител. Любой положительный титр указывает на возможную инфекцию T. pallidum, однако возможны ложноположительные реакции. Значительно повышенные показатели характерны для вторичного и скрытого раннего сифилиса.

Ложноположительные результаты РПГА наблюдаются в 0,05-2,5  % случаев и чаще всего обусловлены наличием в сыворотке пациента аутоантител (при системных заболеваниях соединительной ткани, например при системной красной волчанке), антител к другим возбудителям, схожим по антигенной структуре с T. pallidum (Borrelia burgdorferi, сапрофитные трепонемы полости рта и гениталий), а также другими физиологическими и патологическими состояниями (беременность, онкологические заболевания, острый инфаркт миокарда). Как правило, титр ложноположительной реакции РПГА низкий. Исключение составляют результаты РПГА у пациентов с диффузными заболеваниями соединительной ткани и злокачественными новообразованиями, когда титр антител может достигать очень высоких значений. Ложноположительные реакции негативируются спонтанно и бесследно в течение 4-6 месяцев (острая ложноположительныя реакция, часто на фоне беременности) или более длительного периода (хроническая ложноположительная реакция).

Учитывая эти особенности, результат РПГА следует интерпретировать с учетом дополнительных анамнестических и лабораторных данных. При подтверждении диагноза «сифилис» необходимо исключить наличие других инфекций, передающихся половым путем, а также обследовать всех половых партнеров и членов семьи пациента.

Для чего используется исследование?

  • Чтобы подтвердить диагноз «сифилис» при положительном результате неспецифического скринингового теста;
  • для скрининга сифилиса;
  • для обследования лиц, находившихся в половом и тесном бытовом контакте с больным сифилисом;
  • для исключения сифилиса у донора крови.

Когда назначается исследование?

При обследовании:

  • пациента с клиническими признаками сифилиса (безболезненный эрозивный или язвенный дефект на твердом основании) и регионарной лимфаденопатии (первичный сифилис), полиморфная кожная сыпь, многоочаговая или диффузная алопеция, сифилитическая лейкодерма (вторичный сифилис), плотноэластический узел с распадом или формированием «сухого» рубца (третичный сифилис);
  • лиц, находившихся в половом и тесном бытовом контакте с больным сифилисом;
  • донора крови;
  • при ежегодном профилактическом обследовании, госпитализации в стационар, оформлении санитарной книжки.

Что означают результаты?

Референсные значения: отрицательно.

Причины положительного результата:

  • первичный, вторичный, третичный, а также скрытый сифилис (приобретенный и врождённый);
  • беременность;
  • ВИЧ-инфекция;
  • гепатиты В и С;
  • употребление инъекционных наркотиков;
  • острый инфаркт миокарда;
  • диффузные заболевания соединительной ткани;
  • возвратный тиф;
  • лептоспироз;
  • клещевой боррелиоз;
  • тропические трепонематозы (фрамбезия, беджель, пинта);
  • воспалительные процессы, обусловленные сапрофитными трепонемами полости рта и гениталий;
  • злокачественные новообразования;
  • обширная травма и переломы;
  • бактериальный эндокардит;
  • туберкулез;
  • инфекционный мононуклеоз;
  • поствакцинальная реакция.

Причины отрицательного результата:

  • отсутствие сифилиса;
  • первые 2-4 недели после инфекции T. pallidum.

Что может влиять на результат?

  • Результат анализа может быть ложноотрицательным в течение первых 2-4 (до 6) недель после заражения.

Важные замечания

  • Исследование не позволяет дифференцировать;
    • сифилис (T. pallidum) и другие трепонематозы (T. pallidumsubspeciespertenue, endemicum, carateum);
    • ранний и поздний сифилис.
  • Исследование не предназначено для контроля лечения сифилиса.
  • Результат анализа следует оценивать вместе с дополнительными анамнестическими, лабораторными и инструментальными данными.

Также рекомендуется

  • Сифилис RPR (антикардиолипиновый тест / микрореакция преципитации), титр
  • Treponema pallidum, IgM, титр
  • Treponema pallidum, IgG, титр
  • Treponema pallidum, IgG вликворе
  • Treponema pallidum, антитела
  • HIV 1, 2 Ag/Ab Combo (определение антител к ВИЧ типов 1 и 2 и антигена p24)
  • Вирусный гепатит B. Контроль активности вируса перед началом лечения
  • Вирусный гепатит C. Анализы для первичного выявления заболевания. Обследование контактных лиц
  • Интимный – оптимальный – анализ мазка у мужчин
  • Интимный – оптимальный – анализ мазка у женщин
  • Госпитализация в хирургический стационар
  • Госпитализация в терапевтический стационар

Кто назначает исследование?

Дерматовенеролог, невролог, врач общей практики, эпидемиолог.

Литература

  • French P, Gomberg M, Janier M, Schmidt B, van Voorst Vader P, Young H; IUST. IUSTI: 2008 European Guidelines on the Management of Syphilis. Int J STD AIDS. 2009 May;20(5):300-9.
  • Seña AC, White BL, Sparling PF. Novel Treponema pallidum serologic tests: a paradigm shift in syphilis screening for the 21stcentury. Clin Infect Dis. 2010 Sep 15;51(6):700-8.
  • Luger A. Diagnosis of syphilis. Bull World Health Organ. 1981;59(5):647-54.
  • Holmes K.K. Sexually Transmitted Diseases / K.K. Holmes, P.F. Sparling, W.E. Stamm; 4th ed. — McGraw-Hill, 2008.

Источник: helix.ru


You May Also Like

About the Author: admind

Добавить комментарий

Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *

Этот сайт использует Akismet для борьбы со спамом. Узнайте, как обрабатываются ваши данные комментариев.