Днк тест на вич


Антитела к ВИЧ-1/2 и антиген ВИЧ-1/2 (HIV Ag/Ab Combo): показания к назначению, правила подготовки к сдаче анализа, расшифровка результатов и показатели нормы.

ВИЧ-инфекция — инфекционная болезнь, развивающаяся в результате многолетнего персистирования (постоянного пребывания) в лимфоцитах, макрофагах и клетках нервной ткани вируса иммунодефицита человека (далее — ВИЧ), характеризующаяся медленно прогрессирующим дефектом иммунной системы, который приводит к гибели больного от вторичных поражений, описанных как синдром приобретенного иммунодефицита (далее — СПИД).

На сегодняшний день зарегистрировано 4 разновидности этого вируса, которые отличаются строением своей оболочки. Клинически значимыми (наиболее распространенными) считаются вирусы иммунодефицита человека 1 и 2 типов.

ВИЧ (Вирус Иммунодефицита Человека) – вирус, относящийся к семейству ретровирусов (семейство РНК-содержащих вирусов, заражающих преимущественно позвоночных), который поражает клетки иммунной системы человека. Через несколько недель с момента заражения начинают вырабатываться антитела к ВИЧ.

Показания на проведение исследования



Показаниями для назначения анализа является подготовка к госпитализации и плановому оперативному вмешательству. В профилактических целях следует провести исследование при подозрении на заражение при половом контакте. В первую очередь это касается лиц групп риска: употребляющих наркотики, вводимые внутривенно, часто меняющих половых партнеров и не использующих средств защиты.

Вирус иммунодефицита человека размножается в организме человека достаточно медленно, и количественный результат в отношении антигенов и антител к вирусу можно получить, как правило, не ранее чем через 3-6 недель после инфицирования. При этом клинические симптомы заболевания еще отсутствуют.

прогрессирование.jpg Через три месяца антигены ВИЧ и антитела к вирусу определяются практически у всех заболевших. Благодаря появлению новых комбинированных тест-систем четвертого поколения получение точного результата качественного анализа на ВИЧ-инфекцию возможно уже через две недели с момента попадания вируса в организм. При этом исследовании выявляют антиген р24 ВИЧ – белок вирусного капсида (внешней оболочки вируса).

Анализ на антитела к ВИЧ 1/2 и антиген ВИЧ 1/2 назначают на этапе планирования и при ведении беременности, когда возможна передача вируса плоду. Анализ проводят и после родов, поскольку ребенок ВИЧ-положительной матери может быть инфицирован во время прохождения через родовые пути и при кормлении грудью.


пути передачи.jpg Лихорадка, потеря веса без объективных причин, повышенная утомляемость, увеличение регионарных лимфатических узлов, потливость, особенно в ночное время, длительный кашель, диарея – эти устойчивые клинические симптомы неясного происхождения, отмечаемые в течение 2-3 недель, также служат показанием к проведению исследования на антитела к ВИЧ 1/2 и антиген ВИЧ 1/2.

Кожные проявления также могут быть симптомом ВИЧ-инфекции, поскольку развиваются на фоне ослабления иммунитета. К их числу относится рецидивирующая герпетическая сыпь, поражающая обширные участки кожи, полость рта, половые органы. Герпес поражает и глубокие слои кожи с развитием язвенно-некротической формы. Образуются язвы и эрозии с последующим образованием рубцов, которых не бывает при обычном герпесе.

Еще один характерный симптом ВИЧ-инфекции – волосатая лейкоплакия, которая связана с активацией латентной инфекции, вызванной вирусом Эпштейна-Барр (что свидетельствует об иммуносупрессии). Заболевание проявляется нитевидными образованиями белого цвета с дальнейшим ороговением пораженных участков языка и слизистой оболочки рта.


Обширные грибковые поражения (в первую очередь дрожжевыми грибками рода Candida) также служат типичным признаком, сопровождающим ВИЧ-инфекцию. Сначала кандидоз поражает слизистую оболочку рта и пищевода, затем распространяется на слизистые желудочно-кишечного и мочеполового тракта. При этом формируются обширные очаги, характеризующиеся болезненностью и склонностью к изъязвлению.

ВИЧ-инфекция может сопровождаться развитием обширного папилломатоза. У ВИЧ-инфицированных женщин папилломы цервикального канала склонны быстро вызывать рак шейки матки.

СПИД-индикаторным заболеванием служит саркома Капоши – многоочаговая сосудистая опухоль, которая поражает кожные покровы и слизистые оболочки. Ее очаги в виде красноватых или буроватых узелков и бляшек сливаются, быстро распространяясь по всему телу. Со временем они образуют опухолевые поля, которые изъязвляются и нагнаиваются.

К числу патологических состояний, которые почти у всех пациентов сопровождают ВИЧ-инфекцию, относят полиаденопатию (увеличение лимфатических узлов). Как правило, в первую очередь увеличиваются под- и надключичные, подбородочные, околоушные и шейные лимфоузлы. В дальнейшем к ним может присоединяться увеличение паховых и бедренных лимфатических узлов. Они могут быть мягкими или плотными на ощупь, безболезненными и подвижными. Иногда несколько лимфоузлов сливаются, образуя своеобразный конгломерат. Воспаление двух и более групп лимфоузлов считают признаком генерализованной лимфаденопатии. Поражение лимфатических узлов может наблюдаться в течение нескольких лет, при этом периоды обострения сменяются ремиссией.


К легочным заболеваниям, сопровождающим ВИЧ-инфекцию, относят туберкулез и пневмонию.

Анализ на антигены и антитела к ВИЧ рекомендуют сделать, если у пациента выявлены заболевания, передаваемые половым путем (сифилис, хламидиоз, гонорея, генитальный герпес, бактериальный вагиноз).

Источник: www.invitro.ru

Суть методики ПЦР при ВИЧ

Полимеразная цепная реакция, или ПЦР, – один из современных методов диагностики ВИЧ. В его основе лежит способность нуклеиновых кислот к саморепродукции. Клетка любого живого организма включает белок и нуклеиновые кислоты:

  • РНК- рибонуклеиновую,
  • ДНК- дезоксирибонуклеиновую.

Эти макромолекулы хранят генетический код. Если концентрация вирусных клеток в крови низкая, в пробе содержатся не целые цепочки ДНК, а их отдельные «кирпичики» – нуклеотиды. Полимеразная цепная реакция выявляет даже такие «обломки» вирусных клеток. Этот анализ крови на ВИЧ позволяет получить результат на ранних сроках после возможного заражения, когда клинические первые симптомы еще не появились.

Наиболее точный результат можно получить, используя для анализа венозную кровь. Перед тем как пройти обследование, за пару дней следует отказаться от жирной пищи и алкоголя. За 2 недели прекратить прием иммуностимулирующих препаратов.


Пробу биоматериала расщепляют в медицинском лабораторном реакторе. Затем фракции обрабатывают ферментами. Реактивы объединяются с ДНК вирусной молекулы и дублируют ее. Из одной клетки получается 2, из 2-х – 4, далее 8. Число растет в геометрической прогрессии. Цепная реакция позволяет в короткий срок увеличить количество вирусного компонента и сделать его заметным для лаборантов.

Нормой является отрицательный результат анализа, который выглядит так: «ДНК вируса не обнаружено». Это и есть референсное (среднестатистическое) значение.

Преимущества и недостатки методики ПЦР при ВИЧ

Диагностика ВИЧ с помощью ПЦР имеет неоспоримые преимущества, но есть и существенные недостатки. К первым относятся:

  • Высокая точность. Крайне мала вероятность получить ложноотрицательные результаты.
  • Универсальность. Для исследования подходит не только кровь, но и другие биологические жидкости (влагалищные выделения, сперма). Слюна, моча также используются, но точность результата будет ниже. В этих средах концентрация вирусных клеток незначительна.
  • Широкий спектр анализа. Один образец биоматериала можно исследовать на несколько заболеваний.
  • Скорость выполнения. Полимеразная цепная реакция относится к срочным методам диагностики. Ответ можно узнать уже на следующий день.

  • Достоверность составляет 80 %. С помощью метода ПЦР можно обнаружить вирусные частицы, даже если их концентрация невелика. Это позволяет диагностировать заболевание на ранних стадиях и своевременно начинать терапию.
  • Ранняя диагностика ВИЧ-инфекции. Время, когда ВИЧ обнаруживают в крови при помощи ПЦР, – 10-14 дней после предполагаемого заражения. Это стандартный отрезок для диагностики вируса иммунодефицита. Антитела на этом этапе еще не обнаруживаются; метод ИФА не работает.
  • Нет возрастных ограничений. Можно проводить это тестирование ребенку с момента рождения.

Недостатки метода ПЦР при диагностике ВИЧ:

  • Более высокая стоимость в сравнении с иммуноферментным анализом 3 поколения.
  • Требуется сложное медицинское оборудование.
  • Погрешность 20%  в связи с высокой чувствительностью реакции. При аутоиммунных заболеваниях, злокачественных опухолях, хронических инфекциях ПЦР может дать ложноположительный результат.

Кому проводится ПЦР

Проведение этого анализа на ВИЧ рекомендовано в следующих случаях:

  • Нужен ранний ответ для предварительного диагностирования. ПЦР помогает подтвердить или опровергнуть результаты ИФА.
  • Иммуноблоттинг дал положительный результат. Если первым проводится ПЦР анализ, то обязательно подтверждение результата методом иммунного блоттинга. Исследования дополняют друг друга. Используя сразу 2 метода, медики исключают возможность ошибок.

  • Когда позитивный ВИЧ-статус подтвержден, ПЦР помогает отследить эффективность проводимой терапии.
  • Используется для исследования донорской крови на наличие антител к ВИЧ.
  • Проводить ПЦР можно даже детям до года. Этот метод применяется, чтобы выяснить ВИЧ-статус новорожденных, мамы которых являются носительницами вируса. Тест, проведенный в первые дни жизни, покажет, произошло ли внутриутробное инфицирование. Заражение могло случиться, когда ребенок проходил по родовым путям. Положительный ВИЧ-статус, приобретенный младенцем в процессе родов, удастся выявить через 2 – 3 недели.

Источник: aids24.ru

Как ПЦР работает при диагностике ВИЧ-инфекции

Принцип действия полимеразной цепной реакции достаточно сложный. Это метод молекулярной генетики, позволяющий анализировать любую короткую последовательность ДНК или РНК. Это можно осуществлять даже в образцах биологического материала, содержащих минимальное количество искомых патогенных возбудителей. Более простым языком ПЦР при ВИЧ можно объяснить так:

  • каждый вирус, в том числе и вирус иммунодефицита, содержит геном, закодированный в ДНК или РНК определенным набором нуклеотидов, которые образуют две параллельные спиралевидные цепи, соединённые между собой;
  • в ходе многочисленных исследований учёным удалось выделить и воспроизвести участок РНК вируса иммунодефицита человека;
  • во время проведения ПЦР происходит многоразовое копирование генома материала при температуре реагента 94 градуса Цельсия, после чего полученную РНК сравнивают с эталонной РНК вируса.

Как ПЦР работает при диагностике ВИЧ-инфекции

По окончании анализа амплификатор выдаёт результат – отрицательный, то есть геном вируса иммунодефицита в исследуемом материале отсутствует, или положительный, когда выявлена частица РНК вируса ВИЧ.

ПЦР является одновременно и качественным, и количественным анализом крови, поскольку определяет наличие вируса и его концентрацию, что важно для мониторинга антиретровирусной терапии.

Полимеразная цепная реакция

Днк вич анализ 7

ПЦР диагностика на ВИЧ расшифровывается как полимеразная цепная реакция. Для исследования данного вида применяются различные типы биологических материалов. Среди них кровь, кроме этого может использоваться секреция из влагалища пациентки или семенная жидкость у мужчин.


Внимание! Слюна для ПЦР при диагностике ВИЧ не используется. Подобный подход признан неэффективным, поскольку в этом материале антитела к ВИЧ находятся в минимальной концентрации. Это же касается мочи, пота и слез.

Показанием к проведению описываемого исследования, является дважды положительный ИФА (иммуноферментный анализ). Об альтернативных назначениях речь пойдет позже.

Кому и в каких случаях проводится диагностика

Полимеразная цепная реакция не принадлежит к скрининговым методам диагностики болезни, а используется для подтверждения диагноза у лиц с подозрением на инфицирование. Тестирование показано в следующих ситуациях.

  • Положительная или слабоположительная реакция анализа ИФА. Выявление антител к ВИЧ с помощью иммуноферментного анализа – это скрининговый метод диагностики ВИЧ, который проводят лицам из групп риска, а также всем желающим определить свой ВИЧ-статус. Все положительные и слабоположительные ИФА-тесты проходят повторную диагностику путём ПЦР.
  • Неоднозначная интерпретация скрининговых тестов на ВИЧ. Для скрининга используют ИФА, после чего материал дообследуют методом иммуноблотинга. Ситуация, когда результаты этих тестов различаются, требует проведения ПЦР.

  • Исследование крови от доноров с целью профилактики распространения ВИЧ. Гемоматериал проверяют одновременно методами ИФА и ПЦР, поскольку при недавнем заражении антитела к вирусу иммунодефицита могут ещё не сформироваться.
  • Тестирование крови новорождённых от матерей, больных СПИДом. Поскольку у женщин с положительным ВИЧ-статусом в крови циркулируют антитела против возбудителя, то и у новорождённого также будут обнаруживаться эти иммуноглобулины. Тест ИФА будет положительным всегда, но это не будет говорить о том, что ребёнок инфицированный. Поэтому всем детям, которые были рождены от матерей, больных СПИДом, проводят ПЦР. Достоверность исследования составляет 99 %. Учитывая риск ложноотрицательного результата, первую ПЦР выполняют ребёнку в возрасте один месяц, а вторую – в четыре месяца. Но даже при двух отрицательных тестах на ВИЧ обязательно проводят ИФА в 12 месяцев, чтобы удостовериться в том, что иммуноглобулины матери исчезли из кровяного русла. Если ИФА в год положительная, то контрольное исследование делают через 6 месяцев.
  • Острый период ВИЧ-инфекции. В этом периоде заболевание маскируется под ОРВИ и моноцитарную ангину, но симптомы беспокоят пациента на протяжении нескольких недель. Признаками, которые также должны насторожить, являются отсутствие ринита и лимфаденопатия нескольких групп лимфатических коллекторов. Симптомы появляются через 3-4 недели после заражения, и антитела к патогену ещё не успевают синтезироваться, поэтому используют метод ПЦР, чтобы идентифицировать РНК ВИЧ.
  • Факт контакта медработника с биологическим материалом пациента с ВИЧ. В данном случае показана химиопрофилактика антиретровирусными препаратами, поэтому необходимо определить сразу после контакта, произошло ли инфицирование медработника или нет.
  • Дифференциальная диагностика ВИЧ 1-го и 2-го типов. ВИЧ 1-го типа более агрессивен и быстрее распространяется, поэтому пациентам с положительным ВИЧ-статусом назначают тест ПЦР с целью идентификации типа возбудителя. Хотя у многих больных одновременно обнаруживают оба типа патогена.

Кому проводится диагностика на ВИЧ

Независимо от ситуации, ПЦР назначается врачом-инфекционистом. Также можно пройти тестирование в частной клинике по собственному желанию, причём анонимно.

Кому назначается?

В первую очередь, ПЦР назначается при подозрении на ВИЧ. Методика также может быть показательной для выявления заболеваний, передаваемых половым путем, наследственных заболеваний.

Справка! ПЦР-диагностика часто проводится по инициативе человека, у которого не проявились симптомы заболевания, однако есть предположение и беспокойство о возможном заражении, например, после незащищенного полового акта, недавнего переливания крови, контакта с зараженным человеком.

Кому еще показано проведение обследования?

  • Людям, у которых анализ ИФА дважды оказался положительным. ПЦР позволит установить окончательный диагноз.
  • Донорам, планирующим сдать кровь.
  • Людям, у которых иммуноблоттинг подтвердил диагноз. Иммунный блоттинг — метод диагностики СПИДа, и обычно его проводят совместно с ПЦР.
  • Людям, находящимся на этапе лечения заболеваний, вызванных ВИЧ. ПЦР позволяет оценить эффективность терапии.
  • Новорожденным, мать которых ВИЧ-положительна (передача вируса происходит примерно в 30% случаев). Уже через 2-3 недели после рождения можно определить, произошло ли заражение.

Как сдаётся анализ

Для диагностики на ВИЧ/СПИД методом ПЦР используют венозную кровь. Тестирование проводят как в государственном учреждении, которое принято называть СПИД-центром, так и частных клиниках.

Если вы подозреваете, что могли заразиться вирусом иммунодефицита человека, то можете пройти диагностику методом ПЦР. Для этого необходимо обратиться в областной СПИД-центр, где исследование будет бесплатным. В частной лаборатории тестирование платное, но результаты будут готовы быстрее.

На забор крови нужно прийти с документами, удостоверяющими личность (паспорт, свидетельство о рождении и тому подобные).

Подготовка пациента

ПЦР-диагностика при ВИЧ не требует какой-либо специальной подготовки. Необходимо только прийти в лабораторию натощак, за два дня до забора материала ограничить физические нагрузки, отказаться от спиртных напитков и не курить за два часа до исследования.

За две недели до тестирования нужно прекратить приём медицинских препаратов, если же это невозможно, то следует предупредить о ситуации врача-лаборанта, который будет интерпретировать результаты ПЦР.

Взятие материала

Забор крови проводят из вены, расположенной в локтевой ямке, с помощью специальной вакуумной стерильной пробирки с иглой. Процедура состоит из следующих этапов:

  • медицинская сестра обрабатывает кожу внутренней поверхности локтевого изгиба 96-процентным этанолом;
  • на среднюю треть плеча накладывают жгут;
  • иглу вводят в вену, и когда начинает поступать кровь, ослабляют жгут;
  • для ПЦР набирают 3-5 мл крови;
  • после забора материала к месту инъекции прикладывают ватный тампон, просят согнуть руку в локтевом суставе.

После процедуры пациенту присваивается номер, пробирка направляется в лабораторию для проведения ПЦР.

Расшифровка результатов

Интерпретация анализов ПЦР проводится непосредственно в лаборатории врачом лабораторной диагностики. Результат выдаётся лично пациенту при предъявлении документов, подтверждающих его личность.

Сколько времени делается анализ

Тестирование крови на ВИЧ с помощью полимеразной цепной реакции длится около шести часов. Результат в государственных лабораториях можно ждать от трёх дней до одной недели, а в частных лабораторных центрах – на 2-й…3-й дни после забора крови.

В некоторых лабораториях можно узнать расшифровку теста в день забора крови, но для этого необходимо доплатить за срочность.

Показатели качественного анализа

Результат качественного ПЦР позволяет определять присутствие или отсутствие в организме вируса иммунодефицита человека. Но оценить вирусную нагрузку с помощью этого теста нельзя. Поэтому качественный ПЦР подходит только для верификации диагноза ВИЧ, но не для мониторинга антиретровирусной терапии.

В заключении тестирования на ВИЧ качественным методом ПЦР можно увидеть три варианта результатов.

  1. Отрицательный – РНК возбудителя не обнаружено.
  2. Положительный – обнаружено геном ВИЧ.
  3. Концентрация РНК ниже порога чувствительности тест-системы.

Интерпретация анализов ПЦР

Количественное исследование

С помощью количественной полимеразной цепной реакции удаётся определить вирусную нагрузку, то есть концентрацию ВИЧ в крови больного. Показанием к проведению данного вида исследования являются:

  • оценка тяжести патологического процесса в организме;
  • мониторинг противовирусного лечения;
  • определение эффективности терапии.

Результаты количественного ПЦР могут быть следующими:

  • 0, то есть РНК вируса в крови пациента не выявлено;
  • 10 тысяч копий на миллилитр – низкая вирусная нагрузка;
  • 20 тысяч копий на миллилитр – показана антиретровирусная терапия;
  • больше 100 тысяч копий на миллилитр – высокий уровень вирусной нагрузки.

Генотипирование

Метод генотипирования ПЦР определяет, каким именно типом ВИЧ произошло инфицирование. Вирус иммунодефицита первого и второго типов имеют схожую клиническую картину, но первый тип ВИЧ более агрессивен, быстро прогрессирует и вызывает осложнения.

Может ли результат быть ложноположительным

Как и любое другое исследование, анализ крови на ВИЧ методом ПЦР может давать ложноположительные результаты. Погрешность тестирования составляет 1-2 %, в зависимости от тест-системы. Специалисты это объясняют порогом чувствительности оборудования для проведения полимеразной цепной реакции.

Кровь на анализ

Могут также определяться положительные ошибочные результаты ПЦР, вызванные нарушением техники забора крови, неправильностью проведения тестирования, загрязнением материала заражённой ВИЧ кровью и некачественными тест-системами.

Чтобы избежать лишних стрессов из-за ложноположительного ПЦР, нужно основательно подойти к выбору лаборатории для проведения тестирования – изучить отзывы о клинике, проверить сертификаты на исследование, удостовериться в квалификации медицинского персонала и так далее.

Через сколько времени после заражения можно обнаружить ВИЧ

Чтобы результат ПЦР был максимально точным, тестирование проходят через 14 дней после возможного заражения, поскольку это время необходимо для увеличения концентрации вируса в организме до порога чувствительности тест-системы. Специалисты рекомендуют также пройти повторную диагностику через месяц после первого анализа. Если не соблюдать сроки, то можно получить ложноотрицательный результат.

Что делать, если результат анализа ПЦР на ВИЧ положительный

Анализы на ВИЧ-инфекцию делают в несколько этапов.

Это занимает период от двух до десяти дней.

Результаты анализов делятся на положительные, отрицательные и сомнительные.

Если результат сомнительный, то немного позже обязательно делают анализ еще раз.

Но даже положительный результат не окончательный.

Пересдача крови на анализ тоже делается.

На достоверность результата влияние оказывает некоторые заболевания и состояния организма.

Проведение анализа может быть конфиденциальным или анонимным.

При конфиденциальном обследовании имя обследуемого человека называется.

При анонимном обследовании анализ делают по идентификационному номеру.

Результат анализа может узнать только подвергшийся обследованию человек.

Даже положительный результат остается тайной.

Это врачебная тайна, и она не может быть нарушена.

Но даже подтвержденный положительный результат еще не приговор.

В современных условиях ВИЧ-инфицированные подвергаются пожизненной антиретровирусной терапии, что позволяет сохранить им жизнь.

Наоборот, чем раньше обнаружено наличие ВИЧ-инфекции в организме, тем плодотворнее будет лечение.

Стоимость исследования

В государственном СПИД-центре можно сделать тест на ВИЧ бесплатно по ОМС, при условии наличия направления от врача поликлиники. При отсутствии направления от доктора за исследование придётся заплатить от 1000 до 2000 рублей.

В частных лабораторных центрах анализ ПЦР на инфицирование вирусом иммунодефицита человека проводится на платной основе, а именно:

  • Гемотест – 2590 рублей (качественный);
  • Инвитро – 12 570 рублей (комплексный);
  • Центр молекулярной диагностики – 2800 рублей (качественный);
  • Медси – 3600 рублей (качественный).

Источник: MedikTest.ru


You May Also Like

About the Author: admind

Добавить комментарий

Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *

Этот сайт использует Akismet для борьбы со спамом. Узнайте, как обрабатываются ваши данные комментариев.